Hiện nay, phương pháp sử dụng hóa chất gây ñột biến là một trong những phương pháp mang lại hiệu quả cao trong công tác chọn tạo giống mới. Các hợp chất thường ñược sử dụng như colchicine, EMS (Ethymethane Sulfonate), NMU (Nitrozo Methyl Ure)… Trong ñó, colchicine là chất hay ñược sử dụng nhất ñể tạo thể ña bội. Ở dạng dung dịch, Colchicine có khả năng khuếch tán mạnh vào các mô thực vật ñang phân chia mạnh, gây cản trở sự hình thành thoi vô sắc ở kỳ giữa và ngăn chặn một cách hiệu quả quá trình phân bào diễn ra ở kỳ sau. Các nhiễm sắc thể ñã ñược nhân lên nhưng không thể trượt ñược về hai cực của tế bào và kết quả là tạo ra thểña bội.
Hiệu quả của colchicine cũng phụ thuộc vào nhiều yếu tố như nồng ñộ và thời gian xử lý. Ngoài ra, sau khi xử lý, các dạng biến dịñược tạo ra phải ñược duy trì, theo dõi và ñánh giá tính ổn ñịnh di truyền của chúng.
Sau thời gian thực hành các thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng của việc xử lý colchicine ñến cây cẩm chướng gấm (Dianthus chinensis) in vitro, chúng tôi ñã thu nhận ñược một số các kết quả dưới ñây:
3.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của việc xử lý colchicine in vitro ñến khả năng sống và sinh trưởng của cây cẩm chướng gấm và sinh trưởng của cây cẩm chướng gấm
Tác dụng của colchicine có tính chất chọn lọc ñối với các tế bào ñang phân chia và ñối với mỗi tế bào ở trong mô phản ứng khác nhau ñối với colchicine như một ñơn vịñộc lập. Vì vậy, khi xử lý colchicine phải tạo ñiều kiện thuận lợi cho các tế bào phân chia mạnh nhất mới thu ñược hiệu quả cao (Franzke and Ros, 1957; Trần Thế Tục, 1973; Trần Duy Quý, 1997).
Khi xử lý colchicine lên các ñối tượng cây trồng khác nhau, người ta nhận thấy colchicine có khả năng gây ña bội hóa ngay cả ở nồng ñộ thấp (0,006%). Tuy nhiên nồng ñộ thường ñược sử dụng cho mục ñích này là từ 0,05% - 5% (Dermen, 1938; Burnham, 1962; Trần Thế Tục, 1973; Trần Duy Quý, 1997).
Trong thí nghiệm này, ñể xác ñịnh sự ảnh hưởng của việc xử lý colchicine ñến khả năng sống và sinh trưởng của cây cảm chướng gấm (Dianthus chinensis),
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 30 chúng tôi tiến hành xử lý ñoạn thân có mang mắt ngủ của cây cẩm chướng với colchicine ở các nồng ñộ 0,00%; 0,05%; 0,10%; 0,15%; 0,20% với thời gian khác nhau 24h, 36h, 48h. Sau khi xử lý mẫu, cấy chuyển mẫu vào môi trường nhân nhanh và theo dõi, ño ñếm các chỉ tiêu sau 2 lần theo dõi (3 tuần, 6 tuần sau cấy chuyển). Kết quả thu ñược cho bởi bảng sau:
Bảng 3.1. Ảnh hưởng của việc xử lý colchicine in vitro ñến khả năng sống và tạo chồi của mẫu cấy