CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.7. XÁC đỊNH KHẢ NĂNG KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ CỦA VI TẢO
Ankistrodesmus gracilis A
Qua những nghiên cứu ứng dụng thực tiễn thấy rằng những hợp chất có trong vi tảo lục ựã có những ựóng góp ựáng kể trong ựời sống của con người. Chúng giúp tăng cường trắ tuệ, tăng sức ựề kháng, cải thiện hệ miễn dịch của con người. Chúng có khả năng sửa chữa tế bào bị tổn thương và tái tạo tế bào mới, chống lão hóa tế bào và làm chậm quá trình lão hóa. đặc biệt là khả năng chữa và tiêu diệt một số tế bào của bệnh ung thư như ung thư vú, ung thư tiền liệt tuyến, ung thư ruột, ung thư tủyẦ của con người [34,37].
Sinh khối vi tảo tươi ựược chiết trong dung môi methanol/ chloroform (1:1, v/v) ựem cô quay chân không thu cặn chiết khô ựem thực hiện phép thử
hoạt tắnh sinh học diệt và ức chế tế bào ung thư biểu mô miệng (KB). Kết quả ựo ựược ở các bước sóng 540 nm trên máy spectrophotometer Genios TECAN và tắnh toán, các mẫu ựo có nồng ựộ ức chế 50% lượng tế bào ung thư biểu mô (IC50) nhỏ hơn 128 ộg/mlcó tác dụng phòng và ựiều trị ung thư ở mức tế bào.
Kết quả thu ựược bảng 3.4. và hình 3.10.
STT Tên loài IC50 (ộg/ml) IC50 (ộg/ml) 1 Amphiprora alata 84.17 2 Ankistrodesmus gracilis A 26.50 28.57 3 Chaetoceros muelleri 67.24 4 Chlorella vulgaris 78.98 5 Gyrosigma limosum >128 6 Merosira nummuloides >128 7 Navicula radiosa >128 8 Navicula tuscula 67.24 9 Scenedesmus sp. >128 10 Scenedesmus quadricauda >128
Bảng 3.4. Kết quả thử hoạt tắnh sinh học diệt và ức chế tế bào ung thư biểu mô miệng
Kết quả cho thấy nồng ựộ ức chế 50% lượng tế bào ung thư biểu mô (IC50) của vi tảo Ankistrodesmus gracilis A là 26.5 ộg/ ml ở lần thử 1 và 28.57 ộg/ ml ở lần thử 2. Trong số 10 loài vi tảo ựem ựi thăm dò khả năng kháng tế bào ung thư, vi tảo Ankistrodesmus gracilis A có tác dụng ức chế khả năng tăng sinh tế bào ung thư biểu mô miệng (KB) trên mô hình thực nghiệm mức cao nhất. Vi tảo
Ankistrodesmus gracilis A thể hiện tiềm năng kháng tế bào ung thư và có tác dụng phòng và ựiều trị ung thư ở mức tế bào.
(a) (b)
Hình 3.10. Mật ựộ tế bào ung thư biểu mô sau thử nghiệm (a) Mẫu ựối chứng
(b) Mẫu thử nghiệm với cặn chiết Ankistrodesmus gracilis A
Cũng từ hình 3.10, nhận thấy mật ựộ tế bào ung thư biểu mô miệng mất khả năng liên kết, tế bào bị phá vỡ, số lượng tế bào giảm ựáng kể. Vậy hợp chất trong vi tảo lục thể hiện kháng tế bào ung thư biểu mô miệng, có thể là thành phần các acid béo hay chlorophyll hay là một hợp phần cấu tử nào ựó. để tìm hiểu rõ hơn tiếp tục tiến hành phân tắch các mẫu sinh khối vi tảo Ankistrodesmus gracilis A trên sắc ký bản mỏng nhằm xác ựịnh khả năng phân tách các cấu tử tương ứng các chất có trong thành phần.
Hình 3.11. Kết quả chạy sắc ký bản mỏng
Kết quả sắc ký bản mỏng cho thấy các cấu tử thành phần hoàn toàn tách biệt, thể hiện trên các vệt màu trên bản mỏng. đặc biệt ựối vi tảo Ankistrodesmus gracilis A có hoạt tắnh kháng tế bào ung thư mạnh nhất ựược chạy sắc ký lần 2, các vệt mầu hiện lên rõ rệt, gồm có: 1 vệt cao nhất màu xanh, 3 vệt thấp hơn, các vệt hoàn toàn tách biệt nên có khả năng cạo tách các cấu tử. điều này mở ra khả năng nghiên cứu tiếp theo là tách chiết và xác ựịnh cụ thể thành phần các cấu tử.
A
KẾT LUẬN
1. Chủng vi tảo lục Ankistrodesmus gracilis A ựều phát triển tốt trên cả bốn môi trường C, BBM, BG 11, Bold 3N. Trong ựó phát triển tốt nhất trên môi trường BBM mật ựộ tế bào ựạt 62.8 x 106/ml, pH tối ưu cho sinh trưởng của chủng vi tảo Ankistrodesmus gracilis A là 7 Ờ 8, hàm lượng vi tảo ựạt 0.054 và 0.056 mg/ml.
2. Dựa vào phương pháp phân loại truyền thống và phương pháp phân loại hiện ựại dựa trên phân tắch giải trình tự gen rDNA 18S, chủng vi tảo lục
Ankistrodesmus A ựược xác ựịnh thuộc loài Ankistrodesmus gracilis có kắ kiệu Y16937.
3. Hàm lượng acid béo ựối với chủng này là cao, ựặc biệt chủng này có chứa thành phần acid béo không no quan trọng là arachidonic acid (AA) (20: 4n-6) 0.025%, anpha-linoleic acid (18: 3n-3) 0.851% ựặc biệt là palmitoleic (16: 1n-7) 10.329%.
4. Với nồng ựộ ức chế 50% lượng tế bào ung thư biểu mô (IC50) của vi tảo
Ankistrodesmus gracilis A là 28.57 ộg/ml. Vi tảo Ankistrodesmus gracilis
A có tác dụng ức chế khả năng tăng sinh tế bào ung thư biểu mô miệng (KB) trên mô hình thực nghiệm mức cao.
KIẾN NGHỊ
1. Tiếp tục nghiên cứu khả năng kháng tế bào ung thư biểu mô của vi tảo chủng Ankistrodesmus gracilis A, phân tắch rõ các thành phần cấu tử có khả năng ức chế tế bào ung thư biểu mô.
2. Cần phải tiếp tục nghiên cứu, phân tắch các thành phần sinh hóa khác như: protein, vitamin, hydrate, carbonẦ
3. Do ựiều kiện nghiên cứu chưa cho phép, chúng tôi chưa tiến hành nuôi thử trên quy mô công nghiệp chủng Ankistrodesmus gracilis ựể dùng cho nuôi trồng thủy sản. Vì vậy cần tiếp tục nghiên cứu ựánh giá tác ựộng của chủng này tới sự sinh trưởng, phát triển của thủy sản ựể có thể sớm ựưa vào nuôi trồng thủy sản, nhằm tăng chất lượng, tăng năng suất và giảm giá thành trong nuôi trồng thủy sản.