3.1.3.1. Phổ hồng ngoại
Hỡnh 3.6: Phổ FT-IR của -chitosan theo phương phỏp phỏ kết tinh
Từ phổ hồng ngoại (hỡnh 3.6) của chitosan thu được từ phản ứng deaxetyl húa một lần chitosan thu được ở trong dung dịch NaOH 5% theo phương phỏp phỏ kết tinh (hỡnh 3.6) cho thấy cường độ pic hấp thụ đặc trưng cho dao động hoỏ trị liờn kết C=O của nhúm axetamit giảm mạnh, đồng thời xuất hiện pớc hấp thụ tại 1603 cm-1
đặc trưng cho dao động biến dạng của liờn kết N-H.
Theo cụng thức 2.3 phần thực nghiệm, -chitosan nhận được cú DA 0% (hay DDA 100%), phản ứng deaxetyl hoỏ gần như diễn ra hoàn toàn.
3.1.3.2. Phổ cộng hưởng từ hạt nhõn
Kết quả ghi phổ cộng hưởng từ hạt nhõn: phổ 1
H-NMR; phổ 13C-NMR của mẫu chitosan thu được từ phản ứng deaxetyl hoỏ theo phương phỏp phỏ kết tinh, trong dung mụi D2O-1%CF3COOD ở 80oC được thể hiện trờn cỏc hỡnh 3.7, 3.8, cỏc pic tớn hiệu cú thể được quy kết như trong bảng 3.4 và 3.5.
Hỡnh 3.7: Phổ 1H-NMR của –chitosan deaxetyl hoỏ hoàn toàn Bảng 3.4: Độ chuyển dịch húa học của proton (1H) của chitosan
Tớn hiệu ppm Tớn hiệu ppm H1 5,33 H5 4,24 H2 3,63 H6a 4,30 H3 4,37 H6b 4,46 H4 4,39 CH3 (của OCOCH3 tự do và trong mắt xớch CTS) 2,55 và 2,57
Hỡnh 3.8: Phổ 13
C-NMR của –chitosan deaxetyl hoỏ hoàn toàn
Bảng 3.5: Độ dịch chuyển húa học cacbon (13C) của Chitosan
Tớn hiệu ppm Tớn hiệu ppm
C1 99,7 C5 75,9
C2 57,2 C6 61,5
C3 72,1 CH3 Khụng xuất hiện
C4 78,6 C=O Khụng xuất hiện
Từ cỏc giỏ trị tớch phõn trờn phổ 1
H-NMR, độ axetyl húa của chitosan tớnh theo cụng thức: DA= ICH3/ 3( IH1 chitosan+ IH1 chitin) x100% (trong đú I là giỏ trị tớch phõn của pic tớn hiệu) là 0% ( hay DDA 100%). Như vậy, sử dụng phương phỏp phỏ kết tinh cú thể điều chế chitosan cú DA 0%.
3.1.3.3. Giản đồ nhiễu xạ tia X
Kết quả chụp giản đồ nhiễu xạ tia X (hỡnh 3.9) cho thấy chitosan điều chế được theo phương phỏp phỏ kết tinh cú độ kết tinh rất thấp.
Hỡnh 3.9: Giản đồ nhiễu xạ tia X của chitosan điều chế theo
phương phỏp phỏ kết tinh
3.1.3.4. Khối lượng phõn tử
Kết quả đo ỏp suất thẩm thấu ( ) của chitosan điều chế theo phương phỏp phỏ kết tinh được trỡnh bày ở bảng 3.6. Khối lượng phõn tử chitosan tớnh được: Mn = 41326 g/mol tương đương với 410 kDa. Như vậy, phản ứng cắt mạch giảm khối lượng phõn tử diễn ra song song với phản ứng deaxetyl húa chitosan.
Bảng 3.6: Kết quả đo ỏp suất thẩm thấu của chitosan DA 0
Tờn mẫu C(g/100ml) dn (trung bỡnh 3 lần đo) (cm) /C
M1 0,025 25,76 0,27 10,8
M2 0,05 89,22 0,935 18,70
M3 0,1 318,6 3,050 30,5
M4 0,2 291,1 11,46 57,3
y = 242.19x + 6.3208 0 20 40 60 80 100 120 0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45 C /C
Hỡnh 3.10: Đồ thị biểu diễn mối quan hệ giữa /C và C Nhận xột 1:
+ Đó tỏch được chitin từ mai mực ống, hàm lượng chitin khoảng 37,5%. + Đó điều chế được chitosan từ chitin thụng qua phản ứng deaxetyl húa. Độ deaxetyl hoỏ đạt được khi deaxetyl húa một lần trong dung dịch NaOH 50%, nhiệt độ 120oC là 28%, khối lượng phõn tử 453 KDa. Sử dụng phương phỏp phỏ kết tinh thu được chitosan cú độ axetyl húa 0%, khối lượng phõn tử 410 kDa.