Là phương pháp hiệu quả cho việc ựịnh tắnh, ựịnh lượng và tinh sạch các hợp chất hữu cơ.
Nguyên tắc chung của phương pháp sắc ký là dựa trên sự phân bố các chất giữa hai pha là pha ựộng và pha tĩnh. Pha ựộng có thể là chất khắ hoặc lỏng ựể
lấy mẫu qua vùng chứa pha tĩnh. Pha tĩnh chứa chất rắn hoặc lỏng gọi là các chất hấp thụ có khả năng chứa các chất hòa tan. Mẫu phân tắch chứa một hay nhiều cấu tử khi tiếp xúc với pha tĩnh và pha ựộng các cấu tử khác tách nhau ra do chúng có ái lực khác nhau với cả hai pha.
Việc tách các chất trong sắc kắ bản mỏng [20] dựa trên sự phân tách các chất giữa hai pha:
- Pha cố ựịnh là chất hấp thụ ựược trải rộng trên một phiến kắnh tạo thành lớp mỏng.
- Pha ựộng là dung môi thắch hợp ựựng trong bình có nắp ựậy kắn.
Trong quá trình sắc ký dung môi di chuyển làm dịch chuyển các thành phần trong mẫu (ựã ựược chấm thành từng vết trên phiến kắnh trải chất hấp phụ).
Tiến hành thắ nghiệm:
Pha mẫu sau cô quay thành 1 ml bằng hỗn hợp dung môi CHCl3/MeOH (1/1) 0.1 Ờ 10 mg/ml, chấm toàn bộ mẫu lên trên bản silicagel. đặt bản mỏng trong bồn thủy tinh chứa 50 ml hỗn hợp dung môi ethyl acetat : isopropanol : nước = 8 : 5 : 3 (v/v), trong 45 Ờ 60 phút. Sau khi làm khô tới nhiệt ựộ phòng, nhuộm TLC bằng nyhydrin 2% trong butanol bão hòa. Sấy khô, quan sát các vết xuất hiện trên nền TLC. Sau ựó ựánh dấu, cạo các vết lên cùng với microcystin chuẩn. Tái chiết rút ựộc tố này bằng hỗn hợp dung môi methanol : nước (80 : 20). đem dịch này ly tâm ở tốc ựộ 8000 vòng/phút, trong 15 phút. Sau ựó lọc qua cột C 18.