loại môi trường DEK và DEL
Kết quả được ghi nhận cảm quan qua kính hiển vi, hình ảnh được ghi nhận ở cách nhau 10 giờ, sau 40 giờ đem nhuộm MTT, đọc giá trị mật độ quang (OD620), kết quả thu được như sau:
Bảng 4.5 Giá trị OD620 và tỷ lệ tế bào sống trung bình của 2 loại môi trường tế bào
Loại tế bào Giá trị OD620 (X ± SEM) Tỷ lệ tế bào sống (%)
Đối chứng Gây nhiễm
DEK 0,183 ± 0,010 0,134 ± 0,022 73,22%
DEL 0,237 ± 0,014 0,101 ± 0,004 46,26%
Dưới đây là một số hình ảnh thể hiện CPE trên 2 loại tế bào, được ghi nhận tính từ khi một số giếng bắt đầu biểu hiện CPE đến khi các tế bào bắt đầu tróc ra khỏi đáy giếng:
A
B
Hình 5.0 Thời gian biểu hiện CPE của 2 loại tế b ào DEK (A) và DEL (B) sau gây nhiễm DHV-1
ĐC giờ
20 giờ 30 giờ 40 giờ
ĐC 10 giờ 20 giờ 40 giờ
Co tròn Liên bào Vệt tan
Dựa vào số liệu (bảng 4.5) và hình ảnh ghi nhận được (hình 5.0), chúng tôi đưa ra nhận xét như sau:
Về hình thái, các tế bào đang ở kéo dài bắt đầu co tròn dần dần lại (hình 5.0 A – 20 giờ và hình 5.0 B – 10 giờ), sau đó kết cụm lại hay nối với nhau tạo các liên bào (hình 5.0 A – 30 giờ), cuối cùng các tế bào hoại tử tạo các vệt tan và bắt đầu bong tróc chết đi (hình 5.0 – 40 giờ)
Về thời gian, CPE ở tế bào DEK co tròn chậm hơn tế bào DEL (DEK khoảng 20 giờ và DEL khoảng 10 giờ), và CPE của DHV-1 trên tế bào DEK chậm hơn tế bào DEL: ở 30 giờ các tế bào DEK vẫn còn CPE co tròn thì các tế bào DEL bắt đầu tạo vệt tan (hình 5.0 B – 20 giờ).
Về giá trị OD620, tại thời điểm đo được (40 giờ) thì giá trị OD620 của tế bào DEK cao hơn tế bào DEL (DEK là 0,134 và DEL là 0,101) chênh lệch không nhiều, tuy nhiên khi tính tỷ lệ tế bào sống trung bình thì tế bào DEK cao hơn rất nhiều so với tế bào DEL (DEK là 73,22% so với 46,26%). Điều này chứng tỏ rằng DHV gây bệnh tích và phá hủy trên tế bào DEL nhanh hơn tế bào DEK.
Kết luận, virus viêm gan vịt type 1 gây bệnh tích trên 2 loại tế bào đều biểu hiện rõ 2 bệnh tích đặc trưng của bệnh viêm gan vịt do virus là co tròn và hoại tử tế bào, và virus sinh sản ở tế bào DEL tốt hơn tế bào DEK. (thông qua giá trị OD620 và tỷ lệ tế bào sống thấp hơn). Từ đây, tùy vào yêu cầu thí nghiệm in vitro về virus học mà ta có thể sử dụng tế bào DEK và DEL cho phù hợp.
CHƯƠNG 5
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ