•Độc tính cấp
Cho chuột nhắt trắng uống Tecan tới liều 5g/kg chuột (là liều cao nhất nên thử đối với các hoạt chất tinh khiết theo OECD [23]) không thấy có sự thay đổi bất
thường nào trên hoạt động của chuột, không có chuột nào chết trong vòng 72 giờ
và 7 ngày sau khi uống thuốc thử. Vì vậy theo bảng phân loại của OECD thì Tecan là chất không có độc tính.
•Độc tính bán trường diễn
Trong suốt thời gian thí nghiệm kéo dài 4 tuần liên tục, chuột cống trắngở
cả 3 lô (lô uống dung môi pha mẫu thử, lô uống Tecan liều 60 mg/kg cân nặng
và lô uống Tecan liều 180 mg/kg cân nặng) đều không có biểu hiện bất thường nào mặc dù ở mức 60 mg/kg chuột nghiên cứu không đạt mức tăng cân bằng lô chứng nhưng ở liều cao hơn (180mg/kg) Tecan lại không thể hiện tác dụng này.
Do đó, chưa thể kết luận Tecan có gây ảnh hưởng đến cân nặng của động vật nghiên cứu khi cho uống liên tục trong 28 ngày.
Số lượng và chất lượng các tế bào máu phản ánh tình trạng của cơ quan
tạo máu. Nếu thuốc tác động đến cơ quan tạo máu sẽ làm thay đổi số lượng và chất lượng các tế bào máu [13]. Vì vậy để đánh giá độc tính bán trường diễn của Tecan trên hệ tạo máu, chúng tôi đã tiến hành định lượng số lượng hồng cầu, hemoglobin, hematocrit, số lượng tiểu cầu và số lượng bạch cầu. Kết quả
sau 4 tuần theo dõi, tại ba thời điểm nghiên cứu, các chỉ số về số lượng hồng cầu, nồng độ hemoglobin, tỷ lệ hematocrit và số lượng bạch cầu đều không có sự khác biệt có ý nghĩ thống kê giữa các lô thử nghiệm. Như vậy Tecan ở liều 60 mg/kg cân nặng chuột cống trắng (liều có tác dụng dược lý ở động vật thử
nghiệm) và liều gấp 3 lần 180mg/kg cân nặng không có độc tính trên các chức
năng tạo máu của chuột cống trắng.
Khi đánh giá ảnh hưởng của Tecan lên chức năng thận của chuột, có thể đánh giá thông qua nồng độ creatinin huyết và urê huyết. Creatinin huyết là thành phần ổn định nhất trong máu, hầu như không phụ thuộc vào chế độ ăn
hoặc những thay đổi sinh lý, mà chỉ phụ thuộc vào khả năng đào thải của thận. Khi cầu thận bị tổn thương, nồng độ creatinin huyết tăng sớm hơn urê huyết. Creatinin huyết là chỉ tiêu tin cậy nên thường được dùng để theo dõi và đánh
giá chức năng thận. Vì vậy trong nghiên cứu này chúng tôi đã lựa chọn thông số creatinin để đánh giá chức năng thận.. Kết quả đánh giá trên chuột cống trắng sau 2 tuần và 4 tuần uống Tecan liên tục, nồng độ creatinin trong máu chuột không có sự thay đổi khác biệt so với lô chứng. Như vậy tectoridin liều
tương đương với liều có tác dụng dược lý và liều gấp 3 lần đều không ảnh
hưởng đến nồng độ creatinin, vậy nên uống Tecan không ảnh hưởng đến chức
năng lọc của cầu thận ở chuột cống trắng. Kết quả này phù hợp với hình ảnh
quan sát đại thểvà cấu trúc vi thểcủa thận.
Để đánh giá ảnh hưởng của mẫu thửlên chức năng gan – một cơ quan đảm nhận nhiều chức năng rất quan trọng trong cơ thể, chúng tôi đã tiến hành theo
dõi, định lượng hoạt độ SGOT, SGPT và định lượng nồng độ cholesterol, protein toàn phần trong máu chuột. Nếu thuốc gây tổn thương tế bào gan thì hoạt độ SGOT, SGPT trong máu sẽ tăng. Mặt khác nếu thuốc ảnh thưởng đến chức năng chuyển hóa lipid, chuyển hóa protein thì các thông số cholesterol và protein toàn phần cũng sẽ bị ảnh hưởng [13]. Kết quả đánh giá ảnh hưởng của Tecan trên chức năng gan của chuột cống trắng sau 4 tuần uống mẫu thử cho thấy Tecan ở cả 2 mức liều 60 mg/kg và 180 mg/kg đều không gây tổn thương
tế bào gan, hoạt độ SGOT và SGPT không có sự khác biệt giữa các lô thử
nghiệm (p>0.05). Tecan cũng không ảnh hưởng đến chức năng tổng hợp lipid của gan, phản ánh thông qua nồng độ cholesterol toàn phần không có sự khác biệt ở cả3 lô.
Xem xét tác động của thuốc trên chức năng tổng hợp protein của gan, kết quả ở thời điểm ngày thứ 28 của nghiên cứu, chỉ số nồng độ protein toàn phần
ở lô thử 1 và lô thử 2 cao hơn có ý nghĩa so với lô chứng và so với thời điểm
trước khi cho uống mẫu thử(p<0,05) trong khi tại thời điểm ngày thứ 14 không có sự khác biệt. Như vậy, Tecan nếu sử dụng kéo dài (4 tuần trở lên), có thể ảnh hưởng đến chỉ số protein toàn phần. Các chỉ số khác liên quan đến chức
năng của tế bào gan (SGOT, SGPT) không có sự khác biệt có ý nghĩa giữa lô thử và lô chứng, giữa thời điểm trước và sau khi dùng thuốc. Quan sát đại thể
gan chuột sau 28 ngày uống Tecan liên tục ở cả 2 mức liều đều cho thấy biểu hiện của gan hoàn toàn bình thường, không có dấu hiệu tổn thương. Kết quả
này cũng phù hợp với một nghiên cứu của Xiong Y và cộng sự. Yiong Y đã nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan của tectoridin được chiết xuất từ hoa của P.
lobata (Willd.) Ohwi. Trong đó chuột nhắt trắng được cho uống ethanol (5g/kg), 12h/1 lần, tổng cộng ba liều. 1h sau liều cuối cùng, cho chuột uống tectoridin (25, 50 và 100mg/kg) năm lần trong ba ngày liên tiếp. Giết chuột tại thời điểm 4h sau khi điều trị bằng tectoridin. Ngộ độc cấp tính ethanol dẫn đến sự gia tăng đáng kể các enzym SGOT, SGPT, triglycerid và gây rối loạn chức
này. Ngoài ra, tectoridin làm giảm đáng kể sự sản xuất acid phản ứng thiobarbituric. Hơn nữa, tectoridin cũng làm giảm biểu hiện của PPARα và các gen mục tiêu, bao gồm cả acyl-CoA dehydrogenase chuỗi trung bình (MCAD), acyl-CoA oxidase (ACO), 4A cytochrome P450 (CYP 4A) mRNA và mức độ
hoạt động của enzyme [31]. Một nghiên cứu khác của Sang Hoon Jung và cộng sự đã chỉ ra tectorigenin và tectoridin làm giảm đáng kể hoạt độcủa các enzym transaminase trong huyết thanhở động vật nghiên cứu đã bị gây tổn thương gan
bằng CCI4. Cả hai hợp chất cũng tác động làm gia tăng mạnh các enzym chống
oxy hóa như hepatic-ytosolic superoxide dismutase (SOD), catalase và glutathione peroxidase (GSH-px) - ở chuột bị gây độc bằng ethanol [26]. Điều này cho thấy tectoridin không những không gây độc đối với gan mà còn có tác dụng bảo vệ gan trong một số trường hợp ngộ độc.
Chương 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
4.1. KẾT LUẬN
Qua kết quảthực nghiệm chúng tôi xin đưa ra một số kết luận như sau: