c. Nhận xét đối với từng sinh viên thực hiện đề tài:
4.8 Thành phần lipid tích lũy bởi Y lipolytica
Lipid sau khi trích ly và loại hết dung môi đƣợc trữ trong chai kín với dung môi hexane ở tủ mát đến khi cần phân tích (Hình 4.16).
Hình 4.17: Mẫu lipid thu đƣợc từ sinh khối Y. lipolytica
Trƣớc khi phân tích, lipid sẽ đƣợc xử lý để loại bỏ các sáp và gum. Các sáp và gum sẽ đƣợc loại trừ dựa trên phƣơng pháp kết tủa trong acetone lạnh. Kết quả tính toán cho thấy rằng thành phần chất béo thô thu đƣợc bao gồm: 51.45 % wt. các chất béo phân cực, 42.85 % wt. là các chất béo trung tính và 5.80 % wt. sáp. Kết quả phân tích lipid trích ly từ sinh khối của Y. lipolytica sinh trƣởng trong cám gạo thủy phân, glucose và chất béo công nghiệp cũng cho thấy các lipid phân cực chiếm hơn 50% lƣợng lipid thu đƣợc (Papanikolaou et al., 2002; Rupcic et al., 1996; Tsigie et al., 2012) .
Chất béo trung tính đƣợc phân tích sắc ký khí để xác định thành phần. Kết quả đƣợc trình bày trong Hình 4.18 và Bảng 4.1. Đồ thị sắc ký GC cho thấy 82.53% chất béo trung tính là các acid béo ở dạng tự do (FFA), 8.09% là các monoglyceride (MAG), 2.1% diglyceride (DAG), 1.9% triglyceride (TAG) và các thành phần khác (5.32%). Lƣợng FFA trong lipid có thể khác tùy theo từng chủng nấm men và môi trƣờng nuôi cấy khác nhau. Trong các nghiên cứu về Y. lipolytica của mình, Papanikolaou và các cộng sự đã báo cáo rằng sự sinh trƣởng của nấm men này trong các chất nền kỵ nƣớc có thể thu đƣợc 30-40% FFA (Papanikolaou et al., 2002). Nguyên nhân thu đƣợc hàm lƣợng FFA cao trong các chất nền ƣa nƣớc (82.53% trong nghiên cứu này) vẫn chƣa đƣợc rõ.
Hình 4.18: Sắc ký đồ của lipid đã loại wax và gum từ Y. lipolytica đƣợc nuôi cấy trong môi trƣờng bã mía thủy phân.
FFA: acid béo tự do; MG: monoglyceride; DG: diglyceride; TG: triglyceride.
FI D re spon se Retention time
Bảng 4.1: Thành phần cơ bản của lipid đã loại wax và gum trích ly từ nấm men
Yarrowia lipolytica Po1g đƣợc nuôi cấy trong môi trƣờng bã mía thủy phân.
Thành phần % khối lƣợng Acid béo tự do 82.53 ± 0.99 Monoglycerides 8.09 ± 0.58 Di glycerides 2.10 ± 0.27 Tri glycerides 1.90 ± 0.50 Thành phần khác 5.32 ± 1.05
Cấu trúc mạch carbon cấu tạo nên các acid béo tự do cũng nhƣ các glyceride cũng đƣợc phân tích bằng sắc ký khí. Kết quả phân tích đƣợc trình bày thông qua sắc ký đồ (Hình 4.19).
Hình 4.19: Sắc ký đồ thể hiện thành phần acid béo cấu trúc nên chất béo trích ly từ nấm men Y. lipolytica đƣợc nuôi cấy trong môi trƣờng bã mía thủy phân.
FI D re spon se Retention time
Bảng 4.2: Thành phần mạch carbon cấu trúc nên chất béo của nấm men. Thành phần % khối lƣợng Acid Palmitic C16:0 26.94 ± 0.86 Acid Palmitoleic C16:1 9.88 ± 0.22 Acid Stearic C18:0 10.83 ± 0.24 Acid Oleic C18:1 35.54 ± 0.15 Acid Arachidic C20:0 9.54 ± 0.64 Acid Eicosenoic C20:1 4.87 ± 0.39 Thành phần khác 2.40 ± 0.23
Số liệu đƣợc tính toán và trình bày trong Bảng 4.2 cho thấy thành phần cơ bản trong chất béo từ sinh khối Y. lipolytica chủ yếu là acid oleic (C18:1) và acid palmitic (C16:0) với hàm lƣợng tƣơng ứng là 35.54% và 26.94%. Tiếp theo là acid stearic (10.83%); palmitoleic acid (9.88%); arachidic acid (9.54%); eicosenoic acid (4.87%) và một số thành phần khác chƣa đƣợc xác định. Với thành phần mạch carbon phân bố từ C16 đến C20 và trên 97% các acid béo thành phần là bão hòa hoặc không bão hòa đơn, có thể kết luận rằng nguồn chất béo trung tính thu đƣợc từ sinh khối Y. lipolytica là một trong những nguồn chất béo lý tƣởng cho công nghiệp sản xuất biodiesel.