Nhỏ vài giọt dịch chiết n-hexan trên giấy lọc, sấy nhẹ cho bay hơi hết dung môi. Phản ứng dương tính khi xuất hiện vết mờ trên giấy lọc.
Kết quả: Xuất hiện vết mờ trên giấy lọc (phản ứng dương tính).
Nhận xét: Dược liệu chứa chất béo.
3.1.2. Định tính carotenoid
Cô 5 ml dịch chiết n-hexan tới cắn. Thêm 1-2 giọt acid sulfuric đặc (TT). Phản ứng dương tính khi thấy xuất hiện màu xanh ve.
Kết quả: Xuất hiện màu tím đen (phản ứng âm tính).
Nhận xét: Dược liệu không chứa carotenoid.
3.1.3. Định tính phytosterol
Cho vào ống nghiệm 1 ml dịch chiết n-hexan. Bốc hơi dung môi đến cắn. Cho vào ống nghiệm 1 ml anhydrid acetic (TT), lắc kỹ, thêm 1 ml acid sulfuric đặc (TT)
theo thành ống nghiệm. Phản ứng dương tính nếu kết quả cho thấy giữa hai lớp chất lỏng xuất hiện một vòng màu tím đỏ, lắc nhẹ, lớp chất lỏng trên có màu xanh.
Kết quả: Xuất hiện vòng màu tím đỏ giữa hai lớp chất lỏng, lắc nhẹ, lớp chất lỏng phía trên có màu xanh lá (phản ứng dương tính).
Nhận xét: Dược liệu chứa phytosterol.
Định tính các thành phần trong dịch chiết ethanol
Cho 5 g bột dược liệu vào bình nón 250 ml, thêm 100 ml EtOH 90%, đun cách thủy 10 phút, lọc nóng. Dùng dịch lọc làm các phản ứng định tính flavonoid, coumarin, acid hữu cơ, acid amin và đường tự do.
3.1.4. Định tính saponin
- Phản ứng tạo bọt
Cho 0,5 g bột dược liệu vào ống nghiệm có dung tích 20 ml, thêm vào đó 4 ml nước cất, đun sôi nhẹ, lọc nóng qua bông vào ống nghiệm có dung tích 20 ml, thêm 5 ml nước cất. Bịt ống nghiệm bằng ngón tay cái, lắc mạnh ống nghiệm theo chiều dọc 5 phút, để yên và quan sát. Phản ứng dương tính khi bọt bền sau 10 phút.
Kết quả: Bọt bền sau 10 phút (phản ứng dương tính), - Phản ứng Salkowski
Cho vào bình nón 2 g dược liệu, thêm 20 ml EtOH 90%, đun sôi cách thủy. Lọc lấy dịch lọc vào một ống nghiệm, bốc hơi dịch lọc đến cắn. Hòa tan một ít cắn trong 1 ml anhydrid acetic (TT). Thêm vào dung dịch 0,5 ml cloroform (TT). Dùng pipet nhỏ từ từ 1-2 ml acid sulfuric(TT) vào thành ống nghiệm. Phản ứng dương tính khi xuất hiện vòng tím đỏ ở mặt ngăn cách.
Kết quả: Xuất hiện vòng màu tím đỏ ở mặt ngăn cách (phản ứng dương tính).
Nhận xét: Dược liệu chứa saponin.
3.1.5. Định tính coumarin
- Phản ứng mở, đóng vòng lacton
+ Cho vào 2 ống nghiệm, mỗi ống 1 ml dịch chiết. Ống 1 thêm 0,5 ml dung dịch
natri hydroxy 10% (TT), ống 2 để nghuyên. Đun sôi cả 2 ống nghiệm, để nguội. Quan sát nếu có các hiện tượng sau thì dương tính. Ống 1 dung dịch có tủa vàng hoặc tủa đục màu vàng, ống 2 trong suốt.
+ Thêm vào cả 2 ống nghiệm, mỗi ống 2 ml nước cất. Lắc đều. Quan sát nếu thấy hiện tượng sau thì dương tính. Ống 1 trong suốt, ống 2 có tủa đục.
+ Acid hóa ống 1 bằng vài giọt acid chlohydric đặc (TT), ống 1 sẽ trở lại tủa đục như ống 2.
Kết quả: Ống 1 và ống 2 không có hiện tượng như trên (phản ứng âm tính). - Phản ứng diazo hóa
Cho vào ống nghiệm nhỏ 1 ml dịch chiết, thêm vào đó 2 ml dung dịch natri hydroxy 10% (TT). Đun cách thủy sôi 5 phút rồi để nguội. Thêm vài giọt thuốc thử Diazo mới pha. Phản ứng dương tính khi xuất hiện màu đỏ gạch.
Kết quả: Không xuất hiện màu đỏ gạch (phản ứng âm tính).
Nhận xét: Dược liệu không chứa coumarin.
3.1.6. Định tính flavonoid
- Phản ứng cyanidin
Cho 2 ml dịch chiết vào ống nghiệm, thêm một ít bột magie kim loại, rồi nhỏ từ từ 4-5 giọt acid chlohydric đậm đặc (TT). Đun nóng cách thủy sau vài phút. Phản ứng dương tính nếu xuất hiện màu tím đỏ.
Kết quả: Không thấy xuất hiện màu tím đỏ (phản ứng âm tính). - Phản ứng với FeCl3 5%
Cho 1 ml dịch chiết vào ống nghiệm, thêm 2-3 giọt dung dịch FeCl3 5% (TT), lắc nhẹ. Phản ứng dương tính khi dung dịch chuyển màu xanh lục, xanh hoặc nâu.
Kết quả: Dung dịch chuyển màu nâu (phản ứng dương tính). - Phản ứng với kiềm
Cho vào ống nghiệm 1 ml dịch chiết, thêm vài giọt dung dịch natri hydroxy 10% (TT), phản ứng dương tính khi màu vàng của dung dịch tăng thêm.
Kết quả: Dung dịch chuyển sang màu nâu (phản ứng âm tính).