tăng trƣởng chồi in vitro:
BA là chất điều hịa sinh trưởng thực vật thuộc nhĩm cytokinin thường được sử dụng để kích thích sự tạo chồi trong các thí nghiệm nhân giống in vitro. BA đĩng vai trị quan trọng trong sự phân chia mơ và tạo rễ [28, 29]. BA cĩ tác dụng cảm ứng sự tạo mới mơ phân sinh ngọn và phá vỡ trạng thái hưu miên của chồi giúp cho chồi tăng trưởng (Nguyễn Đức Lượng và cộng sự, 2006) [6].
Tác động kết hợp giữa BA và auxin sẽ làm tăng số lượng chồi (Uppadhaya và Chandra, 1983). Qua nhiều thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của BA riêng lẻ cũng như sự kết hợp giữa BA với auxin là IBA hay NAA, BA kết hợp với Kn chúng tơi nhận thấy BA nồng độ 0.3 mg/l thích hợp cho sự cảm ứng tăng trưởng chồi thể hiện qua chiều cao chồi và số đốt/chồi. Tỷ lệ này cĩ vai trị quan trọng trong việc xác định hiệu quả của cơng tác vi nhân giống do ảnh hưởng đến hệ số nhân giống. Vai trị của BA trong thí nghiệm này cĩ lẽ là giúp cho chồi bên thốt khỏi trạng thái hưu miên – trạng thái gây ra bởi hiện tượng ưu tính ngọn. Nồng độ BA thường sử dụng trong vi nhân giống cúc bằng phương pháp nuơi cấy đốt thân thường thấp: BA 0.1 mg/l (Roest and Bokelmann, 1975), BA 0.2 mg/l (Wambugu and Rangan, 1981), BA 0.05-0.5 (Peruceo, 1984), BA 1.0 mg/l (de Jong và cộng sự, 1994) [15,35, 39].
Tỷ lệ auxin/cytokinin cao thích hợp cho sự hình thành rễ, tỷ lệ này thấp sẽ kích thích quá trình phát sinh chồi. Tuy nhiên, sự bổ sung kết hợp BA 0.3 mg/l và NAA 0.2 mg/l khơng cĩ hiệu quả cao trong mục đích cảm ứng cao trong sự hình thành và tăng trưởng chồi từ nách lá. Nồng độ thích hợp để bổ sung vào mơi trường MS là BA 0.05 – 0.5 mg/l và NAA 0.01 – 0.5 mg/l (Peruceo, 1984). Sự kết hợp giữa BA và NAA nồng độ thấp chỉ thích hợp cho nuơi cấy mơ phân sinh (Ahmed and Andrea, 1987; Otsuka, 1985), lá hoặc mơ phân sinh (Yepes và cộng sự, 1995, 1999) hay rễ, trụ hạ diệp (Oka và cộng sự, 1996, 1999) [10, 32, 42, 43].
Sự bổ sung BA và IBA vào mơi trường nuơi cấy nhằm tạo được hiệu quả tích cực cho sự hình thành và tăng trưởng chồi in vitro, sự cảm ứng tăng chiều
cao tốt khi nồng độ BA cao và IBA thấp theo nghiên cứu của Ohishi và Sakurai (1988) nồng độ BA 0.5 mg/l và IBA 0.02 – 2 mg/l. Sự kết hợp giữa BA và IBA
50
nồng độ thấp chỉ thích hợp cho nuơi cấy từ lá, mơ phân sinh (Rout và cộng sự, 1997), BA và IBA nồng độ cao thích hợp cho nuơi cấy từ lá (Lee và cộng sự, 1997). Tuy nhiên thực nghiệm cho thấy nồng độ BA 0.3 mg/l là tốt nhất khi kết hợp với IBA 0.02 mg/l [26, 31].
Bổ sung Kn nồng độ thấp hơn 1.0 mg/l thích hợp cho việc tạo sẹo từ mẫu cấy (G.R.Rout, 1996). Tuy nhiên kết quả thực nghiệm cho thấy sự bổ sung Kn với nồng độ 0.1 mg/l và BA 0.3 mg/l vào mơi trường nuơi cấy khơng cĩ hiệu quả cao cho sự hình thành và tăng trưởng chồi, ngồi ra ở chồi hình thành cịn cĩ hiện tượng lão hĩa, thân cứng và từ xanh chuyển sang màu nâu đỏ sau từ 1 đến 2 tuần nuơi cấy [18].