10.1. Xác định lượng lipide tự do bằng phương pháp soxhlet
10.1.1. Nguyên tắc
Dùng dung môi hữu cơ nóng hòa tan tấc cả chất béo tự do có sẵn trong sữa bột, sau đó đuổi dung môi hữu cơ, sấy khô và cân chất béo thu được và tính ra hàm lượng chất béo có trong sữa bột.
Để xác định hàm lượng lipide tự do bằng phương pháp soxhlet, người ta thường dùng 2 phương pháp:
Phương pháp trực tiếp: chiết chất béo ra khỏi mẫu sữa, cân lượng chất béo thu được, tính hàm lượng chất béo trong sữa bột.
Phương pháp gián tiếp: Chiết chất béo ra khỏi mẫu thử, cân lượng mẫu thử còn lại. 10.1.2. Cách tiến hành
Mẫu sữa bột đã được sấy khô ở 1200C – 1050C trong 2 giờ, chuyển vào bình hút ẩm để sử dụng. Giấy lọc cũng được sấy khô trong cùng điều kiện và bình cầu cũng vậy, để trong bình hút ẩm 30 phút, sau đó cân để xác định trọng lượng của giấy (mgiấy), khối lượng của bình cầu (mbình).
Cân 5,05 g mẫu sữa (mm) vào ống giấy (đã được sấy khô và biết trước khối lượng), cho vào ống xiphong, sau đó đổ ngập đầy ống xiphong bằng dietyleter, chú ý cần cho ete dư để trừ hao phần ete bay hơi chưa kịp ngưng tụ.
Lắp ráp hệ thống và tiến hành chiết ở t0 = 40 – 50 0C.
Sau khoảng 6 lần chiết, thử hết chất béo bằng một giọt eter ở đầu ống xiphong (còn nếu vết eter loang, hết nếu vết eter biến mất)
Tháo bình cầu, thu hồi eter, đồng thời cho lấy mẫu ra và sấy ở 700C trong 30 phút. Để bình hút ẩm 30 phút sau đó đem cân để biết m1.
Sấy bình cầu ở 1050C trong vòng 1 giờ, để bình hút ẩm 30 phút sau đó đem cân để biết m2.
10.1.3. Tính kết quả
Hàm lượng chất béo tính bằng % (X) theo công thức sau:
X(%) = = = 8.7
Phương pháp trực tiếp:
X(%) = = = 18.21 10.1.4. Nhận xét:
Hàm lượng béo được ghi trên bao bì sữa bột nguyên kem Nuti là 22.6 (g/100g) Hai kết quả tính từ hai phương pháp trực tiếp và gián tiếp cho ta kết quả chênh lệch nhau rất lớn. Ta cũng dễ dàng thấy được với phương pháp trực tiếp cho kết quả gần với kết quả trên bao bì hơn với 18.21%. Nên cần xem xét lại quá trình thí nghiệm và kết quả của phương phám gián tiếp.
Hàm lượng béo trong sữa bột Nuti là 18.21%.
10.2. Xác định lipit tự do bằng phương pháp Adam Rose.
10.2.1. Nguyên tắc
Dùng dung môi hữu cơ hòa tan lipide tự do có trong mẫu sữa tươi Vinamilk, dùng phiễu chiết tách lớp dung môi chứa lipide, đuổi dung môi, từ đó xác định hàm lượng lipide có trong mẫu.
10.2.2. Cách tiến hành
Lấy 5ml sữa tươi vào phiễu quả lê + dietyl eter + 10ml cồn – ammoniac để cắt mạch liên kết của lipide và hút nước + 1giọt PP 1%.
Lắc phiễu chiết (lắc vòng, lắc đều nhẹ, sau mạnh dần) trong 3 - 4 phút, để yên trong 30 phút, tách bỏ lớp dưới, giữ lại lớp trên (lớp eter + béo).
Thêm tiếp 10ml eter dầu hỏa, lắc mạnh 2 phút, để yên 15 phút, tách bỏ lớp dưới, xả bỏ phần eter + béo vào becher 250ml đã sấy khô ở 105 0C và biết trước khối lượng m0, rửa phiễu chiết 2 lần, mỗi lần bằng 5ml dietyl eter.
Cho bay hơi eter ở tren bếp cách thủy trong tủ hút.
Đưa becher chứa béo vào sấy ở 1050C trong 30 phút, để bình hút ẩm 30 phút, rồi cân để xác định m1.
10.2.3. Tính kết quả
10.2.4. Nhận xét
Hàm lượng chất béo được ghi trên bao bì sữa tươi tiệt trùng có đường Vinamilk là 3.2 (g/100ml).
Hàm lượng chất béo trong sữa tươi tiệt trùng Vinamilk xác định được từ thí nghiệm này là 6%.
Có sự chênh lệch giữa 2 số liệu. Vậy, trong quá trình làm thí nghiệm đã có sự sai sót.