Sau khi tuyển chọn các dòng vi khuẩn, tiếp tục tiến hành khảo sát hoạt tính của một số enzyme như: protease, cellulase, amylase và lipase.
* Khảo sát khả năng tạo enzyme protease - Môi trường: MSB agar có skim milk (2%)
- Cách tiến hành: Vi khuẩn nuôi trong môi trường LB lỏng qua đêm sau đó nhỏ 5μl dung dịch vi khuẩn lên môi trường MSB agar có skim milk (2%) và ủ ở 45oC. Đo đường kính vùng sáng quanh khuẩn lạc sau 1, 2, 3 ngày để xác định khả năng tổng hợp enzyme protease của vi khuẩn.
* Khảo sát khả năng tạo enzyme lipase
- Môi trường: MSB lỏng có bổ sung dầu ăn (2%)
Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 20 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học
(2%) đặt trên máy lắc 120 vòng/phút trong 2-3 ngày ở 45oC. Đo OD600nm các ngày 0, 2 và 4 để xác định khả năng tăng sinh khối của vi khuẩn trong môi trường chứa 2% dầu ăn của vi khuẩn.
* Khảo sát khả năng tạo enzyme amylase
- Môi trường: MSB agar có bổ sung tinh bột (2%)
- Cách tiến hành: Vi khuẩn nuôi trong môi trường LB lỏng qua đêm sau đó nhỏ 5μl dung dịch vi khuẩn lên môi trường MSB agar có tinh bột (2%). Sau 2 ngày ủ ở 45oC cho dung dịch Iod phủ lên bề mặt thạch. Enzyme amylase do vi khuẩn tổng hợp sẽ thủy phân tinh bột trong môi trường, phần tinh bột không bị thủy phân tác dụng với dung dịch Iod tạo thành màu xanh đen.
* Khảo sát khả năng tạo enzyme cellulase - Môi trường: MSB agar có CMC (2%)
- Cách tiến hành: Vi khuẩn nuôi trong môi trường LB lỏng qua đêm sau đó nhỏ 5μl dung dịch vi khuẩn lên môi trường MSB agar có CMC (2%). Sau khi ủ vi khuẩn 2- 3 ngày phủ lên bề mặt agar dung dịch Iodine và đo đường kính vòng sáng xuất hiện quanh khuẩn lạc vi khuẩn.