LẬP CÁC HỢP CHẤT
2.2.1 Sắc ký lớp mỏng (TLC)
Sắc ký lớpmỏng được thực hiện trên bảng mỏng tráng sẵn 25 DC−Alufolien 60 F254 (Merck). Phát hiện chất thử bằng đèn tử ngoại ở bước sóng 254 nm và 365 nm, hoặc có thể hiện màu bằng dung dịch H2SO4 10% trong ethanol.
2.2.2 Sắc ký cột
mm) − Merck với các hệ dung môi khác nhau phù hợp với từng chất. 2.2.3 Kết tinh nhiều lần
Có thể sử dụng kỹ thuật kết tinh nhiều lần trên các hệ dung môi đã chọn lọc.
2.3.1 Tổng hợp dẫn xuất 3′,4′,5,7-tetraallyloxy-3-hydroxyflavonol (QAL)
2.3.1.1 Cơ sở thực nghiệm
Với tác nhân acid thông thường, proton H+ sẽ tấn công vào nguyên tử oxy của nhóm OH, do hiệu ứng rút điện tử của vòng thơm nên nguyên tử oxy không còn giàu điện tử nữa, vì vậy proton không thể tấn công vào để hình thành cation trung gian được, phản ứng ether hóa không thể diễn ra. Để tổng hợp ether hiệu quả, ta phải sử dụng phương pháp tổng hợp của Williamson.Phản ứng được thực hiện bằng cách cho quercetin phản ứng với allylbromide trong môi trường kiềm. Quy trình thực nghiệm:
• Ether hóa quercetin với allyl bromide và potassium carbonate. • Lọc loại các chất dư sau phản ứng.
• Cô quay thu sản phẩm thô, tinh chế lại với chloroform.
2.3.1.2 Tiến hành thực nghiệm
Cho vào bình cầu 2 cổ (1 g, 3.31 mmol) quercetin và 50 mL acetone, khuấy đều trên bếp từ có gia nhiệt cho đến khi hòa tan hết quercetin. Sau đó, cho thêm 4 g K2CO3 vào, rồi nhỏ giọt từ từ (6.3 g, 4.5 mL, 52 mmol) allyl bromide trong 1h bằng ống nhỏ giọt. Hỗn hợp phản ứng được đun hồi lưu trong 6.5 h và theo dõi phản ứng bằng sắc ký lớp mỏng.
Sau khi phản ứng kết thúc, tiến hành lọc loại bỏ rắn màu trắng (chính là potassium carbonate), thu được dịch lọc màu vàng. Đem dịch lọc đi cô quay, ta thu được sản phẩm thô rắn màu vàng nâu.
Sản phẩm thô được làm sạch bằng sắc kí cột với hệ dung môi 100% chloroform.
(1 g, 3.31 mmol) quercetin, 50ml acetone Hòa tan Ether hóa Lọc Cô quay acetone 4 g K2CO3
(4.5 mL, 52 mmol) allyl bromide / nhỏ giọt trong 1h Rửa
Sắc ký cột Kết tinh QAL Nước cất Hệ: 100% Chloroform Acetone, methanol
Đun hồi lưu 6.5h
Sơ đồ 2.2. Quy trình tổng hợp QAL
2.3.2 Tổng hợp dẫn xuất 3′,4′,5,7−tetraallyloxyflavone (LAB)
2.3.2.1 Cơ sở thực nghiệm
LAB được tổng hợp bằng phản ứng Williamson tương tự như QAL.
2.3.2.2 Tiến hành thực nghiệm
Cho vào bình cầu 2 cổ (0.5 g, 1.75 mmol) luteolin và 50 mL acetone, khuấy đều trên bếp từ có gia nhiệt cho đến khi hòa tan hết luteolin. Sau đó, cho thêm 3.5 g K2CO3 vào, rồi nhỏ giọt từ từ (2.796 g, 2 mL, 23.1mmol) allyl bromide trong 1h bằng ống nhỏ giọt. Hỗn hợp phản ứng được đun hồi lưu trong 6.5 h và theo dõi phản ứng bằng sắc ký lớp mỏng.
Sau khi phản ứng kết thúc, tiến hành lọc loại bỏ rắn màu trắng (chính là potassium carbonate), thu được dịch lọc màu vàng. Đem dịch lọc đi cô quay, ta thu được sản phẩm thô rắn màu vàng nâu nhạt.
Sản phẩm thô được làm sạch bằng sắc kí cột với hệ dung môi 100% chloroform.
(0.5 g, 1.75 mmol) luteolin, 50 ml acetone Hòa tan
Ether hóa Lọc Cô quay
Kết tinh LAB Nước cất
Hệ: 100% Chloroform Acetone, methanol
Đun hồi lưu 6 h
Sơ đồ 2.3. Quy trình tổng hợp LAB
2.3.3 Tổng hợp dẫn xuất 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxy-6,8- (dipyrolidin-1-ylmethyl)4H-chromen-4-one (Q12)
2.3.3.1 Cơ sở thực nghiệm
Cơ sở cho phản ứng tổng hợp dẫn xuất Q12 là phản ứng Mannich. Phản ứng Manich là một phản ứng cộng ái nhân hay cũng có thể coi là một phản ứng ngưng tụ giữa một amine và nhóm carbonyl. Trong đó cặp điện tử tự do của N tác kích vào C mang điện dương tạo sản phẩm trung gian là ion iminium. Ion iminium tiếp tục phản ứng với quercetin để tạo nên sản phẩm Q12.Quy trình thực nghiệm.
• Quercetin phản ứng với sản phẩm của phản ứng Mannich (pyrolidine và formaldehyde)
• Lọc loại dung môi
• Tinh chế sản phẩm bằng ethanol.
2.3.3.2 Tiến hành thực nghiệm
Cho vào bình cầu (1 g, 3.31 mmol) quercetin vào 50 mL ethanol, khuấy đều cho đến khi hòa tan hết quercetin. Cho (2.73 mL, 33.31mmol) pyrrolidine và (2.84 g, 35 mmol) dung dịch formaldehyde 37% vào phểu nhỏ giọt, nhỏ từ từ vào bình cầu trong 1 h. Hỗn hợp được khuấy ở nhiệt độ phòng trong 3 h. cho đến khi dung dịch trong bình cầu chuyển sang màu vàng tươi.
Sau khi phản ứng kết thúc, lọc loại bỏ dung môi thu được sản phẩm rắn màu vàng tươi. Sản phẩm thô được làm sạch bằng dung môi ethanol.(1 g, 3.31 mmol) quercetin,
50ml ethanol Hòa tan
Khuấy Lọc Rửa
Tinh chế Sấy Q12 ethanol ethanol lạnh Dịch lọc
(33.31mmol) pyrrolidine và (35 mmol) formaldehyde 37% 3h, nhiệt độ phòng Nhỏ giọt trong 1 h Sơ đồ 2.4. Quy trình tổng hợp Q12 2.3.4 Tổng hợp dẫn xuất 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxy-8-((4-methyl- piperazin-1-yl)methyl)4H-chromen-4-one (Q13) 2.3.4.1 Cơ sở thực nghiệm
Cơ sở cho phản ứng tổng hợp dẫn xuất Q13 tương tự như dẫn xuất Q12.
2.3.4.2 Tiến hành thực nghiệm
Cho vào bình cầu (1 g, 3.31 mmol) quercetin vào 50 mL ethanol, khuấy đều cho đến khi hòa tan hết quercetin. Cho (3.70 mL, 33.31mmol) 1-methyl piperazine và (2.84 g, 35 mmol) dung dịch formaldehyde 37% vào phểu nhỏ giọt, nhỏ từ từ vào bình cầu trong 1 h. Hỗn hợp được khuấy ở nhiệt độ phòng trong 3 h. cho đến khi dung dịch trong bình cầu chuyển sang màu vàng trắng nhạt.
Sau khi phản ứng kết thúc, lọc loại bỏ dung môi thu được sản phẩm rắn màu vàng trắng nhạt. Sản phẩm thô được làm sạch bằng các dung môi ethanol.
(1 g, 3.31 mmol) quercetin, 50ml ethanol Hòa tan
Khuấy Lọc
ethanol lạnh Dịch lọc
(33.31mmol) 1-methyl piperazine và (35 mmol) formaldehyde 37% 3h, nhiệt độ phòng
Nhỏ giọt trong 1 h
Sơ đồ 2.5. Quy trình tổng hợp Q13