Phương pháp định lượng

Một phần của tài liệu Nghiên cứu bào chế nhũ tương nano nhỏ mắt chứa diclofenac (Trang 30 - 31)

DC giải phóng từ NTN, DC có trong pha nước và DC có trong NTN được định lượng bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao – HPLC.

 Điều kiện

- Pha tĩnh: Cột Eclipse XDB-C8 5 μm, kích thước 4,6 mm × 150 mm.

- Pha động: hỗn hợp methanol và dung dịch đệm phosphat pH 2,5 với tỷ lệ 75/25, lọc qua màng cellulose acetat 0,45 µm, rồi siêu âm 15 phút.

- Tốc độ dòng pha động: 1 mL/phút. - Thể tích tiêm mẫu: 20 µL.

- Detector UV bước sóng: 276 nm.

 Mẫu chuẩn

Cân chính xác một lượng DC khoảng 25 mg, hòa tan hoàn toàn bằng methanol trong bình định mức 25 mL, bổ sung vừa đủ thể tích, thu được dung dịch gốc nồng độ 1 mg/mL.

Tiếp tục pha loãng dung dịch gốc 20 lần bằng pha động để thu được mẫu chuẩn có nồng độ khoảng 50 µg/mL, lọc qua màng lọc 0,45 µm.

 Mẫu thử

- Định lượng DC giải phóng in vitro: 1 mL mẫu lấy được từ môi trường khuếch tán trực tiếp đem đi phân tích.

- Định lượng DC có trong mẫu NTN: Pha loãng mẫu NTN 20 lần bằng pha động, lọc qua màng lọc 0,45 µm.

- Định lượng DC có trong pha nước: xử lý mẫu, lấy pha nước đem pha loãng 10 lần bằng pha động, lọc qua màng lọc 0,45 µm.

22

 Công thức tính

- Nồng độ DC trong mẫu thử được tính theo công thức sau:

Ct = .

Trong đó:

Ct: Nồng độ DC trong mẫu NTN (mg/mL)

mc: Khối lượng DC cân ban đầu để pha mẫu chuẩn (mg) St: Diện tích pic chính của mẫu NTN (mAU.giây) Sc: Diện tích pic của mẫu chuẩn (mAU.giây)

- Phần trăm DC giải phóng từ NTN được tính toán như trình bày ở mục 2.3.5. - Phần trăm DC có trong pha nước được tính toán như trình bày ở mục 2.3.4. - Phần trăm DC chứa trong mẫu NTN được tính theo CT:

H = . 100

Trong đó:

H: phần trăm DC chứa trong mẫu NTN (%) Ct: Nồng độ DC trong mẫu NTN (mg/mL)

C0: Nồng độ lý thuyết của DC trong NTN bào chế (mg/mL), C0 = 0,93 mg/mL.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu bào chế nhũ tương nano nhỏ mắt chứa diclofenac (Trang 30 - 31)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(64 trang)