- Bc 1: Cân 100 m gb t go vào bình tam giác hay bình nh mc 100 ml, thêm vào 1ml ethanol 95% l c u sau ó cho thêm vào 10 ml NaOH 1N và qua
9 OM5740 1 Jasmine13 2 OM6403 3 OM235 10 OM828 20 OM4488 30 OM6627 40 OM
10 OM8928 20 OM4488 30 OM6627 40 OM6559
i v i gen Pi-2:
i d u chu n STS-RG64 cho s n ph m khu ch i ADN chi m 80% t ng . S n ph m không có s a hình, tuy nhiên khi phân c t các s n ph m này b ng enzyme c t gi i h n Hae III và ki m tra trên gel agarose 1,5% th y xu t hi n d ng a hình (hình 3.5). Gi ng chu n kháng T Tép th hi n 2 alen rõ ràng v i hai kích th c 700 bp và 600 bp. Gi ng chu n nhi m LTH xu t hi n 2 alen v i kích th c 700 bp và 500 bp. K t qu này c ng t ng t nh k t qu nghiên c u tr c ây c a Bùi Chí B u [8] v ng d ng STS-RG64 tìm gen kháng Pi2 trên các gi ng T Tép và Sóc Nâu. D a vào b ng hình trên gel xác nh gi ng s 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 11, 17, 18, 24 t ng ng v icác gi ng mang gen kháng Pi2. Các gi ng t ng ng v i v trí gi ng nhi m trên các gi ng s 10, 12, 13, 14, 15, 16, 19, 20, 21, 22. Các gi ng trên
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 M
25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 3940 41 42 43 44 45 46 47 48 M
220bp
các gi ng s 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35 t ng ng v i các gi ng mang alen d h p t . Nh v y, trong s 44 gi ng lúa cao s n c ánh giá ã phát hi n các gi ng IR64, OM2395, OM6161, OM2514, OM6797, MNR1, C53, Jasmine 6, OM8928, P47, OM5756, OM4498, OM4559 mang genPi2(ph l c 3.4).
Hình 3.5: S n ph m khu ch i PCR v i STS-RG64 trên gel agarose 1,5% a các gi ng lúa cao s n (enzyme c t gi i h nHae III)
1 LTH 8 OM8928 15 OM10028 22 OM7253 29 OM99972 T Tép 9 P47 16 OM6403 23 OM10010 30 OM6778