1.2.5.1. Giới thiệu sơ lược về 17 – α Metyltestosterone
- Bản chất: Steroid, cơng thức phân tử: CR20RHR30ROR2 R, khối lượng phân tử là 302 đvC (đơn vị cacbon) [31].
Hình 1.5. Cơng thức cấu tạo của Methyltestosterone
- Danh pháp: 4T17α-Methyl-4-androsten-17β-ol-3-one, 17β-Hydroxy-17α- methyl-4-androsten-3-one, Mesterone, Methyltestosterone
- Cơng dụng:
17 – α Metyltestosterone (Methyltestosterone) là một androgen mạnh, được dùng khá phổ biến trong thủy sản để điều khiển giới tính cá ở nhiều lồi như cá Xiêm (Betta splendens), cá Hồi vân (Oncorhynchus nykiss), cá Bảy màu (Poecilia reticulata)và đặc biệt là cá Rơ phi vằn (Oreochromis niloticus). Đối với những lồi cá đẻ con họ cá Ăn muỗi Poeciliidae cần dùng MT với liều cao [2].
So với các hormon là peptid hay prơtêin khác thì MT cĩ những ưu thế: rất bền với nhiệt, khơng hề bị mất hoạt tính ở 100 P
0 P
C do đĩ rất thuận lợi trong bảo quản, thao tác dễ dàng và rẻ hơn các loại androgen khác. MT là chất bột kết tinh màu trắng hay cĩ ánh kim, khơng mùi, khơng tan trong nước, tan trong cồn, ether, aceton, ít tan trong dầu thực vật. MT được chứa trong lọ nút kín, màu nâu tránh ánh sáng, khi sử dụng nên chia lượng MT theo từng khối lượng cần dùng một lần rồi cho vào các túi polyethylen màu đen để sử dụng cho các thí nghiệm và trong sản xuất, tránh thao tác nhiều lần ảnh hưởng đến hoạt tính của MT. Nhiều nghiên cứu cho thấy MT cĩ hiệu quả đực hĩa trong nhiều thí nghiệm chuyển đổi giới tính ở cá và đã được ứng dụng rộng rãi trong thực tiễn sản xuất (cá Rơ phi (Oreochromis niloticus)) [23]. Nhưng một vấn đề đặt ra đĩ là người ta nghi ngờ lượng MT tồn tại trong thịt cá sau khi xử lý và cĩ ảnh hưởng đến sức khỏe con người. Để làm sáng tỏ vấn đề này, Baroiller & Jalabert (1990) đã làm thí nghiệm và đưa ra kết luận là MT hầu như khơng tích lũy trong xương cá, hai ngày sau khi ngưng cho ăn hầu như khơng cĩ MT trong thân cá và sau 3 tuần thì khơng phát hiện MT trong cơ thể được xử lý nữa. Kết quả này được khẳng định một lần nữa với cơng trình sau đĩ của Goudie et al., (1996) đã thí nghiệm đo lượng MT bằng phĩng xạ trên cá Rơ phi xanh sau khi được xử lý MT là 99% hormon, nhưng 24 giờ sau khi ngưng cho ăn thức ăn cĩ trộn MT thì lượng MT đã giảm 90%, sau 2 ngày ngưng cho ăn MT thì hầu như khơng cịn MT và sau 3 tuần thì khơng phát hiện hoạt chất này nữa ( trích bởi Nguyễn Tường Anh, 2005) [2].
1.2.5.2. Giới thiệu sơ lược về MT Hà Lan và MT Trung Quốc
- MT Hà Lan: Hãng sản xuất: Fluka; Nước sản xuất: Hà Lan; Thành phần chứa hormon sinh dục 17 – α Metyltestosterone.
Hình 1.6. Sản phẩm MT Hà Lan
- MT Trung Quốc: Hãng sản xuất: Ninh Ba; Nước sản xuất: Trung Quốc; Thành phần chứa hormon sinh dục 17 – α Metyltestosterone.
1.2.5.3. Giới thiệu sơ lược về Spironolactone và lý do thí nghiệm với Spironolactone
- Spironolactone là hoạt chất cĩ trong thành phần của một loại thuốc mang tên Verospiron hiện cĩ bán rộng rãi trên thị trường, cơng dụng của thuốc là giúp bệnh nhân lợi tiểu và hạ huyết áp. Hãng sản xuất: Gedeon Richter; Nước sản xuất: Hungary.
- Spironolactone bản chất là steroid, cơng thức phân tử là CR 24RHR
32ROR
4RS, khối lượng phân tử là 416 đvC (đơn vị Cacbon) [32].
Hình 1.8. Cơng thức cấu tạo của Spironolactone
- Danh pháp:
Pregnen-21-oic acid- 17α-ol-3-one-7α-thiol γ-lactone 7 –acetate
α-(Acetylthio)- 17α- hydroxy-3-oxopregnen-4-ene-21-carboxylic acid γ – lactone
Hình 1.9. Hộp thuốc Verospiron cĩ chứa hoạt chất Spironolactone
- Cơng dụng [33]
Hoạt chất Spironolactone là chất đối kháng mineralocorticoid, tác động qua việc cạnh tranh thụ thể với andosterone và các mineralocorticoid khác, tác dụng chủ yếu ở ống lượn xa của thận, kết quả làm tăng bài tiết natri và nước.
Spironolactone làm giảm bài tiết các ion Kali (KP + P ), amon (NHR 4RP + P ) và HP + P , cả tác dụng lợi tiểu và chống tăng huyết áp. Chất chuyển hĩa chính của Spironolactone là 17 – α Thiomethylspironolactone và Canrenone.
Spironolactone được hấp thu qua đường tiêu hĩa, đạt nồng độ tối đa trong máu sau khi uống 1 giờ, nhưng vẫn cịn với nồng độ cĩ thể đo được ít nhất 8 giờ sau khi uống 1 liều. Sinh khả dụng tương đối là trên 90% so với sinh khả dụng của dung dịch Spironolactone trong Polyethylen Glycol.
Thơng thường điều trị lợi tiểu và hạ huyết áp dùng ở liều thấp hơn 100mg, nếu dùng ở liều cao hơn và liên tục dễ dẫn đến tình trạng tăng Kali huyết như suy giảm chức năng thận, tăng prolactin, thay đổi ngoại hình (to vú ở đàn ơng), rối loạn kinh nguyệt (ở nữ)…
Trong một cuộc nghiên cứu của Hunsinger và Howell, 1991. Khi ngâm cá Ăn muỗi (Gambusia affinis) cái (6 cá trong 1 bể chứa 10 lít nước) cĩ pha Spironolactone ở các liều 0,1mg/l, 1mg/l, 2,5mg/l. Sau 21 ngày ngâm, cả 3 liều đều cho kết quả đực và cả 3 liều đều ảnh hưởng như nhau (hiện tượng đực hĩa nghịch lý) [21].
Hiệp hội Y học Hoa Kỳ, 1991 (American Medical Association) dùng Spironolactone điều trị mãn tính sẽ gây ra các hiện tượng như nữ hĩa đàn ơng, bất lực, giảm vẻ nam tính, vú to. Ở nữ gây rối loạn kinh nguyệt, căng vú và ung thư vú. Trên cơ sở các nghiên cứu về Spironolactone của Hunsinger và Howell, 1991 và cá Bảy màu Poecilia reticulata là loại cá cùng họ cá Ăn muỗi với cá
Gambusia affinis, nên cĩ thể xem Spironolactone cĩ tác dụng như một androgen ở cá và sử dụng để tiến hành thử nghiệm đực hĩa cá Bảy màu. Hiện nay, trên thế giới đã cĩ nhiều cơng trình nghiên cứu thử nghiệm trên, nhưng trong nước vẫn chưa cĩ nghiên cứu nào trên đối tượng cá Bảy màu được cơng bố. Một cơng trình nghiên cứu gần đây về việc dùng Spironolactone gây đực hĩa cá Rơ phi đạt 60 – 64,45% tỷ lệ đực (Vũ Thành Nhân và Nguyễn Tường Anh, 2012), chúng tơi quyết định sử dụng Spironolactone cĩ trong thuốc Verospiron để làm thí nghiệm cho đề tài này nhưng với nồng độ cao hơn cho đối tượng nghiên cứu là cá Bảy màu Poecilia reticulata.