2. NHỮNG HỢP CHẤT ĐƢỢC PHÂN LẬP TỪ CÂY ĐỦNG ĐỈNH
2.5.1.5. Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất saponin
Saponin là một glycosid phân bố khá rộng trong thực vật, có một số tính chất đặc trƣng: khi hoà vào nƣớc sẽ có tác dụng làm giảm sức căng bề mặt của dung dịch và tạo nhiều bọt. Saponin thƣờng ở dạng vô định hình, có vị đắng, khó tinh chế, có điểm nóng chảy cao.
Xác định sự hiện diện của saponin bằng cách tạo bọt
Lấy khoảng 2 gam bột cây, lắc mạnh với 10 ml nƣớc, dấu hiệu đầu tiên chứng tỏ sự hiện diện của saponin là xuất hiện bọt bền vững.
Nhận xét: xuất hiện bọt bền vững trong 30 phút. Kết luận: Bột nguyên liệu có chứa saponin.
Xác định sơ bộ sự hiện diện của saponin steroid và saponin triterpen
Lấy khoảng 0,5 g bột, thêm vào 5 ml nƣớc cất. Hỗn hợp đƣợc đun nóng trong ống nghiệm đến sôi trên bếp cách thuỷ, làm lạnh và lọc lấy nƣớc. Để xác định sự có mặt của saponin chúng tôi lấy hai ống nghiệm. Trong ống 1, thêm 5 ml dung dịch HCl 0,1N (PH = 1). Ống nghiệm 2, thêm vào 5 ml dung dịch NaOH 0,1N (PH = 13). Trong cả hai ống nghiệm thêm vào 2-3 giọt mẫu thử và lắc thật mạnh trong 1 phút.
Nếu nhƣ trong cả hai ống nghiệm, bọt tạo thành bằng nhau về cả kích thƣớc, số lƣợng và sự bền vững của cột bọt thì nguyên liệu có chứa saponon triterpen. Nếu nhƣ ở PH = 13, bọt nhiều hơn một vài lần về số lƣợng hay sự bền vững thì nguyên liệu có chứa saponin steroid.
Thuốc thử Liebermann-Burchard
Thực hành: Hoà tan mẫu bằng 1 ml anhydric acetic, thêm từ từ 0,3-0,5 ml H2SO4 đậm đặc thấy xuất hiện mặt phân cách giữa 2 dung dịch trong ống nghiệm:
Nếu có màu hồng đến đỏ hoặc tím thì nhận định sơ bộ có saponin triterpen. Nếu có màu xanh lá cây thì nhận định sơ bộ có saponin steroid.