Đánh giá độc tính bán trường diễn của Tecan trên chuột cống trắng, tiến
hành theo hướng dẫn của WHO 1997 và hướng dẫn trong tài liệu [13]. Chuột cống trắng được chia làm 3 lô, mỗi lô 9 con:
Lô 1: Uống dung môi pha thuốc NaCMC 0,5%.
Lô 2: Uống Tecan liều 60 mg/kg cân nặng/ngày (liều tương đương với liều có tác dụng dược lý).
Lô 3: Uống Tecan liều 180 mg/kg cân nặng/ngày.
Mẫu thử được pha thành dạng hỗn dịch trong NaCMC để đảm bảo thể tích cho uống đồng đều ở tất cả các lô (0,2 ml/kg cân nặng/ngày).
Nghiên cứu được tiến hành theo sơ đồsau:
Nuôi ổn định 5
N0 N
14 N28
Theo dõi chuột và cho chuột uống mẫu thửvào 9h hằng ngày
Cho chuột uống mẫu thử hằng ngày: 1 lần/ngày theo đúng lô vào khoảng 9 giờ
sáng.
Thời gian cho uống mẫu thử: 28 ngày (4 tuần) liên tục.
Các chỉ tiêu theo dõi, đánh giá trước và trong quá trình nghiên cứu:
- Tình trạng chung: Theo dõi và ghi chép các biểu hiện để đánh giá sự
phát triển chung của cơ thể động vật thí nghiệm. Cụ thể, các thông số theo dõi gồm:
+ Hành vi: Tăng đi lại, giảm đi lại, nằm im, run rẩy, co giật… + Lông (mượt, dựng đứng, rụng…) và các cơ quan: Mắt, mũi…
+ Tình trạng ăn, uống.
+ Quan sát phân và nước tiểu.
+ Cân nặng: Theo dõi cân nặng chuột tại các thời điểm trước khi bắt đầu dùng mẫu thử (N0); 14 ngày sau khi dùng mẫu thử (N14) và sau khi cho uống mẫu thử 28 ngày (N28).
- Đánh giá ảnh hưởng của Tecan trên các thông số vềhuyết học: Xác định số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, tỷlệthểtích huyết cầu trong máu (HCT) và tỷlệhuyết sắc tố(Hb) tại các thời điểm N0, N14 và N28.
- Đánh giá ảnh hưởng của Tecan tới chức năng gan: Định lượng hoạt độ
serum glutamo-oxalo transaminase (SGOT) và serum glutamo-pyruvic transaminase (SGPT), cholesterol toàn phần, protein toàn phần tại các thời điểm N0, N14, N28.
- Đánh giá ảnh hưởng của Tecan tới chức năng thận: Định lượng hoạt độ
creatinin huyết tương tại các thời điểm N0, N14 và N28.
- Mô bệnh học: Sau 28 ngày cho chuột uống mẫu thử, giết 30 % số chuột của mỗi lô (3 chuột/lô) để quan sát về đại thể và vi thể gan, thận của chuột ở
các lô thực nghiệm.