Từ các mẫu đất và nước thu được tại các khu vực khác nhau tại vườn hoa Sơn Đồng, sau 2 lần làm giàu liên tiếp (5 ngày/lần) trên môi trường MGB lắc ở 30C, 160rpm, dịch làm giàu được cấy trải trên môi trường thạch MGB thạch bổ sung các loại cơ chất khác nhau với các nồng độ tương ứng 1,2- DCE nồng độ 5mM, 2,2-DCPS nồng độ 20mM và cơ chất 3,4-DCA nồng độ 50mg/l.
Sau thời gian từ 3 đến 5 ngày nuôi cấy trên môi trường MGB có bổ sung cơ chất khác nhau chúng tôi đã thu được kết quả như trình bày ở bảng 4, 5, 6. Kết quả nghiên cứu cho thấy cho thấy chúng tôi không phân lập được chủng vi nấm nào mọc trên môi trường chọn lọc, vì thế chúng tôi lựa chọn đối tượng là các chủng vi khuẩn trong các nghiên cứu tiếp theo. Định hướng sử dụng vi khuẩn trong phương pháp sinh học cho việc phân giải hợp chất Halogen cũng là hướng nghiên cứu chủ yếu trong các công trình công bố trước đây [6].
Bảng 4. Đặc điểm các khuẩn lạc trên môi trường MGB có bổ sung cơ chất 3,4- DCA
STT Kí hiệu Hình dạng khuẩn lạc Màu sắc Đƣờng kính (mm)
Mẫu nước 8 chủng
1 NA1 Tròn, bóng, có tâm ở giữa Trắng ngà 1,0-1,5 mm 2 NA2 Dẹt, khô, có tâm ở giữa Vàng nhạt Không xác định
3 NA3 To, bóng Vàng nhạt Không xác định
4 NA4 Tròn, bóng, dẹt, rìa KL nhăn nheo
Trắng ngà 2,0 mm
5 NA5 Tròn dẹt Trắng ngà 1,5 mm
6 NA6 Tròn, bóng, lồi, KL rất bé Trắng trong
7 NA7 Bóng, dẹt, rìa phẳng Trắng ngà Không xác định 8 NA8 Khuẩn lạc rất bé, lồi Vàng nhạt
1 DA1 Tròn, to, dẹt, bóng Trắng trong 3,0 mm 2 DA2 Dẹt, bóng, rìa khuẩn lạc có
rãnh
Trắng trong Không xác định
3 DA3 Tròn, dẹt, bé Trắng sữa 0,3 mm
4 DA4 To, dẹt, bóng Trắng trong Không xác định 5 DA5 Bé, dẹt, khô Trắng trong Không xác định 6 DA6 Tròn, dẹt, khô, nhẵn Trắng đục 1,0 mm
7 DA7 Tròn, lồi, bóng, bề mặt nhẵn, có tâm
Trắng sữa 0,3 mm
8 DA8 Tròn, lồi, bóng Cam nhạt 0,5 mm
9 DA9 Tròn, dẹt, bóng Trắng sữa 0,8 mm
Trên môi trường MGB có bổ sung cơ chất 3,4-DCA chúng tôi đã phân lập được 17 loại khuẩn lạc khác nhau trong đó có 9 chủng từ mẫu đất và 8 chủng từ mẫu nước. Các khuẩn lạc hầu hết có hình tròn, màu trắng sữa, có một vài khuẩn lạc màu cam đến vàng nhạt, nhìn chung đường kính khuẩn lạc dao động từ 0,3 đến 3,0mm. Một số khuẩn lạc không xác định được đường kính do có hình tia hoặc chia thùy.
Hình 6. Ảnh khuẩn lạc trên môi trường MGB cơ chất 3,4-DCA
Bảng 5. Đặc điểm các khuẩn lạc trên môi trường MGB có bổ sung cơ chất 2,2- DCPS
STT Kí hiệu Hình dạng khuẩn lạc Màu sắc Đƣờng kính (mm)
Mẫu nước 3 chủng
1 NP1 Tròn, bé, lồi, bề mặt khô Trắng sữa 0,5 mm 2 NP2 Tròn, lồi, bóng Trắng sữa 1,0-1,5 mm
3 NP3 Rất bé, bóng Trắng trong
Mẫu đất 7 chủng
1 DP1 Tròn, lồi, bóng Trắng sữa 1,5 mm
2 DP2 Tròn, lồi, bề mặt khô, tâm ở giữa Trắng sữa 1,2-1,5 mm 3 DP3 Tròn, lồi, bé, bóng Trắng ngà 0,5 mm 4 DP4 Tròn, nhỏ, bóng Trắng trong 0,3 mm 5 DP5 Tròn, dẹt, bóng Trắng sữa 1,0-1,3 mm 6 DP6 Rất bé, lồi, bóng Trắng trong 7 DP7 Tròn, bé, lồi, bóng Trắng sữa 0,2-0,4 mm Trên môi trường MGB có bổ sung cơ chất 2,2-DCPS chúng tôi đã chọn được 10 loại khuẩn lạc khác nhau đó có 7 chủng phân lập từ mẫu đất và 3 chủng phân lập từ mẫu nước. Hầu hết các khuẩn lạc có hình tròn, màu trắng sữa đến trắng ngà, đường kính khuẩn lạc nhỏ từ 0,2 đến 1,5mm.
Bảng 6. Đặc điểm khuẩn lạc trên môi trường MGB bổ sung cơ chất 1,2-DCE
STT Kí hiệu Hình dạng khuẩn lạc Màu sắc Đƣờng kính (mm)
Mẫu nước 9 chủng
1 NE1 Tròn, to, dẹt, bóng, có tâm ở giữa
Trắng sữa 3,0 mm
2 NE2 To, lồi, bóng, rìa răng cưa. Trắng sữa Không xác định 3 NE3 To, dẹt, bóng. Trắng ngà Không xác định. 4 NE4 Tròn, lồi, bóng Trắng trong 1,0 mm
5 NE5 Dẹt, khô, có tâm ở giữa Trắng ngà Không xác định 6 NE6 Tròn, bé, lồi, bóng. Trắng sữa 0,5 mm
7 NE7 Tròn, rất bé, lồi, khô. Trắng sữa 0,2-0,3 mm 8 NE8 Rất bé, khô, có tâm ở giữa
9 NE9 Dẹt, khô Trắng đục Không xác định.
Mẫu đất 5 chủng
1 DE1 Tròn, bóng, nhầy. Vàng nhạt 1,5 mm
2 DE2 To, dẹt, rìa răng cưa. Trắng ngà Không xác định 3 DE3 Tròn, to, lồi, bóng Trắng ngà 3,0 mm
4 DE4 Rất bé, lồi, khô Trắng trong Không xác định 5 DE5 Trònm, bóng, lồi Trắng sữa 2,0 mm
Tương tự, 14 chủng chúng tôi phân lập được từ môi trường MGB có bổ sung cơ chất 1,2-DCE như trình này ở bảng trên cho thấy phần lớn các khuẩn lạc bóng, dẹt, có nhiều khuẩn lạc kích thước ko xác định.
Hình 8. Ảnh khuẩn lạc trên môi trường MGB có bổ sung cơ chất 1,2-DCE
Như vậy, từ các mẫu đất và nước thải thu được từ Sơn Đồng, huyện Hoài Đức, Hà Nội chúng tôi đã phân lập được tổng số 41 chủng vi sinh vật trên môi trường chọn lọc MGB thạch có bổ sung 3 loại cơ chất khác nhau. Số lượng chủng phân lập trên mỗi cơ chất được tóm tắt ở bảng 7.
Bảng 7. Số lượng các chủng vi sinh vật phân lập được
Cơ chất Môi trƣờng thạch MGB
Mẫu nƣớc Mẫu đất
3,4-DCA 8 chủng 9 chủng
2,2-DCP 3 chủng 7 chủng
1,2-DCE 9 chủng 5 chủng