3. í nghĩa khoa học và thực tiễn
1.2.2. Đặc tớnh nuụi cấy sinh vật hoỏ học
1.2.2.1. Đặc tớnh nuụi cấy
Theo Nguyễn Như Thanh và cs (1997) [53], vi khuẩn E. coli dễ dàng
phỏt triển trờn mụi trường nuụi cấy thụng thường, một số chủng cú thể phỏt triển được ở mụi trường tổng hợp nờn người ta đó chọn chỳng để nghiờn cứu về sinh vật học.
E. coli là trực khuẩn hiếu khớ tuỳ tiện, cú thể sinh trưởng ở nhiệt độ từ 5-
40oC, nhiệt độ thớch hợp nhất là 37oC. pH thớch hợp nhất là 7,2 - 7,4, phỏt triển được ở pH từ 5,5-8.
- Mụi trường thạch thường: Sau 24 giờ nuụi cấy ở 37oC, vi khuẩn hỡnh thành những khuẩn lạc trũn, ướt búng lỏng, khụng trong suốt, màu tro trắng nhạt, hơi lồi, đường kớnh từ 2-3mm. Nếu nuụi lõu, khuẩn lạc cú màu nõu nhạt và mọc rộng ra, cú thể quan sỏt thấy cả những khuẩn lạc dạng R (Rough) và M (Mucoid).
- Mụi trường nước thịt: Sau 24 giờ nuụi cấy ở 37oC, vi khuẩn E. coli phỏt triển rất nhanh, mụi trường rất đục, cú cặn màu tro trắng nhạt lắng xuống đỏy, đụi khi cú màng màu xỏm nhạt trờn mặt mụi trường, mụi trường cú mựi thối (do vi khuẩn phỏt triển sinh ra H2S).
- Trờn mụi trường MacConkey: Sau 24 giờ nuụi cấy ở 37oC, khuẩn lạc cú màu cỏnh sen, trũn nhỏ, hơi lồi, khụng nhầy, rỡa gọn, khụng làm chuyển màu mụi trường.
- Trờn mụi trường thạch mỏu: Sau 24 giờ nuụi cấy ở 37oC, hỡnh thành khuẩn lạc to, ướt, lồi, viền khụng gọn, màu sỏng, cú thể cú hoặc khụng cú dung huyết, tuỳ thuộc vào chủng vi khuẩn.
- Trờn mụi trường Endo: Sau 24 giờ nuụi cấy ở 37oC, vi khuẩn hỡnh thành khuẩn lạc màu đỏ mận chớn, hoặc khụng cú ỏnh kim.
- Trờn mụi trường EMB (Eosin Methyl Blue): Sau 24 giờ nuụi cấy ở 37oC, vi khuẩn hỡnh thành những khuẩn lạc màu tớm đen cú ỏnh kim.
- Trờn mụi trường thạch SS: E. coli phỏt triển thành cỏc khuẩn lạc cú màu đỏ.
- Trờn mụi trường thạch Brilliant Green Agar: Sau 24 giờ nuụi cấy ở 37oC, vi khuẩn E. coli hỡnh thành khuẩn lạc dạng S (Smooth), màu vàng chanh.
1.2.2.2. Đặc tớnh sinh vật hoỏ học
- Phản ứng lờn men đường: Vi khuẩn E. coli lờn men sinh hơi cỏc loại đường Lactose, Fructose, Glucose, Levulose, Galactose, Xylose, Manitol; lờn men khụng chắc chắn cỏc loại đường Duncitol, Saccarose và Salixin. Hầu hết cỏc chủng vi khuẩn E. coli đều lờn men đường Lactose nhanh và sinh hơi.
Đõy là đặc điểm quan trọng để dựa vào đú phõn biệt vi khuẩn E. coli và Samonella.
- Một số phản ứng sinh hoỏ khỏc: Phản ứng Indol và MR dương tớnh, phản ứng H2S, VP, Urea õm tớnh.