- Pha dung dịch H2SO4 72%: Lấy 150 acid H2SO4 98%, cho từ từ vào cốc đã có 100ml nước, vừa cho vừa khuấy đều, ta được dung dịch H2SO4 72%.
- Pha dung dịch thuốc thử: Cân 0,5g acid cromotropic cho vào cốc 200ml đựng sẵn 100ml dung dịch H2SO4 72% khuấy mạnh cho acid cromotropic tan hết. Lọc qua phễu có bông thuỷ tinh, ta được thuốc thử có màu vàng rơm nhạt.
- Xác định nồng độ formol ban đầu: Lấy 2ml dung dịch formol 30-40% cho vào bình định mức 100ml, thêm nước cất đến vạch và lắc đều (dung dịch A).
- Lấy một bình nón khác cho vào đó:
Dung dịch formol đã pha loãng trên (dung dịch A): lml
Nước cất: 5ml
Dung dịch Iod 0,1N: 10 ml
Nhỏ từ từ từng giọt dung dịch natri hydroxyd 10% đến khi có màu vàng nhạt. Đậy nút, để chỗ tối 10 phút. Sau đó cho thêm lml acid hydrocloric đậm đặc, cho thêm hồ tinh bột, chuẩn độ bằng Vml dung dịch natri thiosulfat 0,1N đến khi dung dịch mất màu xanh.
Vì 1ml Iod 0,1N tương đương 1,5 mg formol nên lượng formol trong 1 ml dung dịch A là: X = 1,5 (10 - V) mg. Do vậy, hàm lượng formol trong dung dịch A là X mg/ml (1000 X ppm).
Pha dung dịch formol nồng độ 10 ppm: Lấy 1 ml dung dịch A pha loãng với nước cất cho đủ 100 ml được dung dịch formol có nồng độ 10 X ppm (dung dịch B). Để có dung dịch formole 10 ppm, lấy dung dịch B pha loãng X lần.
dung dịch 75 ml formol có nồng độ 10 ppm.
2.4.5. Cách tiến hành
Chuẩn bi mẫu thử: Cân 100g mẫu cho vào cối sứ, thêm từ từ khoảng 50 ml nước cất và nghiền cho nhuyễn đều. Chuyển hỗn hợp vào bình kjeldahl có dung tích 500 ml. Tráng cối sứ, dụng cụ nghiền bằng 50 ml nước cất, cho dung dịch nước tráng này vào bình kjeldahl. Acid hoá bằng acid phosphoric 85% đến môi trường acid (thử bàng giấy quỳ, thấy chuyển sang màu đỏ), sau đó cho thêm 1 ml acid phosphoric và 0,5 ml silicon chống tạo bọt (do trong quá trình cất mẫu thử có hiện tượng hồ hoá, tạo bọt). Lắp hệ thống cất, cất lấy 50 ml dịch cất (dung dịch thử) trong khoảng 20-30 phút.
Với mẫu thực phẩm thể lỏng: Đong 200 ml thực phẩm, cho vào bình kjedahl, acid hoá hỗn hợp bằng H3PO4 đặc. Tiến hành như khi chuẩn bị mẫu thử ở thể rắn và bán rắn ở trên để có được 50 ml dịch cất.
Đinh tính formol trong mẫu thử (dich cất): Lấy 5 ml dung dịch thuốc thử cromotropic cho vào một ống nghiệm sạch. Thêm 1 ml dịch mẫu cất từ thực phẩm. Lắc đều ống nghiệm. Đặt ống nghiệm lên nồi cách thuỷ đang sôi trong 15 phút. Nếu có màu tím xuất hiện thì mẫu có formol. Nếu nồng độ formol trong mẫu càng cao thì màu càng tím. Giới hạn phát hiện của phương pháp là 0,05 ppm khi làm phản ứng lên màu.
Phương pháp bán đinh lương formol trong mẫu thử (dịch cất)
Tiến hành phản ứng lên màu: Pha dãy màu chuẩn và song song tiến hành cùng
với mẫu thử nghiệm theo bảng 2.2
Bảng 2.2. Lấy 5 ống nghiệm đánh số thứ tự có thành phần nhƣ bảng sau
Số ống 1 2 3 4 5
Dung dịch thuốc thử (ml) 5 5 5 5 5
Dung dịch formol 10 ppm 0 1 2 5 0
Dung dịch cất từ thực phẩm (ml) 0 0 0 0 5
Tổng thể tích mỗi ống (ml) 10 10 10 10 10
Nồng độ formol trong ống (ppm) 0 1 2 5 Y
Lắc đều các ống, đem đun cách thuỷ sôi trong 15 phút, ta có được thang màu chuẩn và mẫu thử trong cùng điều kiện để so sánh màu:
Tiến hành so màu: So sánh màu của ống số 5 (mẫu thử) với các ống trong dãy màu chuẩn (số 1 - 4). Màu của ổng mẫu thử tương đương màu ống chuẩn nào thì nồng độ formol trong ống thử (Y ppm) bằng nồng độ formol trong ống chuẩn đó.
2.4.6. Tính kết qủa phân tích
- Nồng độ formol trong dịch cất từ thực phẩm = 2Y ( vì trong ống 5, dịch cất đã bị pha loãng gấp đôi, từ 5 thành 10 ml)
- Nồng độ formol trong thực phẩm rắn và bán rắn: Cppm = Y (vì 100g mẫu rắn ứng với 50 ml dịch cất). - Nồng độ formol trong thực phẩm lỏng:
Cppm = ½Y (vì 200 ml mẫu lỏng ứng với 50 ml dịch cất). (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Nếu nồng độ formol quá đặc thì phải pha loãng dịch cất từ thực phẩm để so sánh với dãy màu chuẩn.
- Lưu ý:
+ Phạm vi áp dụng: Không giới hạn các loại thực phẩm
+ Thận trọng khi thao tác với acid đậm đặc nhằm đảm bảo an toàn.
2.5. Phƣơng pháp định lƣợng formol [8] 2.5.1. Phạm vi áp dụng
Phương pháp này xác định dư lượng formol trong bún, phở, hủ tiếu và các thực
2.5.2. Tài liệu áp dụng
Định lượng formol trong bún, phở, hủ tiếu theo tiêu chuẩn ISO 14181-1
2.5.3. Nguyên tắc
Mẫu thực phẩm được acid hóa bằng acid H3PO4 85% rồi đem chưng cất. HCHO được giải phóng dưới dạng hòa tan trong dịch cất và được xác định bằng phản ứng lên màu với thuốc thử Acetylaceton (CH3COCH2COCH3)
O O O O O 2CH3 C H CH3 C C CH3 H+ CH3 C CH2 C CH2 + H C CH CH2 CH C C CH3 CH 3 C O CH 3 C C CH 3 C C O O O CH3 O CH3 Acetylaceton Phức màu vàng, = 410,6nm 2.5.4.Hoá chất (Merck)
- Acetylaceton (CH3COCH2COCH3) - Acid phosphoric H3PO4 85% - Acid acetic (CH3COOH)
- Dung dịch formol (HCHO) 30-40% - Chỉ thị phenolphtalein 0.5%
- Dung dịch Etanol (C2H5OH) 90° - Dung dịch chuẩn NaOH 0.1N - Dung dịch chuẩn H2C2O4 0.1N
- Dung dịch H2O2 3% trung tính : Lấy 10ml dung dịch H2O2 30% cho vào bình tam giác 100ml, thêm 2 giọt chỉ thị phenolphtalein. Chuẩn độ này bằng dung dịch NaOH 0.1N đến khi xuất hiện màu hồng, chuyển dung dịch này vào bình định mức 100ml, thêm nước cất đến vạch .