phƣơng pháp in-vitro
Khả năng tƣơng thích sinh học của gốm HA thành phẩm đƣợc đánh giá theo phƣơng pháp in-vitro với dung dịch SBF x1.
Hóa chất dùng để pha chế dung dịch SBF gồm các muối: NaCl, NaHCO3, KCl, K2HPO4.3H2O, MgCl2.6H2O, CaCl2, Na2SO4, axit HCl có độ tinh khiết PA và dung dịch NaOH 1M dùng để chỉnh pH.
Thiết bị và dụng cụ:
1 bình PE to (khoảng 7 lít), máy khuấy từ, tủ sấy, các bình PE 500 ml để ngâm mẫu, các dụng cụ cần thiết cho quá trình ngâm và phân tích.
Mô tả thực nghiệm Pha dung dịch SBF
Lấy chính xác 4,5 lít nƣớc cất vào bình PE 7 lít. Dùng máy khuấy từ gia nhiệt để khuấy và điều chỉnh nhiệt độ ở 37 ± 1o
C.
Thêm lần lƣợt các hóa chất trong bảng 2 theo thứ tự từ 1 tới 8 sau khi hóa chất trƣớc đã tan hết. Tráng các đĩa cân hóa chất bằng nƣớc cất và chuyển phần nƣớc tráng này vào bình pha dung dịch SBF, định mức tới 5 lít.
Bảng 2: Các hóa chất dùng để pha chế dung dịch SBF (pH = 7,4; 5L).
Số thứ tự Hóa chất Khối lƣợng (g) 1 NaCl 39,98 2 NaHCO3 1,75 3 KCl 1,12 4 K2HPO4.3H2O 1,14 5 MgCl2.6H2O 1,525 6 HCl (1M) 25 ml 7 CaCl2 1,39 8 Na2SO4 0,355 9 NaOH (1N) Vừa đủ
Hiệu chỉnh máy pH với các dung dịch chuẩn mới pha.
Sau khi thêm hóa chất thứ 8 nhƣ trong bảng 2, kiểm tra nhiệt độ dung dịch trong cốc và đƣa điện cực pH vào dung dịch. Đo pH của dung dịch ở nhiệt độ 37oC. Dùng dung dịch NaOH 1N chỉnh pH về 7.40.
Thử nghiệm in-vitro gốm HA trong dung dịch SBF
Lấy 4 lít dung dịch SBF chia làm 8 bình PE 500 mL. Các viên mẫu HA nén ép ở áp suất 4000 kg/cm2
đƣợc cho vào 4 bình đầu tiên kí hiệu lần lƣợt là HA I-1, HA I-2, HA I-3, HA I-4, ngâm mẫu ở nhiệt độ 370C ± 10C. Các viên mẫu HA nén ép ở áp suất 400 kg/cm2
đƣợc cho vào 4 bình tiếp theo kí hiệu lần lƣợt là HA II-1, HA II-2, HA II-3, HA II-4, ngâm mẫu ở 200
C. Sau đó, xác định hàm lƣợng Ca2+
và PO4 3-
trong dung dịch ngâm mẫu HA I ở 0, 7, 14, 21, 28 ngày, mẫu HA II ở 0, 7, 14, 21 ngày. Từ kết quả thu đƣợc, có thể đánh giá sự phát triển của tinh thể HA trong dung dịch có thành phần các ion tƣơng tự nhƣ trong huyết thanh của cơ thể nhằm xác định tính tƣơng thích sinh học của gốm thành phẩm thông qua thí nghiệm với dung dịch giả dịch thể ngƣời.
CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN