Các chỉ tiêu hóa học đất
pHH2O: Trích bằng nước cất, tỷ lệ ly trích đất : nước là (1:2,5) đo bằng pH kế (Jackson, 1962).
EC(mS/cm): Trích bằng nước cất, tỷ lệ ly trích đát : nước là (1:2,5) đo bằng EC kế (Jackson, 1962).
Hàm lượng chất hữu cơ (%CHC): Xác định theo phương pháp Walkley– Black (1934), dựa trên nguyên tắc oxi hóa chất hữu cơ bằng K2Cr2O7 trong môi trường H2SO4 đậm đặc, sau đó chuẩn độ lượng dư K2Cr2O7 bằng FeSO4 1N với chất chỉ thị màu là diphenylamine.
2Cr2O72- + 3C + 16H+ 4Cr3+ + 3CO2 + 8H2O
K2Cr2O7 + 7H2SO4 + 6FeSO4 Cr(SO4)3 + K2SO4 + 7H2O
Lân (P) dễ tiêu (mgP/kg) được xác định qua 3 phương pháp:
- Phương pháp PBray2: Trích đất với 0,1N HCl + 0,03N NH4F (tỷ lệ 1 đất : 7 dung dịch trích). So màu của phosphomolybdate với chất khử là Ascorbic axit trên máy so màu màu bằng máy quang phổ ở bước sóng 880nm.
- Phương pháp POlsen (1954): Được xác định bằng dung dịch trích Sodium hydrogen carbonat (NaHCO3) 0,5M ở pH = 8,5 với tỷ lệ đất và dung môi là 1:20. Lắc trong thời gian 30 phút sau đó ly tâm và lọc qua giấy lọc. Hút 5ml dung dịch trích từ mẫu vào bình định mức 25ml, thêm 2-3 giọt chị thị màu 4-Nitrophenol và điều chỉnh pH khoảng 4 bằng cách nhỏ từng giọt dung dịch H2SO4 2,5M đến khi hết màu hoặc màu vàng nhạt. Lắc mẫu và để 1 lúc cho thoát khí CO2. So màu của phosphomolybdate với chất khử là Ascorbic axit trên máy so màu màu bằng máy quang phổ ở bước sóng 880nm.
- Lân trích nước : Trích đất và nước với tỷ lệ 1:10 và đem lắc trong thời gian 1 giờ. Trích 5ml dung dịch mẫu + dung dịch hiện màu với tỉ lệ thích hợp sau đó
được đem so màu theo phương pháp Murphy Riley bằng máy quang phổ ở bước sóng 880nm.
Khoáng hóa lân (P): Lấy mẫu đất 90 ngày SKBP để tiến hành phân tích. Cân 10g đất và 10g cát cho vào hộp nhựa trộn đều, thêm nước cất vào để đạt 60% khả năng giữ nước của đất, trộn đều và cân lại trọng lượng hộp có cả đất lẫn nước, ủ hiếu khí và ở nhiệt độ phòng (khoảng 27 - 300C). Theo dõi và duy trì độ ẩm mỗi ngày. Cân lại mẫu và lấy 1g mẫu đất đem đi phân tích P ở các giai đoạn 3, 7, 14, 21, 28 ngày bằng phương pháp P Olsen (1954).
Các chỉ tiêu sinh học đất
Tổng mật số nấm: Môi trường PDA (Potato Dextrose) được sử dụng để nuôi cấy và xác định tổng mật số nấm trong đất (Mahamuni et al., 2012).
Tổng mật số vi khuẩn: Môi trường TSA (Tryptone Soya Agar) được sử dụng để nuôi cấy và xác định tổng mật số vi khuẩn bằng cách đếm trực tiếp số lượng khuẩn lạc mọc trên môi trường agar (Subba Rao, 1984).
Hoạt động enzyme phosphatase: Xác định hàm lượng enzyme Phosphatase bằng phương pháp so màu của Alef và Nannipieri (1995). Đo ở bước sóng 440nm. Nguyên lý xác định hàm lượng enzyme phosphatase dựa vào phản ứng:
pNPP(*) + H2O + phosphatase p-nitrophenol + H3PO4 + phosphatase
(*) p-nitrophenyl phosphatase – chất nền (pNPP 0,115M).