Tiến hành khảo sát sơ bộ các nguyên nhân trong bảng 3.4 cho thấy:
Lƣợng CDH hoặc lƣợng glycerin càng giảm, hiện tƣợng kết tinh xuất hiện càng nhanh do nhũ tƣơng kém bền. Do vậy, giảm lƣợng CDH hay lƣợng glycerin cũng không khắc phục đƣợc hiện tƣợng kết tinh Px.
Sử dụng loại CDH khác nhau hoặc tăng lƣợng Miglyol hoặc tăng lƣợng CDH đều có thể khắc phục đƣợc hiện tƣợng kết tinh Px. Kết quả chi tiết đƣợc trình bày dƣới đây:
Ảnh hưởng của loại chất diện hoạt tới hiện tượng kết tinh của piroxicam
Bào chế các mẫu NTN theo công thức trong bảng 3.1 (đƣa Px vào pha dầu) sử dụng 2 CDH khác nhau là natri lauryl sulfat và tween 40, tỷ lệ Miglyol: CDH là 5:7. Bảo quản tại 3 điều kiện khác nhau. Theo dõi hiện tƣợng kết tinh của Px.
Kết quả đƣợc trình bày trong bảng 3.5 cho thấy, các mẫu bào chế với Tween 40 xuất hiện kết tinh Px chậm hơn so với natri laurylsulfat. Nồng độ micel tới hạn của Tween 40 thấp hơn nhiều so với natri laurylsulfat (0,0067x10-3M và 8,67x10-
3M tƣơng ứng) [38]. Do vậy về lý thuyết nồng độ micel Tween 40 trong dung dịch sẽ cao hơn nhiều so với natri laurylsulfat, thuận lợi cho quá trình vận chuyển khối của Px từ pha dầu sang pha nƣớc và kết tinh. Tuy nhiên, các phân tử Tween 40 trên
bề mặt phân cách pha liên kết chặt chẽ hơn natri laurylsulfat (lực đẩy tĩnh điện giữa các phân tử natri laurylsulfat khiến chúng rời xa nhau hơn), lớp áo hấp phụ tạo ra bởi NaLs lỏng lẻo hơn, thuận lợi cho quá trình chuyển khối (1 phân tử Tween 40 bao phủ đƣợc 33 Å2 diện tích bề mặt phân cách pha, trong khi đó natri laurylsulfat là 64Å2) [24]. Ngoài ra, theo một số tác giả, CDH ion hóa (natri laurylsulfat) tạo ra một lớp áo đơn phân tử trên bề mặt phân cách pha, trong khi CDH không ion hóa (Tween 40) tạo ra lớp áo đa phân tử [24] do đó cản trở hơn nữa sự vận chuyển khối.
Nhƣ vậy, trong hai loại CDH đã khảo sát trên cho thấy, Tween 40 có thể khắc phục hiện tƣợng kết tinh của Px trong NTN.
Bảng 3.5 . Hình thức nhũ tƣơng bảo quản ở các điều kiện khác nhau (n=2).
Điều kiện Lạnh Thường Lão hóa cấp tốc
Thời gian (ngày) NaLs Tween 40 NaLs Tween 40 NaLs Tween 40 1 + + + + + + 3 - + + + + + 5 -- - - + + + 11 -- -- - + - + 19 -- -- -- - - -
(-) xuất hiện kết tinh Piroxicam, (--) kết tinh nhiều, lắng dưới đáy lọ. (+) không quan sát thấy kết tinh Piroxicam.
Ảnh hưởng của tổng lượng CDH tới hiện tượng kết tinh piroxicam
Bào chế các mẫu NTN theo công thức ở bảng 3.1, sử dụng CDH là Tween 40 và tăng lƣợng CDH lên (từ 7% đến 30%) (tính toán để đảm bảo HLB = 11), sử dụng bể siêu âm và máy khuấy cơ học. Bảo quản mẫu ở ba điều kiện theo mục 2.3.6.
Kết quả đƣợc trình bày trong bảng 3.6 và phụ lục 3 cho thấy sau 30 ngày lƣợng CDH tăng lên tới 15% vẫn xuất hiện kết tinhn (điều kiện phòng thí nghiệm), tăng lên tới 30% thì không xuất hiện kết tinh. Có thể do CDH tạo micell trong cả pha dầu và pha nƣớc làm tăng độ tan Px.Kết quả bảo quản ở hai điều kiện lạnh, lão hóa cấp tốc cũng tƣơng tự và đƣợc trình bày trong phụ lục 3. Nhƣ vậy, tăng lƣợng CDH hơn 15% có thể khắc phục đƣợc hiện tƣợng kết tinh của Px (15% CDH là lớn
để sử dụng cho nhãn khoa nên cần có biện pháp khác để giảm lƣợng CDH mà Px vẫn không kết tinh).
Bảng 3.6. Ảnh hƣởng của lƣợng CDH tới sự kết tinh của Px điều kiện phòng thí nghiệm (n=2)
Tổng lƣợng CDH 7% 15% 30%
Thời gian (ngày) KTTP (nm) PDI KTTP (nm) PDI KTTP (nm) PDI 4 217,1 0,276 245,3 0,267 277 0,204 8 Kết tinh 248,6 0,266 288,3 0,199 12 258,2 0,279 281,2 0,197 16 255,9 0,320 290,5 0,200 20 415,5 0,412 293,5 0,206 30 Kết tinh 299,3 0,203
Ảnh hưởng của lượng Miglyol tới hiện tượng kết tinh piroxicam
Bào chế theo công thức ở bảng 3.1, thay Tween 80 bằng Tween 40 và thay đổi lƣợng Miglyol từ 5 đến 30%, phối hợp bằng bể siêu âm và khuấy cơ học. Theo dõi KTTP, PDI và hiện tƣợng kết tinh ở 3 điều kiện bào quản (trình bày mục 2.3.6). Kết quả đƣợc trình bày trong bảng 3.7 và phụ lục 4.
Bảng 3.7. Ảnh hƣởng của lƣợng Miglyol tới sự kết tinh của Px điều kiện phòng thí nghiệm (n=2)
5% 10% 20% 30% Ngày KTTP (nm) PDI KTTP (nm) PDI KTTP (nm) PDI 4 Kết tinh 217,1 0,276 235,2 0,247 298,2 0,217 8 Kết tinh 243,1 0,258 298,1 0,221 12 248,5 0,267 301,2 0,230 16 252,9 0,296 299,5 0,219 20 329,1 0,324 298 0,228 30 Kết tinh 301 0,223
Kết quả trình bày ở bảng 3.7 và phụ lục 4 cho thấy, lƣợng Miglyol càng tăng, thời gian bắt đầu xuất hiện kết tinh càng tăng (10% là 8 ngày, 20% là 30 ngày, 30% sau 1 tháng chƣa xuất hiện kết tinh ở điều kiện phòng thí nghiệm). Kết quả này phù hợp với kết quả nghiên cứu của của Yan Li và cộng sự [53]. Tuy nhiên, nếu chỉ tăng
lƣợng dầu để ngăn cản Px kết tinh thì cần 1 lƣợng dầu khá lớn (trên 20%). Nên cần một biện pháp khác phù hợp hơn.
3.3.1. Ảnh hƣởng của lƣợng Miglyol và lƣợng chất diện hoạt tới sự kết tinh piroxicam
Từ kết quả của mục 3.3.4 và 3.3.5, để ngăn chặn hiện tƣợng kết tinh của Px đồng thời giảm lƣợng CDH và Miglyol cần sử dụng, chúng tôi tiến hành tăng đồng thời lƣợng Miglyol và lƣợng CDH sử dụng.
Bào chế nhũ tƣơng Px theo công thức trong bảng 3.1 sử dụng Tween 40, tỷ lệ Miglyol:CDH là 5:7, tăng lƣợng Miglyol từ 6-9% dùng máy siêu âm bể kết hợp khuấy từ. Mẫu đƣợc bảo quản ở các điều kiện trình bày trong mục 2.3.6.
Kết quả đƣợc trình bày trong bảng 3.8 và phụ lục 5.
Bảng 3.8. Ảnh hƣởng của lƣợng Miglyol và lƣợng CDH tới KTTP, PDI của giọt nhũ tƣơng, và hiện tƣợng kết tinh của piroxicam (n=2) Tỷ lệ Miglyol (%)/CDH (%) Ngày 6:8,4 7:9,8 8:11,2 9:12,6 KTTP (nm) PDI KTTP (nm) PDI KTTP (nm) PDI KTTP (nm) PDI 0 224 0.233 233 0,190 224 0,197 245 0,218 4 Kết tinh 243 0,223 227 0,232 267 0,219 7 234 0,281 218 0,213 241 0,228 10 320 0,312 245 0,186 238 0,237 15 Kết tinh 232 0,219 254 0,245 20 226 0,223 257 0,213 30 224 0,228 253 0,221
Kết quả trong bảng 3.8 và phụ lục 5 cho thấy, mẫu với tỷ lệ Miglyol:CDH 6:8,4 kết tinh ngay sau khi bào chế. Mẫu với tỷ lệ 7:9,8 xuất hiện kết tinh sau 10 ngày bảo quản với KTTP tăng cao (từ 233 lên 320 nm), có thể do sự xuất hiện của các tinh thể Px kích cỡ micromet. Mẫu 8:11,2 và 9:12,6 không xuất hiện kết tinh Px sau 30 ngày bảo quản trong điều kiện lạnh (KTTP dao động trong khoảng nhỏ 218-245 nm và 238-267nm tƣơng ứng).
Các khảo sát trên, có thể nhận thấy, để ngăn chặn hiện tƣợng kết tinh Px, đồng thời sử dụng lƣợng CDH và lƣợng Miglyol ít nhất, công thức chứa 8% Miglyol 810 và 11,2 % tổng lƣợng CDH, Tween 40 là phù hợp hơn cả. Bào chế NTN với các thành phần này, sau 30 ngày bảo quản ở điều kiện phòng thí nghiệm, quan sát đáy lọ bằng mắt và trên kính hiển vi trƣờng sáng, kết quả thể hiện trên hình 3.10.
Hình 3.10. Hình ảnh NTN Px có công thức nhƣ bảng 3.1 (thay 8% Miglyol 810 và tổng lƣợng CDH là 11,2%)
a: Ảnh chụp với kính hiển vi trường sáng. b: Ảnh chụp với máy ảnh thường
Kết quả trong hình 3.10 a cho thấy, khi sử dụng công thức bảng 3.1 với 8% Miglyol và tổng lƣợng CDH 11,2%, thay Tween 80 bằng Tween 40 trên vi trƣờng không phát hiện thấy tinh thể Px. Hình 3.10 b cho thấy không có Px kết tinh màu vàng dƣới đáy lọ.