c. Nhận xét đối với sinh viên tham gia thực hiện đề tài:
2.2.4Cô lập các chất từ phân đoạn SA02
SKLM của phân đoạn SA02 cho thấy có vết chính màu vàng. Tiếp tục tiến hành sắc kí cột trên phân đoạn SA02 với hệ dung môi giải ly tăng dần độ phân cực từ Chloroform 100% đến MeOH 100%.
Thông số cột:
Đường kính trong cột: d = 2,9 cm Chiều dài cột: l = 65 cm
Khối lượng silica gel nhồi cột: 50 g Khối lượng mẫu: 2,67 g
Tốc độ dòng: 5 ml/phút Hứng bằng erlen 50 ml
Hệ dung môi giải ly C : M = (100 : 0 )
Dung dịch giải ly được chứa trong các lọ có dung tích 50 ml và được kiểm tra bằng sắc ký lớp mỏng, hiện màu bằng dung dịch H2SO4 10% trong cồn tuyệt đối và hơ nóng trên bếp điện. Các lọ cho kết quả sắc ký lớp mỏng giống nhau (về màu và Rf ) được gom thành một phân đoạn. Kết quả sắc kí cột phân đoạn SA02 được trình bày trong Bảng 2.2
GVHD: NGÔ QUỐC LUÂN SVTH: NGUYỄN CÔNG TẠO-23-
Bảng 2.2 Kết quả sắt ký cột phân đoạn SA02
Hệ dung môi Số lọ Tách phân
đoạn Kết quả SKLM Khối lượng C : M = 100 : 0 1 - 6 SA021 Nhiều vết mờ 0,051 g
C : M = 90 : 10 7 - 21 SA022 Vết chính màu vàng 0,521 g
C : M = 80 : 20 22 - 35 SA023 Vết màu vàng, kéo dài 0,318 g C : M = 70 : 30 35 - 47 SA024 Nhiều vết, kéo dài 0,285 g C : M = 50 : 50 47 - 56 SA025 Nhiều vết mờ 0,237 g C : M = 0 : 100 57 - 64 SA026 Vết mờ, kéo dài 0,735 g
Tổng 2,147 g
Sau khi cô loại dung môi, ở phân đoạn SA022, từ lọ 7 - 21, xuất hiện kết tinh màu vàng , tiến hành rút dung dịch riêng và rửa kết tinh nhiều lần trong MeOH, thu được chất kết tinh màu vàng . Tiến hành kiểm tra hợp chất thu được sau khi kết tinh lại bằng SKLM, hiện hình bằng dung dịch H2SO4 10% trong cồn tuyệt đối và hơ nóng trên bếp điện. Kết quả thu được là trên bản mỏng chỉ xuất hiện một vết vàng duy nhất đặt tên chất thu được là CGSA01, khối lượng 302,8 mg.