Quy trình:
- Bước 1: Ly tâm ống máu đã chống đông bằng EDTA với tốc độ 3000 vòng/phút trong 3 phút. Dùng pipet bán tự động lấy phần bạch cầu ở giữa lớp huyết tương và phần các tế bào máu vào ống 2ml.
- Bước 2: Cho 20 µl proteinase K vào ống 1,5 ml.
- Bước 3: Thêm 10 µl phần máu có chứa nhiều bạch cầu.
- Bước 4: Thêm 190 ml dung dịch PBS.
- Bước 5: Thêm 200 µl dung dịch buffer AL.
- Bước 6: Vortex 5-6 lần.
- Bước 7: Ủ ở nhiệt độ 56 °C trong vòng 10 phút.
- Bước 8: Thêm 200 µl ethanol (96-100%).
- Bước 9: Vortex 5-6 lần.
- Bước 10: Chuyển phần dung dịch vào cột ly tâm Dneasy đặt vào ống 2ml.
- Bước 11: Ly tâm lạnh với tốc độ 8000 vòng/phút trong 1 phút.
- Bước 12: Loại bỏ phần ống phía dưới, chuyển cột ly tâm sang một ống 2ml khác.
- Bước 13: Thêm 500 µl dung dịch buffer AW1 vào cột ly tâm.
- Bước 14: Ly tâm lạnh với tốc độ 8000 vòng/phút trong 1 phút.
- Bước 15: Loại bỏ phần ống phía dưới, chuyển cột ly tâm sang ống 2ml khác.
- Bước 16: Thêm 500 µl dung dịch buffer AW2.
- Bước 17: Ly tâm lạnh với tốc độ 14000 vòng/phút trong 3 phút. Lặp lại bước này 2 lần.
- Bước 18: Loại bỏ phần ống phía dưới, chuyển cột ly tâm sang ống Eppendoft 1,5 ml.
- Bước 19: Thêm 100 µl dung dịch buffer AE vào cột ly tâm, chú ý nhỏ vào giữa cột. Để ống ở nhiệt độ phòng trong 10 phút.
- Bước 20: Ly tâm lạnh với tốc độ 8000 vòng/phút trong 1 phút.
- Bước 21: Loại bỏ cột ly tâm, thu phần dung dịch phía dưới.
- Bước 22: Bảo quản dung dịch DNA ở nhiệt độ -30°C trong thời gian dài.