bên in vitro:
Bảng 4.1: Ảnh hưởng của BA lên sự tạo chồi in vitro cây Chrysanthemum sp.
Chỉ tiêu BA (mg/l)
0.3 0.5 1.0 1.5
Tỷ lệ chồi phát sinh
100% 100% 100% 100%
Chiều cao chồi (cm)
4.4 ± 0.07 3.8 ± 0.13 3.5 ± 0.35 3.2 ± 0.13 Số đốt/1 chồi 4.0 ± 1.0 4.0 ± 1.0 3.5 ± 1.0 3.0 ± 1.0
Trên các mơi trường bổ sung BA nồng độ thay đổi, sự tạo chồi trên mẫu cấy cĩ thể quan sát được sau 4 ngày (đối với chồi ngọn ở mơi trường cĩ bổ sung BA các nồng độ 0.3, 0.5 mg/l), 5 ngày (đối với chồi ngọn ở mơi trường cĩ bổ sung BA các nồng độ 1.0, 1.5 mg/l) đến 6 ngày (đối với đốt thân). Tỷ lệ mẫu cấy tạo chồi là 100%.
32
Mơi trường bổ sung BA 0.3mg/l cĩ hiệu quả cao nhất so với các mơi trường cịn lại về chiều cao chồi, số đốt thân trên 1 chồi. Nồng độ BA càng tăng thì số lượng đốt/chồi và chiều cao chồi càng giảm (Bảng 4.1).
Ảnh 4.2: Cây in vi tro sau 3 tuần nuơi cấy trên mơi trường cĩ bổ sung BA a) Mơi trường bổ sung BA 0.3 mg/l
b) Mơi trường bổ sung BA 0.5 mg/l c) Mơi trường bổ sung BA 1.0 mg/l d) Mơi trường bổ sung BA 1.5 mg/l
a) b)
33
Chồi cĩ nhiều rễ, rễ dài, rễ xuất hiện từ ngày thứ 5 của quá trình nuơi cấy. Mỗi cây cĩ từ 6-9 lá, thân xanh chắc, khỏe, thân mọc thẳng, mỗi thân cĩ từ 3-6 đốt, khoảng cách trung bình giữa các đốt 1.23 ± 0.09 cm (hình 4.1). Chiều cao chồi trung bình cao nhất ở mơi trường bổ sung BA 0.3 mg/l vào khoảng 4.4 ± 0.07 cm, thấp nhất ở nồng độ BA 1.5 mg/l (bảng 4.1).
4.1.2 Khảo sát ảnh hƣởng của BA và IBA lên sự hình thành và tăng trƣởng chồi bên in vitro: trƣởng chồi bên in vitro:
Bảng 4.2: Ảnh hưởng của BA và IBA lên sự tạo chồi in vitro cây hoa cúc
Chrysanthemum sp.
Chỉ tiêu Mơi trường MS cĩ bổ sung BA và IBA
(1) (2) (3) (4)
Tỷ lệ chồi phát sinh
100% 100% 100% 100%
Chiều cao chồi (cm)
3.8 ± 0.14 3.1 ± 0.16 3.6 ± 0.16 2.3 ± 0.12 Số đốt/1 chồi 4.0 ± 1.0 3.5 ± 1.0 3.5 ± 1.0 3.0 ± 1.0
Tỷ lệ chồi phát sinh trên tất cả mơi trường là 100%, sự tạo chồi cĩ thể quan sát được sau 4 ngày (đối với chồi ngọn) đến 6 ngày (đối với đốt thân) kể từ ngày cấy mẫu vào mơi trường.
Mơi trường (1) cĩ hiệu quả cao hơn so với các mơi trường cịn lại về sự phát triển chiều cao chối và sốt đốt/chồi. Mơi trường (4) khơng thích hợp cho sự tăng trưởng của chồi (bảng 4.2).
Chồi phát triển cĩ từ 6 – 9 lá, nhiều rễ, rễ mọc dài, thân to nhưng xốp và dễ gãy, thân mọc thẳng cĩ từ 3 – 5 đốt, khoảng cách giữa các đốt từ 0.7 – 1.4 cm, riêng ở mơi trường (4) khoảng cách giữa các đốt rất ngắn, cĩ đốt chỉ cách nhau 0.2 cm (hình 4.5)
34
Ảnh 4.3: Cây in vitro sau 3 tuần cấy trên các mơi trường
a) Mơi trường bổ sung IBA 0.2 mg/l và BA 0.3 mg/l. b) Mơi trường bổ sung IBA 0.2 mg/l và BA 0.5 mg/l. c) Mơi trường bổ sung IBA 0.2 mg/l và BA 1.0 mg/l. d) Mơi trường bổ sung IBA 0.2 mg/l và BA 1.5 mg/l.
a ) b ) d ) c)
35