2. Tên đề tà
3.2.5 Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ)
Dựa vào kết quả của thí nghiệm 5 và 6 để xác định giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của kỹ thuật thêm chuẩn trên phương pháp quang phổ đối với cả 3 chất.
Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng đối với Enrofloxacin: Giới hạn phát hiện (LOD):
Với độ lệch chuẩn:
2 i x x SD 0 0054 n 1 ,
SVTH: Nguyễn Văn Khi & Lê Minh Vấn Trang:42
LOD cĩ thể xác định dựa theo cơng thức:
3,3.SD LOD =
a =3,3.0, 0054
0,1030 = 0,173 (mg/L)
Giới hạn định lượng (LOQ): xác định tương tự LOD, nhưng theo cơng thức:
10.SD LOQ =
a = 10.0, 0054
0,1030 = 0,524 (mg/L) Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng đối với Norfloxacin:
Tính tốn tượng tự như Enrofloxacin. LOD = 0,195 mg/L
LOQ = 0,589 mg/L
Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng đối với Marbofloxacin: Tính tốn tượng tự như Enrofloxacin.
LOD = 0,205 mg/L LOQ = 0,623 mg/L
3.3
Áp dụng phương pháp trên mẫu thậtThí nghiệm 7: Xác định mức độ nhiễm chéo Enrofloxacin trong bồn trộn VMDX1068
a) Thực hiện:
Bồn trộn VMDX1068 sau khi trộn mẻ thuốc VIMENRO concentrated cĩ chứa hàm lượng Enrofloxacin 50% được vệ sinh sạch.
Tráng bồn bằng 25 kg tá dược trơ lactose trong 15 phút.
Định lượng Enrofloxacin trong tá dược tráng bồn: Lấy 25,078 gam tá dược tráng bồn cho vào BĐM 200 mL thêm NaOH 0,1N đến vạch, đem siêu âm và lọc lấy dung dịch trong suốt. Chuẩn bị dung dịch chuẩn Enrofloxacin cĩ nồng độ 254,50 mg/L. Lập dãy thêm chuẩn như bảng sau:
Bảng 3-16: Dãy mẫu thêm chuẩn trên mẫu thật thí nghiệm 7
Mẫu 1 2 3 4 5
Vtá dược (mL) 25 25 25 25 25
Vchuẩn ER (mL) 0 1 2 3 4
Cchuẩn ER (mg/L) 0 5,090 10,180 15,270 20,360
SVTH: Nguyễn Văn Khi & Lê Minh Vấn Trang:43
b) Kết quả:
Bảng 3-17: Kết quả quét phổ thí nghiệm 7
Mẫu 0 1 2 3 4
Cchuẩn ER (mg/L) 0 5,09 10,18 15,27 20,36
Abs 0,061 0,594 1,125 1,637 2,123
Hình 3-16: Phổ đồ kết quả thí nghiệm 7
Hình 3-17: Đồ thị Abs = f(C) thí nghiệm 7
Hàm lượng Enrofloxacin trong 25,078 gam tá dược trơ lactose:
ER 0, 059 2 0, 2 0, 224 0,1053 m (mg).
Hàm lượng Enrofloxacin trong 1 kg tá dược là: 0, 224×1000= 8,932
25, 078 (mg/kg). y = 0,1053x + 0,059
SVTH: Nguyễn Văn Khi & Lê Minh Vấn Trang:44
c) Nhận xét:
Hàm lượng Enrofloxacin trong tá dược tráng bồn đạt yêu cầu đặt ra (< 10 mg/kg) Bồn trộn đủ điều kiện sử dụng để trộn mẻ thuốc tiếp theo.
Thí nghiệm 8: Xác định mức độ nhiễm chéo Enrofloxacin trong bồn trộn VMDX1078
a) Thực hiện:
Bồn trộn VMDX1078 sau khi trộn mẻ thuốc VIMENRO cĩ chứa hàm lượng
Enrofloxacin 10% được vệ sinh sạch.
Tráng bồn bằng 25 kg tá dược trơ lactose, trộn trong 15 phút.
Định lượng Enrofloxacin trong tá dược tráng bồn: Lấy 25,054 gam tá dược tráng bồn cho vào BĐM 200 mL thêm NaOH 0,1N đến vạch, đem siêu âm và lọc lấy dung dịch trong suốt. Chuẩn bị dung dịch chuẩn Enrofloxacin cĩ nồng độ 254,50 mg/L. Lập dãy thêm chuẩn tương tự như thí nghiệm 7.
b) Kết quả:
Bảng 3-18: Kết quả quét phổ thí nghiệm 8
Mẫu 0 1 2 3 4
Cchuẩn ER (mg/L) 0 5,09 10,18 15,27 20,36
Abs 0,025 0,556 1,085 1,607 2,119
SVTH: Nguyễn Văn Khi & Lê Minh Vấn Trang:45
Hình 3-19: Đồ thị Abs = f(C) thí nghiệm 8
Hàm lượng Enrofloxacin trong 25,054 gam tá dược trơ lactose:
ER
0, 0306
2 0, 2 0,117 0,105
m (mg).
Hàm lượng Enrofloxacin trong 1 kg tá dược là: 0, 0117 1000 4, 750
25, 054
(mg/kg).
c) Nhận xét:
Hàm lượng Enrofloxacin trong tá dược tráng bồn đạt yêu cầu đặt ra (< 10 mg/kg). Bồn trộn đủ điều kiện sử dụng để trộn mẻ thuốc tiếp theo.
Thí nghiệm 9: Xác định mức độ nhiễm chéo Norfloxacin trong bồn trộn VMDX1070
a) Thực hiện:
Bồn trộn VMDX1070 sau khi trộn mẻ thuốc NORFLOXACIN 50 cĩ chứa hàm
lượng Norfloxacin 50% được vệ sinh sạch.
Tráng bồn bằng 25 kg tá dược trơ lactose, trộn trong 15 phút.
Định lượng Norfloxacin trong tá dược tráng bồn: Lấy 25,038gam tá dược tráng bồn cho vào BĐM 200 mL thêm nước đến vạch, đem siêu âm và lọc lấy dung dịch trong suốt. Chuẩn bị dung dịch chuẩn Norfloxacin cĩ nồng độ 279,25 mg/L. Lập dãy thêm chuẩn như bảng 3-19:
SVTH: Nguyễn Văn Khi & Lê Minh Vấn Trang:46
Bảng 3-19: Dãy mẫu thêm chuẩn trên mẫu thật thí nghiệm 9
Mẫu 1 2 3 4 5
Vtá dược (mL) 25 25 25 25 25
Vchuẩn NL (mL) 0 1 2 3 4
Cchuẩn NL (mg/L) 0 5,585 11,17 16,755 22,340
Quét phổ tương tự thí nghiệm 3.
b) Kết quả:
Bảng 3-20: Kết quả quét phổ thí nghiệm 9
Mẫu 0 2 3 4 5
CNL (mg/L) 0 5,585 11,17 16,755 22,34
Abs 0,050 0,651 1,221 1,792 2,32
Hình 3-20: Phổ đồ kết quả thí nghiệm 9
SVTH: Nguyễn Văn Khi & Lê Minh Vấn Trang:47
Hàm lượng Norfloxacin 25,038 gam tá dược trơ lactose:
0, 054
2 0, 2 0, 203 0,1065
NL
m (mg).
Hàm lượng Norfloxacin trong 1 kg tá dược là: 0, 203 1000 8,108
25, 038
(mg/kg).
c) Nhận xét:
Hàm lượng Norfloxacin trong tá dược tráng bồn đạt yêu cầu đặt ra (< 10 mg/kg). Bồn trộn đủ điều kiện sử dụng để trộn mẻ thuốc tiếp theo..
Thí nghiệm 10: Xác định mức độ nhiễm chéo Marbofloxacin trong bồn trộn
VMDX1077
a) Thực hiện:
Bồn trộn VMDX1077 sau khi trộn mẻ thuốc MARBO VIRYL ONE cĩ chứa
hàm lượng Marbofloxacin 20% được vệ sinh sạch.
Tráng bồn bằng 25 kg tá dược trơ lactose, trộn trong 15 phút.
Định lượng Marbofloxacin trong tá dược tráng bồn: Lấy 25,046 gam tá dược tráng bồn cho vào BĐM 200 mL thêm nước đến vạch, đem siêu âm và lọc lấy dung dịch trong suốt. Chuẩn bị dung dịch chuẩn Marbofloxacin cĩ nồng độ 282,0 mg/L. Lập dãy thêm chuẩn như bảng sau:
Bảng 3-21: Dãy mẫu thêm chuẩn trên mẫu thật thí nghiệm 10
Mẫu 1 2 3 4 5
Vtá dược (mL) 25 25 25 25 25
Vchuẩn MB (mL) 0 1 2 3 4
Cchuẩn MB (mg/L) 0 5,640 11,280 16,920 22,560
Quét phổ tương tự thí nghiệm 3.
b) Kết quả:
Bảng 3-22: Kết quả quét phổ thí nghiệm 10
Mẫu 1 2 3 4 5
CMB (mg/L) 0 5,64 11,28 16,92 22,56
SVTH: Nguyễn Văn Khi & Lê Minh Vấn Trang:48
Hình 3-22: Phổ đồ kết quả thí nghiệm 10
Hình 3-23: Đồ thị Abs = f(C) thí nghiệm 10
Hàm lượng Marbofloxacin trong 25,046 gam tá dược trơ lactose:
0, 050
2 0, 2 0, 267 0, 0749
MB
m (mg).
Hàm lượng Marbofloxacin trong 1 kg tá dược là: 0, 267 1000 10, 660
25, 046
(mg/kg).
c) Nhận xét:
Hàm lượng Marbofloxacin trong tá dược tráng bồn khơng đạt yêu cầu đặt ra (< 10 mg/kg).
Bồn trộn khơng đủ điều kiện sử dụng để trộn mẻ thuốc tiếp theo, bồn trộn phải được vệ sinh lại.
SVTH: Nguyễn Văn Khi & Lê Minh Vấn Trang:49
