II. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.3.3. Pha loãng, bảo tồn tinh dịch
2.3.3.1. Pha loãng và môi trường pha loãng tinh dịch
Pha loãng, bảo tồn nhằm mục ựắch tăng thể tắch tinh dịch, kéo dài thời gian sống của tinh trùng ngoài cơ thể. Do ựó, góp phần nâng cao sức sản xuất của ựực giống, nhất là ựối với những ựực giống tốt và rộng bán kắnh gieo tinh.
Các nguyên tắc của môi trường pha chế, bảo tồn tinh dịch: môi trường pha loãng, bảo tồn tinh dịch phải thỏa mãn sáu nguyên tắc cơ bản dưới ựây:
a/ Áp lực thẩm thấu (Posm): Áp lực thẩm thấu của môi trường phải tương ựương áp lực thẩm thấu của tinh dịch. Áp lực thẩm thấu là áp suất cần thiết trong dung dịch tác ựộng lên màng tế bào làm ngừng hiện tượng thẩm thấu. Áp lực thẩm thấu ựược tắnh như sau:
P = R.T.C Trong ựó:
R: là hằng số khắ = 0,082 lắt atm/mol ựộ. T: nhiệt ựộ tuyệt ựối = toC + 273
đây là nguyên tắc cao nhất, vì chỉ trong ựiều kiện cân bằng về áp lực thẩm thấu tinh trùng mới giữa nguyên ựược hình thái và quá trình trao ựổi chất.
b/ độ pH: Môi trường phải có ựộ pH tương ựương ựộ pH của tinh dịch hoặc hơi toan một chút. Nhiều kết quả nghiên cứu cho thấy, ựộ pH của môi trường từ 6,4-6,7 là tốt nhất. Ở ựộ pH này, tinh trùng trao ựổi chất ở cường ựộ thấp, nên thời gian sống của tinh trùng lâu hơn.
c/ Năng lực ựệm của môi trường (β): Bảo tồn tinh dịch là giữ cho tinh trùng sống. Sự sống luôn ựược gắn liền với quá trình trao ựổi chất mà bản chất quá trình trao ựổi chất của tinh trùng trong thời gian bảo tồn là quá trình ựường phân yếm khắ. Quá trình này luôn thải ra môi trường axit lactic, làm cho nồng ựộ H+ trong môi trường luôn có xu hướng tăng lên. Sự tăng lên của các con H+ có nguy cơ gây ựầu ựộc tinh trùng. Trên thực tế, hệ ựệm tự nhiên trong tinh dịch không ựủ khả năng giữ ổn ựịnh pH của tinh dịch. Do ựó, phải bổ sung chất ựệm vào môi trường ựể giữ ổn ựịnh pH trong quá trình bảo tồn.
d/ Tỷ lệ giữa chất ựiện giải và chất không ựiện giải: Môi trường phải ựảm bảo có tỷ lệ giữa chất ựiện giải và không ựiện giải thắch hợp. Các chất không ựiện giải thường là các ựường (glucose, fructose...). Ngoài việc cung cấp năng lượng cho tinh trùng trong quá trình trao ựổi chất, ựường có vai trò rất quan trọng trong việc bảo vệ tinh trùng tránh cho tinh trùng không bị mất ựiện tắch bề mặt, một nguyên nhân gây ra hiện tượng kết dắnh tinh trùng thành từng ựám. Sở dĩ ựường có vai trò như vậy vì nó là chất không ựiện giải có tác dụng pha loãng nồng ựộ ion trong môi trường, do ựó làm giảm tác ựộng của các ion tới màng nguyên sinh chất của tinh trùng.
e/ Môi trường phải có các ựặc ựiểm vật 1ý phù hợp với tinh trùng:
- Tỷ trọng của môi trường phải tương ựương tỷ trọng của tinh dịch. Nguyên tắc này ựảm bảo cho môi trường và tinh dịch hòa tan vào nhau, tinh trùng tránh ựược lực ựẩy Acsimet.
- độ nhớt của môi trường cũng phải tương ựương với ựộ nhớt của tinh dịch. Bởi vì, sự vận ựộng của tinh trùng trong môi trường hình thành một lực
ma sát nội phân tử tác ựộng lên bề mặt màng tế bào, gây nên sức căng trên bề mặt và có thể làm thay ựổi hình thái, cấu trúc của tinh trùng. đảm bảo nguyên tắc này tức là tránh cho tinh trùng không bị ảnh hưởng bởi lực ma sát nội phân tử, ựồng thời giảm sức căng bề mặt ngoài màng tinh trùng. Chất keo nhớt thường dùng trong môi trường là glyxenn, lòng ựỏ trứng gà, lipoprotein hoặc leucitin.
f/ Môi trường cần thoả mãn tắnh kinh tế và tắnh thực tiễn: để dễ dàng áp dụng vào thực tiễn sản xuất, môi trường pha loãng và bảo tồn tinh dịch phải thoả mãn các yêu cầu: Nguyên liệu dễ tìm, giá thành phù hợp; Kỹ thuật pha chế ựơn giản; Có khả năng kéo dài thời gian sống của tinh trùng, nhưng vẫn ựảm bảo tỷ lệ thụ thai cao sau khi phối giống.
2.3.3.2. Bảo tồn tinh dịch
Mục ựắch: Tinh trùng sau khi ra khỏi cơ thể chỉ sống ựược trong một thời gian rất ngắn (tắnh bằng giờ, thậm chắ bằng phút). Vì vậy, trong công tác thụ .tinh nhân tạo người ta phải tiến hành bảo tồn tinh dịch nhằm mục ựắch: kẻo ựài thời gian sống của tinh trùng ở bên ngoài cơ thể, trên cơ sở ựó nâng cao khả năng sản xuất của con ựực và mở rộng bán kắnh gieo tinh.
Nguyên tắc: Muốn bảo tồn ựược tinh dịch trong một thời gian dài, cần phải kìm hãm quá trình trao ựổi chất của tinh trùng thông qua việc ức chế hoạt ựộng của các enzyme ựặc biệt các enzyme phân giải ựường, vì bản chất của sự trao ựổi chất ở tinh trùng là các quá trình ựường phân. Dựa trên nguyên tắc này, người ta ựã ựưa ra một số phương pháp bảo tồn tinh dịch khác nhau, phù hợp với từng loài gia súc và từng ựiều kiện cụ thể.
Các phương pháp bảo tồn tinh dịch:
- Bảo tồn ở dạng lỏng bằng nhiệt ựộ thấp: Nguyên lý của phương pháp này là dùng nhiệt ựộ thấp nhưng chưa tới mức làm cho tinh dịch ựông lạnh ựể hạn chế hoạt ựộng của tinh trùng;
- Bảo tồn ở dạng lỏng bằng hóa chất: Nguyên lý của phương pháp này là sử dụng hoá chất ựể ức chế hoạt ựộng trao ựổi chất của tinh trùng. Một trong các
phương pháp ựó là: sử dụng khắ CO2 ựể ức chế hoạt ựộng của tinh trùng. Phương pháp dựa trên việc cho khắ CO2 thẩm thấu vào trong môi trường pha loãng tinh dịch ựến khi bão hoà, sau ựó tiến hành pha loãng và bảo tồn tinh dịch. Phương pháp này có thể cho phép bảo tồn tinh dịch ở nhiệt ựộ bình thường từ 20-22oC
- Bảo tồn dạng ựông lạnh: Nguyên lý của phương pháp này là dùng nhiệt ựộ rất thấp ựến mức làm cho tinh dịch bị ựóng băng ựể bảo tồn. Ở nhiệt ựộ rất thấp, quá trình trao ựổi chất của tinh trùng bị ức chế gần như hoàn toàn, tinh trùng sống ở trạng thái tiềm sinh.
2.3.3.3. Vận chuyển tinh dịch
Trong công tác TTNT, người ta vận chuyển, ựưa tinh dịch của gia súc từ nơi này ựến nơi khác. Khoảng cách vận chuyển có thể gần, xa khác nhau, song yêu cầu ựặt ra là tinh dịch phải còn khả năng thụ thai. để ựảm bảo ựược yêu cầu trên, trong khi vận chuyển, tinh dịch phải ựược bảo quản trong ựiều kiện nhiệt ựộ không ựổi, giống như khi ựang bảo tồn tại cơ sở khai thác, tránh sóc lắc, ựổ vỡ, ướt nhãn, nhầm lẫn liều tinh. Thông thường, tinh dịch ựược ựựng và chèn chặt trong một số dụng cụ chuyên dùng, như: phắch lạnh, hộp xốp, bình nhơ lỏng Ầ
2.3.3.4. Kỹ thuật dẫn tinh
a/ Phát hiện lợn nái ựộng dục:
Chu kỳ ựộng dục của lợn nái trung bình là 21 ngày, dao ựộng từ 19-22 ngày tuỳ theo giống, tuổi và cá thể. Thời gian ựộng dục trung bình là 3-4 ngày (ựối với lợn nội), 4-5 ngày (ựối với lợn ngoại và lợn lai), 1-2 ngày (ựối với lợn nái hậu bị). Thời gian ựộng dục cũng như chịu ựực nhìn chung càng dài khi con vật ựộng dục càng sớm sau cai sữa.
b/ Biểu hiện ựộng dục và cách phát hiện:
Biểu hiện ựộng dục ở lợn nái thể hiện rất rõ: Giai ựoạn ựầu lợn kêu rắt, phá chuồng, thắch nhảy lên lưng con khác nhưng không cho con khác nhảy lên lưng mình. Nếu người sờ mó vào lợn, nó sẽ né tránh hoặc bỏ chạy. Cuối giai
ựoạn, các biểu hiện hưng phấn giảm dần. Ở cuối ngày thứ hai sang ựầu ngày thứ ba, lợn nái thường không chạy nhảy nữa, ựứng hoặc nằm một chỗ, mắt có vệt quầng thâm, dáng mệt mỏi, buồn bã. Biểu hiện cục bộ ở cơ quan sinh dục: âm hộ sung huyết, sưng to và mọng ựỏ, sau chuyển dần sang bớt sưng, se, hơi thâm và có các vết nhăn mờ. Dịch chảy từ âm hộ giảm, hơi ựặc và keo dắnh (âm hộ lợn nái thường thấy dắnh rơm, cỏ rác).
c/ Cách xác ựịnh thời ựiểm phối giống thắch hợp:
Có nhiều phương pháp xác ựịnh thời ựiểm phối giống thắch hợp cho lợn nái, các phương pháp thường ựược dùng nhiều trong sản xuất là:
- Phương pháp quan sát triệu trứng lâm sàng; - Dùng ựực thắ tình;
- Dùng feromon; - Dùng âm thanh. d/ Kỹ thuật dẫn tinh:
* Dụng cụ dẫn tinh gồm có:
- Dẫn tinh quản (loại ống cao su trơn hoặc loại ống plastic có ựầu xoắn hoặc không xoắn) và bộ phận chứa tinh dịch (bằng lọ thủy tinh hoặc plastic);
- Xi lanh dùng ựể dựng và bơm tinh dịch (trong trường hợp lọ ựựng tinh bằng thủy tinh).
Những dụng cụ này ựược làm bằng các chất liệu không ựộc cho tinh trùng. * Thao tác dẫn tinh:
- Bước 1: Quan sát triệu chứng ựộng dục, xác ựịnh thời ựiểm dẫn tinh; - Bước 2: Chuẩn bị dụng cụ;
- Bước 3 : Chuẩn bị tinh dịch;
- Bước 4: Vệ sinh lợn nái và tiến hành dẫn tinh;
- Bước 6: Kiểm tra kết quả thụ thai sau 21-25 ngày, phát hiện những lợn nái ựộng dục lại ựể kịp thời dẫn tinh.