Xác định chế độ chiết ethanol
+ Xác định nồng độ ethanol trong công đoạn chiết ethanol
Bố trí thí nghiệm theo sơ đồ sau:
Hình 2.2. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nồng độ ethanol
Rong tươi
Rửa sạch
Chiết ethanol ở nồng độ (0)
10 20 30 40 50 60 70 80 90 99,5
Khối lượng chất khô
Sử dụng ethanol 96% pha lần lượt các nồng độ 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 và ethanol tuyệt đối.
Lấy 500g rong tươi xay nát trộn đều trong máy xay sinh tố, chia làm 10 phần
bằng nhau, cho vào 10 hộp nhựa có nắp vặn kín đựng 225ml ethanol nồng độ (v/v)
khác nhau: 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, ethanol tuyệt đối, chiết ở nhiệt độ phòng. Sau 24 giờ tiến hành lấy dịch và lọc qua giấy lọc. Mỗi dung dịch định mức thành 250 ml bằng các nồng độ cồn ban đầu, lấy 20ml vào cốc 50ml, sấy khô toàn bộ các cốc
chứa dung dich đến khối lượng không đổi ở 600C, -1bar, (khoảng 2 ngày).
Cho vào mỗi cốc 20ml ethanol tuyệt đối, lọc qua giấy lọc, rửa giấy lọc ở mỗi
cốc bằng 5ml ethanol tuyệt đối, rửa 3 lần. dịch lọc và dịch rửa được gộp chung vào cốc 50ml đã biết trước khối lượng. Sấy khô toàn bộ các cốc chứa dung dich đến khối lượng không đổi ở 600C, -1bar.
Đem cân lại cốc xác định được khối lượng chất tan có trong 20ml dịch chiết là giá trị tăng lên của khối lượng cốc, nhân khối lượng này với 12.5 ta có được khối lượng các chất chuyển hóa thứ cấp có trong 50g rong biển.
+ Xác định nhiệt độ chiết ethanol
Bố trí thí nghiệm theo sơ đồ sau:
Hình 2.3. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ chiết ethanol
Rong tươi
Rửa sạch
Chiết ethanol ở các nhiệt độ (0C )
RT 30 40 50
Khối lượng chất khô
Lấy 200g rong tươi xay nát trộn đều trong máy xay sinh tố, cho vào 4 bình thủy tinh có nắp vặn kín thể tích 500ml, mỗi bình đựng 225ml ethanol 800 ở nhiệt độ
phòng. Chiết các chất chuyển hóa thứ cấp từ rong trong 4 bình ở 4 nhiệt độ khác
nhau: nhiệt độ phòng, 30, 40 và 500C.
Sau 24 giờ, tiến hành lọc dịch thu được qua giấy lọc ta được dịch lọc trong.
Mỗi dung dịch định mức thành 250 ml, lấy 20ml vào cốc 50ml, sấy khô toàn bộ các
cốc chứa dung dich đến khối lượng không đổi ở 600C,-1bar, (khoảng 2 ngày).
Cho vào mỗi cốc 20ml ethanol tuyệt đối, lọc qua giấy lọc, rửa giấy lọc ở mỗi
cốc bằng 5ml ethanol tuyệt đối, rửa 3 lần. Dịch lọc và dịch rửa được gộp chung vào cốc 50ml đã biết trước khối lượng. Sấy khô toàn bộ các cốc chứa dung dịch đến khối lượng không đổi ở 600C, -1bar.
Đem cân lại cốc, xác định được khối lượng chất tan là giá trị tăng lên của khối lượng cốc, nhân giá trị này với 12.5 ta có được hàm lượng chất chuyển hóa thứ cấp từ
50g rong biển.
+ Xác định thời gian chiết ethanol
Bố trí thí nghiệm theo sơ đồ sau:
Hình 2.4. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian chiết ethanol
Rong tươi
Rửa sạch
Chiết ethanol ở các thời gian ( h )
6 12 18 24
Khối lượng chất khô
Lấy 200g rong tươi xay nát trộn đều trong máy xay sinh tố, cho vào 4 bình thủy tinh có nắp vặn kín thể tích 500ml, mỗi bình đựng 225ml ethanol 800 ở nhiệt độ
phòng. Thời gian ngâm là 6h, 12h, 18h, 24h ứng với mỗi bình.
Sau từng khoảng thời gian trên ta thu dịch và lọc dịch qua giấy lọc được các
dịch trong. Mỗi dung dịch định mức thành 250 ml, lấy 20ml vào cốc 50ml, sấy khô
toàn bộ các cốc chứa dung dich đến khối lượng không đổi ở 600C (khoảng 2 ngày). Cho vào mỗi cốc 20ml ethanol tuyệt đối, lọc qua giấy lọc, rửa giấy lọc ở mỗi cốc
bằng 5ml ethanol tuyệt đối, rửa 3 lần. dịch lọc và dịch rửa được gộp chung vào cốc
50ml. Sấy khô toàn bộ các cốc chứa dung dich đến khối lượng không đổi ở 600C, -
1bar. Đem cân cốc xác định khối lượng chất tan.