4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.4.1. Kết quả xác định hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà
Dominant Partridge D300 dưới hai tháng tuổi sau khi dùng vacxin Medivac ND –IB với lịch dùng khác nhau
Để phòng bênh Newcastle cho đàn gà dưới hai tháng tuổi, người ta thường sử dụng vacxin chế từ nhóm virus Lentogen. Trong cơ thể, virus nhóm lentogen chỉ có khả năng nhân lên được trong tế bào của một số mô như mô đường tiêu hóa, đường hô hấp, vì ở đây mới có arginine và men tripxin giúp cho việc phân cắt glucoprotein Fo, thành F1, F2 tạo nên virus hoàn chỉnh.
Hiện nay ở Việt Nam có nhiều loại vacxin Newcastle được chế từ nhóm virus này. Ở Trung tâm Nghiên cứu và Huấn luyện chăn nuôi chúng tôi thường sử dụng vacxin Medivac ND - IB của, Indonesia cho đàn gà dưới 2 tháng tuổi với lịch dùng: 3 ngày tuổi lần 1, 14 ngày tuổi lần 2 .
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 55 Với mục đích để có được lịch dùng vacxin Newcastle thích hợp tạo lượng kháng thể cao cho gà. Chúng tôi tiến hành thí nghiệm xác định lượng kháng thể Newcastle của đàn gà khi sử dụng vacxin Medivac ND – IB với lịch dùng khác nhau. Thí nghiệm được tiến hành trên đàn gà con Dominant Partridge D300, đàn gà có lượng kháng thể thụ động lúc 1 ngày tuổi với HI bình quân (3,2±0,24)log2 gà thí nghiệm được chia làm 2 lô:
- Lô I : Gà dùng vacxin theo lịch 1 (gà 3 ngày tuổi dùng vacxin lần 1, 14 ngày tuổi dùng vacxin lần 2)
- Lô II : Gà dùng vacxin theo lịch 2 ( gà 7 ngày tuổi dùng lần 1, 21 ngày tuổi dùng lần 2)
Vacxin Medivac ND – IB dùng cho gà bằng phương pháp nhỏ mắt, mũi Sau khi sử dụng vacxin lấy máu làm phản ứng HI để xác định lượng kháng thể Newcastle được sản sinh ra tại các thời điểm kiểm tra.
Kết quả thu được trình bày ở bảng 4.7 và minh họa ở hình 4.5. Kết quả ở bảng 4.7 cho thấy:
* Khi dùng vacxin lần 1:
- Ở lô gà dùng vacxin Medivac ND – IB theo lịch 1
+ Thời điểm dùng vacxin Medivac ND-IB lúc 3 ngày tuổi :
Sau khi sử dụng vacxin được 11 ngày, kiểm tra lượng kháng thể Newcastle của đàn gà cho thấy : 100% mẫu kiểm tra có kháng thể Newcastle, có 22 mẫu có kháng thể đạt hiệu giá ≥ 3 log2, đạt tỷ lệ bảo hộ 73%, hiệu giá HI bình quân đạt (3,0±0,13)log2. Hiệu giá HI cao nhất đạt đến 4 log2.
- Ở lô gà dùng vacxin Medivac ND – IB theo lịch 2 + Thời điểm dùng vacxin lúc 7 ngày tuổi :
Sau khi sử dụng vacxin 14 ngày kiểm tra lượng kháng thể Newcastle của đàn gà cho thấy :
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 56
Bảng 4.7. Kết quả xác định hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà Gà Dominant Partridge D300 sau khi dùng vacxin Medivac ND - IB với lịch dùng vacxin khác nhau
Lần dùng vacxin Lịch vacxin Tuổi (ngày) Thời gian sau dùng vacxin (ngày) Số mẫu kiểm tra(n) Hiệu giá HI (log2) HI (X m± x) Tỷ lệ có KT (%) HI ≥ 3log2 (%) Dùng vacxin Kiểm tra 1 2 3 4 5 6 I 1 3 14 11 30 8 14 8 3,0 ± 0,13 100 73 2 7 21 14 30 3 19 5 3 3,3 ± 0,14 100 90 II 1 14 24 10 30 3 13 12 2 3,4 ± 0,14 100 90 2 21 35 14 30 1 10 10 9 3,9 ± 0,16 100 96 42 21 30 9 12 7 2 4,1 ±0,16 100 100
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 57 100% mẫu kiểm tra có kháng thể Newcastle, có 27 mẫu có kháng thể đạt hiệu giá HI ≥ 3 log2, đạt tỷ lệ bảo hộ 90%, hiệu giá HI bình quân đạt (3,3±0,15)log2. Hiệu giá HI cao nhất đạt đến 5 log2.
* Khi dùng vacxin lần 2:
- Ở lô gà dùng vacxin Medivac ND – IB theo lịch 1
+ Thời điểm dùng vacxin lần cho gà là 14 ngày tuổi. sau khi dùng vacxin 10 ngày, kiểm tra lượng kháng thể Newcastle của gà cho thấy : 100% mẫu kiểm tra có kháng thể Newcastle, có 27 mẫu có kháng thể đạt hiệu giá HI ≥ 3 log2, đạt tỷ lệ bảo hộ 90%, hiệu giá HI bình quân đạt (3,4±0,14)log2. Hiệu giá HI cao nhất đạt đến 5 log2.
- Ở lô gà dùng vacxin Medivac ND – IB theo lịch 2
+ Thời điểm dùng vacxin lần cho gà là 21 ngày tuổi. sau khi dùng vacxin 14 ngày, kiểm tra lượng kháng thể Newcastle của gà cho thấy : 100% mẫu kiểm tra có kháng thể Newcastle, có 29 mẫu có kháng thể đạt hiệu giá HI ≥ 3 log2, đạt tỷ lệ bảo hộ 96%, hiệu giá HI bình quân đạt (3,9±0,16)log2. Hiệu giá HI cao nhất đạt đến 5 log2.
+ Tiếp tục kiểm tra thời điểm sau khi dùng vacxin 21 ngày, kiểm tra lượng kháng thể Newcastle của gà cho thấy : 100% mẫu kiểm tra có kháng thể Newcastle, có 29 mẫu có kháng thể đạt hiệu giá HI ≥ 3log2, đạt tỷ lệ bảo hộ 100%, hiệu giá HI bình quân đạt (4,1±0,16)log2. Hiệu giá HI cao nhất đạt đến 6log2.
Như vậy, với đàn gà Dominant Partridge D300 nuôi tại Trung tâm Nghiên cứu và Huấn luyện chăn nuôi, ở giai đoạn dưới 2 tháng tuổi khi sử dụng vacxin Medivac ND-IB để phòng bệnh Newcastle với các lịch dùng : lịch 1 dùng vacxin lần 1 lúc gà 3 ngày tuổi, lần 2 lúc 14 ngày tuổi và lịch 2 dùng vacxin lần 1 khi gà 7 ngày tuổi, lần 2 khi gà 21 ngày tuổi. Cả hai lịch dùng vacxin đều tạo được miễn dịch Newcastle cho đàn gà, lịch dùng vacxin 2 cho lượng kháng thể Newcastle cao hơn và hiệu quả phòng bệnh cao hơn.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 58
Hình 4.5: Kết quả xác định hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà Dominant Partridge D300 sau khi sử dụng vacxin Medivac ND - IB với lịch dùng vacxin khác nhau
4.4.2. Kết quả xác định hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà
Dominant Partridge D300 sau khi dùng vacxin nhũ dầu Medivac ND – IB - IBD lần 1 và lần 2
Để phòng bệnh Newcastle đối với đàn gà sinh sản bố mẹ, sau khi gây miễn dịch cơ sở bằng vacxin Lasota lần 1 và lần 2 được sử dụng tiếp vacxin Newcastle để tạo miễn dịch cao cho đàn gà bố mẹ cũng như tạo kháng thể thụ động cho gà con mới nở. Theo Reeve (1974) cho biết : Khả năng đáp ứng miễn dịch của cơ thể tăng theo độc lực của chủng virus vacxin Newcastle. Với virus Newcastle thuộc nhóm Mesogen có thể nhân lên được trong nhiều loại tế bào của cơ thể, vì quá trình phân cắt trên không cần lựa chọn proteaza của vật chủ. Chính điều này giúp các chủng virus Newcastle thuộc nhóm mesogen có khả năng tạo miễn dịch cao hơn virus thuộc nhóm lentogen.
Hiện nay Trung tâm Nghiên cứu và Huấn luyện chăn nuôi đang dùng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD (Hãng Medion, Indonesia). Sử dụng vacxin này có ưu điểm cùng một lúc phòng được 3 bệnh : Newcastle,
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 59 Infectious Bronchitis, Gumboro giảm được thời gian sử dụng vacxin cho đàn gà, đỡ nhân lực và giảm stress.
Với mục đích có được lịch dùng vacxin Newcastle thích hợp cho đàn gà sinh sản bố mẹ. Chúng tôi tiến hành thí nghiệm xác định hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà (gà đã có miễn dịch cơ sở) khi sử dụng vacxin nhũ dầu Medivac ND – IB – IBD với lịch dùng khác nhau.
Gà thí nghiệm chia làm 2 lô :
-Theo lịch dùng vacxin 1 : Sử dụng vacxin Medivac ND-IB-IBD lần 1 vào lúc gà 24 ngày tuổi với liều 0,25ml/con, lần 2 lúc 126 ngày tuổi với liều 0,5ml/con bằng phương pháp tiêm dưới da cổ.
-Theo lịch dùng vacxin 2 : Sử dụng vacxin Medivac ND-IB-IBD lần 1 vào lúc gà 50 ngày tuổi, lần 2 lúc 145 ngày tuổi với liều 0,5ml/con bằng phương pháp tiêm dưới da cổ.
Sau khi sử dụng vacxin 1, 2, 3, 4, 8, 12, 15,16 tuần chúng tôi lấy máu làm phản ứng HI để xác định lượng kháng thể Newcastle sản sinh ra.
Kết quả thu được thể hiện qua bảng 4.8, 4.9 và hình 4.6, 4.7.
Kết quảở bảng 4.8 cho thấy:
- Khi dùng vacxin Medivac ND-IB-IBD lần 1
+ Lô gà dùng vacxin theo lịch 1 : Gà được tiêm vacxin vào lúc 24 ngày tuổi với liều 0,25ml/con
Sau khi sử dụng vacxin nhũ dầu được 1 tuần các mẫu kiểm tra đều có kháng thể Newcastle, HI bình quân đạt (4,10±0,31)log2, số mẫu có HI ≥ 3 log2 là 83,3%. Hàm lượng kháng thể Newcastle tiếp tục tăng lên rõ rệt ở tuần thứ 2 (5,96±0,25)log2 và đạt cao nhất ở tuần thứ 3 là (6,97±0,19)log2. Chúng tôi so sánh hàm lượng kháng thể ở tuần thứ 2 và tuần thứ 3 thấy có sự khác nhau với (P<0,05).
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 60
Bảng 4.8: Kết quả xác định hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà Dominant Partridge D300 sau khi sử dụng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD lần 1 với lịch dùng vacxin khác nhau
Lịch dùng vacxin Tuổi gà dùng vacxin (ngày) Tuổi gà (ngày) Thời gian sau khi dùng vacxin (Tuần) Số mẫu
Hiệu giá HI (Log2)
HI (X m± x) HI ≥ 3log2 (%) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 I 24 31 1 30 5 7 9 4 1 2 2 4,10 ± 0,31 83.33 38 2 30 4 8 9 5 2 2 5,96 ± 0,25 100 45 3 30 3 6 11 9 1 6,97 ± 0,19 100 52 4 30 2 6 5 8 8 1 6,56 ± 0,25 100 80 8 30 2 7 8 5 6 3 5,53 ± 0,26 100 108 12 30 2 2 9 5 4 3 5 4,20 ± 0,33 86.67 126 15 30 3 5 13 4 3 2 3,17 ± 0,24 73.33 II 50 57 1 30 6 15 9 5,10 ± 0,23 100 64 2 30 4 5 4 7 8 2 6,60 ± 0,30 100 71 3 30 2 5 5 8 7 3 7,73 ± 0,26 100 78 4 30 3 8 13 6 8,73 ± 0,26 100 106 8 30 5 6 7 10 2 7,93 ± 0,22 100 134 12 30 4 4 6 10 4 2 6,40 ± 0,26 100 145 14 30 2 4 5 4 6 9 5,20 ± 0,28 93,33
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 61 Sau đó theo thời gian, hàm lượng kháng thể Newcastle giảm xuống nhưng tốc độ giảm chậm đến tuần thứ 12 hàm lượng kháng thể vẫn đạt (4,20±0,33)log2 nhưng chỉ có 26/30 mẫu có HI ≥ 3log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 86,67% và đến tuần thứ 15 thì hàm lượng kháng thể chỉ còn (3,17±0,24)log2, tỷ lệ bảo hộ chỉ còn 73,33%.
+ Lô gà dùng vacxin theo lịch 2 : Gà được tiêm vacxin vào lúc 50 ngày tuổi, với liều 0,5ml/con
Sau khi sử dụng vacxin nhũ dầu được 1 tuần các mẫu kiểm tra đều có hiệu giá HI cao dao động trong khoảng 4log2 đến 6log2, HI bình quân đạt (5,10±0,23)log2, số mẫu có HI ≥ 3 log2 là 100%. Hàm lượng kháng thể Newcastle tiếp tục tăng lên rõ rệt ở tuần thứ 2 và đạt (6,60±0,30)log2. Hàm lượng kháng thể đạt cao nhất ở tuần thứ 4 là (8,73±0,26)log2, các mẫu kiểm tra có hiệu giá HI cao dao động trong khoảng 7log2 đến 10log2. So sánh hàm lượng kháng thể ở tuần thứ 2 và tuần thứ 4 sau khi dùng vacxin ta thấy có sự khác nhau với (P<0,05).
Vào các thời điểm 8, 12, 14 tuần ta thấy hàm lượng kháng thể và tỷ lệ có kháng thể vẫn đạt cao, sự biến động cũng tuân theo một quy luật, giảm dần theo thời gian và mức độ giảm chậm đến tuần 14 hàm lượng kháng thể vẫn đạt (5,20±0,28)log2, số mẫu có HI ≥ 3 log2 là 93,33%. Hàm lượng kháng thể thời điểm này vẫn đủ bảo hộ chống lại được virut cường độc trên mức 3 log2 theo Toth Bela (1970) và Atlan (1972).
Theo Be’la La’szlo (1977), Nguyễn Thu Hồng (1993), Lê Hồng Phong (1988), Nguyễn Vĩnh Phước (1978) cho biết số lượng virus trong vacxin có ảnh hưởng đến lượng kháng thể Newcastle được sản sinh ra, nếu đưa vacxin có số lượng virus thấp sẽ cho hàm lượng kháng thể không cao và thời gian bị miễn dịch bị thu ngắn. Theo Stone (1993) khi nghiên cứu về vacxin vô hoạt cho biết : Chất bổ trợ trong vacxin có ảnh hưởng quyết định đến khả năng gây miễn dịch của thành phần kháng nguyên.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 62 Như vậy, đàn gà Dominant Partridge D300 nuôi tại Trung tâm Nghiên cứu và Huấn luyện chăn nuôi đã có miễn dịch cơ sở với virus Newcastle (sử dụng vacxin Medivac ND-IB 2 lần). Khi sử dụng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD lần 1 với 2 lịch dùng vacxin khác nhau đều tạo miễn dịch tốt với virus Newcastle với lịch 1 sau khi dùng vacxin được 15 tuần HI bình quân vẫn còn đạt (3,17±0,24)log2, số mẫu có khả năng bảo hộ với bệnh đạt 73,3%. Với lịch dùng vacxin 2, sau khi dùng vacxin được 14 tuần HI bình quân còn khá cao (5,20±0,28)log2, số mẫu có HI ≥ 3log2 có khả năng bảo hộ với bệnh đạt 93,33%.
Khi so sánh hàm lượng kháng thể newcastle ở thời điểm 1, 2, 3 tuần sau khi tiêm vacxin chúng tôi nhận thấy hàm lượng kháng thể ở lô gà dùng vacxin theo lịch 2 luôn cao hơn lô gà dùng vacxin theo lịch 1 với (P<0,05) và các tuần tiếp theo 4, 8, 12, 15 hàm lượng kháng thể ở lô gà dùng vacxin theo lịch 2 cũng cao hơn lô gà dùng vacxin theo lịch 1 với (P<0,001) (Hình 4.6)
Qua hình 4.6 ta thấy đường biểu diễn hàm lượng kháng thể ở cả 2 lịch dùng vacxin đều tuân theo quy luật tăng dần và đạt đỉnh ở tuần thứ 3 và thứ 4, sau đó giảm dần đến tuần 14, 15 vẫn đạt ở mức cao, lô gà dùng vacxin theo lịch 2 cho đáp ứng miễn dịch tốt hơn.
Hình 4.6: Kết quả xác định hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà Dominant Partridge D300 sau khi sử dụng vacxin nhũ dầu
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 63 Để phòng bệnh Newcastle tốt cho gà Dominant Partridge D300 trong giai đoạn sinh sản và để cho thế hệ sau có hàm lượng kháng thể thụ động cao bảo hộ cho gà con những ngày đầu mới nở, chúng tôi tiến hành dùng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD lần 2 cho gà ở 2 lịch dùng vacxin khác nhau. Kết quả được trình bày ở bảng 4.9.
Kết quảở bảng 4.9 cho thấy:
- Lô gà dùng vacxin theo lịch 1 : Gà được dùng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD lần 2 lúc 126 ngày tuổi, với liều 0,5ml/con
Sau khi sử dụng vacxin nhũ dầu được 1 tuần các mẫu kiểm tra đều có hiệu giá HI cao, HI bình quân đạt (4,47±0,19)log2, số mẫu có HI ≥ 3 log2 là 100%. Hàm lượng kháng thể Newcastle tiếp tục tăng lên rõ rệt ở tuần thứ 2 và đạt cao nhất ở tuần thứ 3 là (8,33±0,15)log2. So sánh hàm lượng kháng thể ở tuần thứ 2 và tuần thứ 3 ta thấy có sự khác nhau với (P< 0,05).
Sau đó theo thời gian, hàm lượng kháng thể Newcastle giảm xuống nhưng tốc độ giảm chậm đến tuần thứ 16 hàm lượng kháng thể vẫn đạt (7,56±0,19)log2 100% số mẫu kiểm tra có HI ≥ 3log2, tỷ lệ gà có khả năng bảo hộ đạt 100% . Hàm lượng kháng thể thời điểm này vẫn đủ bảo hộ chống lại được virut cường độc trên mức 3log2 theo Toth Bela (1970) và Atlan (1972).
- Lô gà dùng vacxin theo lịch 2 : Gà dùng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD lần 2 lúc 145 ngày tuổi, với liều 0,5ml/con.
Sau khi sử dụng vacxin nhũ dầu được 1 tuần các mẫu kiểm tra đều có hiệu giá HI cao dao động trong khoảng 4log2 đến 7log2 , HI bình quân đạt (5,47±0,22)log2, số mẫu có HI ≥ 3log2 là 100%. Hàm lượng kháng thể Newcastle tiếp tục tăng lên rõ rệt ở tuần thứ 2 và đạt (7,16±0,20)log2. Hàm lượng kháng thể đạt cao nhất ở tuần thứ 3 là (8,93±0,12)log2, các mẫu kiểm tra có hiệu giá HI cao dao động trong khoảng 7log2 đến 10log2. So sánh hàm lượng kháng thể ở tuần thứ 2 và tuần thứ 4 sau khi dùng vacxin ta thấy có sự khác nhau với (P< 0,05).
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 64
Bảng 4.9: Kết quả xác định hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà Dominant Partridge D300 sau khi sử dụng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD lần 2 với lịch dùng vacxin khác nhau
Lịch dùng vacxin Tuổi gà dùng vacxin (ngày) Tuổi gà (ngày) Thời gian sau khi sử dụng vacxin (Tuần) Số mẫu Hiệu giá HI (log2) HI (X m± x) HI≥ 3log2 3 4 5 6 7 8 9 10 I 126 133 1 30 4 12 10 4 4,47 ± 0,19 100