Cú hai phương phỏp đang được sử dụng để nuụi cấy tế bào gốc vựng rỡa giỏc mạc: Tạo tấm tế bào biểu mụ giỏc mạc từ mảnh vựng rỡa và tạo tấm biểu mụ giỏc mạc từ dịch treo cỏc tế bào biểu mụ vựng rỡa. Năm 2007, Alex J. và cộng sự đó tổng kết 17 bỏo cỏo nuụi và ghộp vựng rỡa cho bệnh nhõn, thấy cú tới 11 bỏo cỏo đó dựng phương phỏp thứ nhất [6] . Mảnh tổ chức lấy từ vựng rỡa đặt lờn trờn mặt màng đỏy của màng ối, và được ngõm trong dung dịch nuụi cấy. Dung dịch bao gồm chất dinh dưỡng và cỏc chất kớch thớch tăng sinh và di chuyển của tế bào biểu mụ vựng rỡa trờn bề mặt của màng ối, quỏ trỡnh này diễn ra trong khoảng từ 14 đến 28 ngày. Kỹ thuật “air lifting”
được một số tỏc giả sử dụng nhằm tạo điều kiện cho cho lớp tế bào nuụi cấy tiếp xỳc với khụng khớ và kớch thớch sự tăng sinh và biệt húa tế bào biểu mụ thành nhiều lớp. Một số tỏc giả khỏc cũng sử dụng thờm một lớp ở dưới đỏy của hệ thụng nuụi cấy trờn, lớp này cú 3T3 fibroblasts. 3T3 fibroblasts là cỏc tế bào được tỏch ra từ bào thai của chuột, chỳng cú khả năng tăng sinh mạnh, cú vai trũ thỳc đẩy sự phỏt triển và di cư tế bào biểu mụ nuụi cấy, đặc biệt cho tổ chức da và giỏc mạc. Phương phỏp tạo tấm biểu mụ giỏc mạc từ dịch treo cỏc tế bào biểu mụ vựng rỡa được sử dụng trong 6 nghiờn cứu. Từ mảnh mụ vựng rỡa giỏc mạc , dựng enzym tỏch lấy cỏc tế bào biểu mụ, dịch treo gồm cỏc tế bào biểu mụ vựng rỡa riờng lẻ hoặc thành từng đỏm tế bào và nuụi cấy trờn cỏc chất liệu khỏc nhau như kớnh tiếp xỳc, mảnh collagen hay paraffin, hoặc tấm fibrin hoặc màng ối. Quỏ trỡnh nuụi cấy cũng mất khoảng từ 14 đến 21 ngày. Năm 2000, Koizumi N. và cộng sự đó cụng bố kết quả
nghiờn cứu nuụi cấy tế bào biểu mụ VRGM trờn màng ối để nguyờn biểu mụ và màng ối loại bỏ biểu mụ. Kết quả sau 14 ngày nuụi cấy cho thấy cỏc tế
bào biểu mụ phõn chia, phỏt triển và tăng nhanh về số lượng. Cỏc tế bào BMGM phỏt triển lờn bề mặt biểu mụ của màng ối. Sau 28 ngày nuụi cấy thỡ cỏc tế bào biểu mụ đó phỏt triển tầng hoỏ [23].
17