Quy trình bào chế liposome AMB như sau:
Cân và phân tán AMB trong 15 ml methanol (hỗn dịch 1).
Cân và hòa tan DSPG trong 15 ml methanol:chloroform tỉ lệ 1:1 đã được chỉnh pH 1 bằng HCl 2,5N trong methanol (dung dịch 2).
Cân và hòa tan HSPC, cholesterol trong 10 ml methanol:chloroform tỉ lệ 1:1 (dung dịch 3).
Phối hợp hỗn dịch 1 và dung dịch 2, khuấy để thu được dung dịch đồng nhất. Sau đó phối hợp thêm dung dịch 3 vào dung dịch đã thu được ở trên.
Cân 3g bi thủy tinh cho vào bình cầu dung tích 1000 ml của hệ thống cất quay. Chuyển dung dịch lipid vào bình cầu. Tiến hành cất quay ở điều kiện nhiệt độ 41oC, tốc độ quay 150 vòng/phút. Hệ thống cất quay được hút chân không, điều chỉnh áp suất để dung môi bay hơi từ từ. Sau 30 phút hút chân không, dung môi bay hơi hết và màng film được hình thành thì giảm tốc độ quay xuống 100 vòng/phút. Tiếp tục cất quay thêm 15 tiếng nữa để đảm bảo loại hết hoàn toàn dung môi hữu cơ.
Tiến hành hydrat hóa màng film bằng dung dịch hydrat hóa thích. Quá trình hydrat hóa được tiến hành ở điều kiện nhiệt độ 41oC, tốc độ quay 250 vòng/phút trong 15 phút để đảm bảo màng film đã được hydrat hóa hoàn toàn. Hỗn dịch liposome thu được đem làm nhỏ kích thước tiểu phân bằng các phương pháp được mô tả ở mục 2.3.3.
Liposome AMB thu được đóng trong lọ thủy tinh, đậy kín, bọc giấy bạc và bảo quản ở nhiệt độ 2 – 80C.
Quy trình bào chế được trình bày trong sơ đồ sau:
Hình 2.1. Sơ đồ quy trình bào chế liposome AMB bằng phương pháp hydrat hóa màng film. DSPG / (MeOH+CHCl3) 15ml (tỉ lệ 1:1) Phân tán AMB/MeOH 15ml HCl 2,5M
Dung dịch đã acid hóa pH = 1,0 Tạo phức DSPG với AMB Phối hợp (HSPC+Cholesterol)(MeOH+CHCl3) (10ml tỉ lệ 1:1) Cất quay trong bình đáy tròn Bi thủy tinh (3g) Điều nhiệt 41oC Tốc độ quay 150 vòng/phút, sau 30 phút giảm còn 100 vòng/phút Thời gian 15h Hydrat hóa
Dung dịch Hydrat hóa: Glucose, đệm Citrat, phosphate, Succinat, … Điều nhiệt 410C Tốc độ quay 250 vòng/phút Thời gian 15 phút Sản phẩm: Liposome thô
Làm nhỏ KTTP Đùn ép, siêu âm, đồng nhất hóa...
Tá dược đông khô
Đông khô
Bảo quản Lớp film mỏng