1. ĐẶT VẤN ĐỀ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.
3.1.1Địa điểm và thời gian
Địa điểm thí nghiệm: tại phòng thí nghiệm nhà lưới Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, khoa Nông Nghiệp và SHƯD, Đại học Cần Thơ.
Địa điểm điều tra và thu mẫu: các khu vực canh tác cây có múi tại vùng ĐBSCL như: Hậu Giang và Tp. Cần Thơ.
Thời gian thực hiện: từ tháng 1/2013 đến tháng 10/2013. 3.1.2 Vật liệu thí nghiệm
Vật liệu thí nghiệm: bọc nilon đựng mẫu, chậu nhựa, vải vol, bông gòn, nước cất tạo độ ẩm, giấy thấm…..
Cây giống cam sành, cam mật, quýt đường, chanh giấy, hạnh….. Phương tiện quan sát: kính phóng đại, kính hiển vi, đèn.
Thước đo và máy chụp hình để đo và ghi nhận kích thước của ấu trùng và thành trùng trong từng gian đoạn.
Lồng lưới hình trụ (0,6m x 1,2m), có cửa (8cm x 15cm) bằng vải vol và dây kẻm cứng dùng để nhân nuôi và chủng nhiễm.
3.1.3 Nguồn sâu cuốn lá trên cây có múi
Trên các vườn cam quýt tại Cảng Cái Cui, Hậu Giang, các lá nhiễm sâu cuốn lá sẽ các cho vào bọc nilon và mang về phòng thí nghiệm nhà lưới, Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, khoa Nông Nghiệp và SHƯD, Đại học Cần Thơ.
Tại phòng thí nghiệm các lá bị nhiễm được nhân nuôi và tạo nguồn bằng cách đặt các lá nhiễm trong các hộp nhựa (8x20x20cm) có nắp đậy đã đục lỗ. Hộp nhựa được lót một lớp giấy thấm để giữ độ ẩm thích hợp cho sâu hóa nhộng. Nuôi ấu trùng bằng đọt non cây có múi được thu ở các vườn hoặc
lá non thu từ các cây cam quýt trong nhà lưới đến khi ấu trùng hóa nhộng. Thu nhộng cho vào hộp nhựa nhỏ hơn (mỗi con một hộp, ghi lại ngày thu) và theo dõi đến khi vũ hóa thì bắt đầu cho bắt cặp (cho con đực và cái vào chung một bọc nilon được chuẩn bị sẵn lá non và bông gòn tẩm nước) để chúng đẻ trứng.
Hình 3.1 Bố trí thí nghiệm khảo sát đặc điểm hình thái, sinh học và triệu chứng gây hại
của loài Archips atrolucens
(A) Nhộng được đưa vào hộp nhựa nhỏ theo dõi
(B) Cặp thành trùng đực cái được đưa vào bọc nilong cho bắt cặp
3.2 PHƯƠNG PHÁP
3.2.1 Khảo sát thành phần loài và diễn biến mật số quần thể của nhóm sâu cuốn lá cam quýt tại Tp Cần Thơ và tỉnh Hậu Giang sâu cuốn lá cam quýt tại Tp Cần Thơ và tỉnh Hậu Giang
Mục tiêu: Xác định được những loài sâu cuốn lá đang gây hại trên cây cam quýt tại Tp. Cần Thơ và tỉnh Hậu Giang, đánh giá được mức độ gây hại của từng loài nhằm tạo cở sở cho những nghiên cứu về sau.
Địa điểm: Thí nghiệm được thực hiện trên 5 vườn. Trong đó có 01 vườn tại TP Cần Thơ và 04 vườn tại tỉnh Hậu Giang, được trình bày trong Bảng 3.1
Thời gian: Thí ngiệm được thực hiện trong vòng 8 tháng, từ tháng 01 đến tháng 8 năm 2013.
Bảng 3.1. Các vườn cây có múi được dùng để khảo sát mức độ phong phú của các loài sâu cuốn lá cam quýt.
TT Vườn Diện tích (m2)
Tuổi cây
(năm) Địa điểm
1 Cam sành 3.500 6 - 7 Phường Tân Phú, quận Cái Răng, thành phố Cần Thơ
2 Cam sành 8.500 5 - 7 Xã Đông Thành, huyện Châu Thành, tỉnh Hậu Giang
3 Cam sành +
Nhãn 2.500 4 - 6
Xã Đông Phú, huyện Châu Thành, tỉnh Hậu Giang
4 Cam sành 5.500 5 - 7 Xã Đông Thành, huyện Châu Thành, tỉnh Hậu Giang
5 Cam sành +
Cam mật 5.000 5
Xã Đông Thành, huyện Châu Thành, tỉnh Hậu Giang
Cách tiến hành: trên mỗi vườn được chọn dùng dây đánh dấu 15 cây theo 5 điểm đường chéo góc, mỗi điểm chọn 3 cây. Thu toàn bộ các chồi và lá đang bị sâu cuốn lá gây hại trên cây. Mỗi tháng thu mẫu sâu một lần. Chồi và lá bị sâu gây hại được đem về phòng thí nghiệm để nuôi cho đến khi thành trùng vũ hóa.
Chỉ tiêu ghi nhận: Số lượng ấu trùng ở mỗi đợt thu thập, tỷ lệ thành trùng vũ hóa của mỗi loài.
3.2.2 Khảo sát một số đặc điểm hình thái, sinh học của Archips atrolucens (Lepidoptera: Tortricidae) gây hại trên cam quýt
Mục tiêu: Hiểu rõ đặc điểm hình thái, sinh học, thời gian phát sinh, phát
triển cách gây hại của sâu Archips atrolucens nhằm đề ra được biện pháp quản
lí, phòng trị hiệu quả trong điều kiện ngoài đồng.
Địa điểm: Thí nghiệm được thực hiện tại nhà lưới bộ môn Bảo vệ thực vật, khoa Nông nghiệp và Sinh học ứng dụng, trường Đại học Cần Thơ.
Cách tiến hành
Đọt non cây cam quýt có nhiễm ấu trùng của sâu cuốn lá được thu thập từ các vườn cây cam quýt ở Tp. Cần Thơ và tỉnh Hậu Giang. Trong phòng thí
nghiệm, ấu trùng của Archips atrolucens được tách ra nuôi riêng trong các hộp
nhựa trong (14 x 8 cm), 12 – 14 ấu trùng/hộp. Thức ăn là các đọt cam sành và cam mật tươi (một đầu được bọc bông gòn thấm nước để ẩm) và được thay mới hai ngày một lần (2 ngày/lần). Khi ấu trùng hóa nhộng, mỗi nhộng được tách ra nuôi riêng trong một hộp nuôi sâu nhỏ (2,5 x 2 cm). Thành trùng vũ hóa từ nguồn nhộng này sẽ được sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo.
Cách tiến hành khảo sát từ giai đoạn vũ hóa đến trứng
Thành trùng mới vũ hóa của Archips atrolucens được cho bắt cặp trong
một bịch nilon (dung tích 1,5 kg) bên trong có treo một đọt cam sành dài khoảng 15 cm và một mẫu bông gòn tẩm nước đường 10% để làm thức ăn cho bướm. Sau khi thành trùng cái đẻ trứng, cặp thành trùng sẽ được chuyển sang một bọc nilon có treo một đọt cam sành mới mỗi ngày. Trứng được đẻ trên bọc nilon cũ được chuyển vào hộp nuôi sâu nhỏ có nắp đậy (mỗi ổ trứng/hộp), bên trong có đặt một mẫu bông gòn nhỏ thấm nước để giữ ẩm. Quan sát trứng trong hộp khi thấy trứng có đốm màu đen thì thêm vào hộp một đọt non khoảng 3 cm để chuẩn bị thức ăn cho ấu trùng. Theo dõi và ghi nhận thời gian từ khi thành trùng vũ hóa đến khi thành trùng cái đẻ trứng, số lượng trứng được đẻ, kích thước của trứng, tỷ lệ trứng nở và thời gian sống của thành trùng.
Sự khảo được tiến hành trên 12 cặp thành trùng (một con đực và một con
cái) của Archips atrolucens, tương ứng với 12 lần lặp lại.
Cách tiến hành khảo sát từ giai đoạn ấu trùng và nhộng
Ấu trùng mới nở của Archips atrolucens tách ra từng con nuôi riêng từng
hộp (2,5 x 2 cm) và thêm vào hộp một đọt non khoảng 3 cm thức ăn cho ấu trùng. Theo dõi và ghi nhận thời gian các giai đoạn ấu trùng, tiền nhộng, nhộng và tuổi thọ thành trùng, đo kích thước ấu trùng, mảnh vỏ đầu, ghi nhận thời gian phát triển các giai đoạn ấu trùng. Nhộng, đo kích thước, ghi nhận thời gian giai đoạn nhộng và tuổi thọ của thành trùng. Đo kích thước chiều dài sải cánh của thành trùng đực và cái.
Chỉ tiêu ghi nhận
Khảo sát mô tả các đặc điểm hình thái sinh học của sâu Archips atrolucens ở từng giai đoạn phát triển:
Trứng: màu sắc, hình dạng, kích thước, tỷ lệ trứng nở và thời gian ủ trứng trong phòng thí nghiệm.
Ấu trùng: màu sắc ở mỗi tuổi, thời gian kéo dài từng tuổi và sự khác biệt ở các tuổi.
Nhộng: màu sắc, hình dạng, kích thước nhộng, tỷ lệ hóa nhộng thành công, thời gian ấu trùng chuyển sang giai đoạn tiền nhộng, thời gian kéo dài của giai đoạn tiền nhộng và nhộng.
Thành trùng: ghi nhận hình dạng, kích thước, màu sắc, sự khác biệt giữa thành trùng đực và thành trùng cái, tỷ lệ đực/cái, tuổi thọ của thành trùng trong điều kiện phòng thí nghiệm.
3.2.3 Khảo sát triệu chứng các loài sâu cuốn lá trên cây cam sành trong điều kiện nhà lưới điều kiện nhà lưới
Mục tiêu: Xác định được triệu chứng gây hại của từng loài sâu cuốn lá nhằm xác định đúng loài, thời gian gây hại để có biện pháp phòng trị hợp lí và hiệu quả cho từng loài.
Địa điểm: Thí nghiệm được thực hiện tại nhà lưới bộ môn Bảo vệ thực vật, khoa Nông nghiệp và Sinh học ứng dụng, trường Đại học Cần Thơ.
Thời gian: Thí nghiệm được thực hiện trong vòng 1 tháng. Từ tháng 2 đến tháng 3 năm 2013.
Thí nghiệm được thực hiện với 5 lần lặp lại. Mỗi lần lặp lại là một chậu cam sành cao khoảng 1,2 – 1,3 m đang ra đọt non được thả một cặp trưởng thành (một con đực và một con cái) vừa mới vũ hóa của một loài ấu trùng cuốn lá.
Cách tiến hành: Cây cam sành được mua từ một vườn ươm ở xã Mỹ Hòa, huyện Bình Minh, tỉnh Vĩnh Long rồi đem về trồng trong chậu đặt trong nhà lưới. Cây được chăm sóc và bón phân (NPK 16-16-8) để kích thích ra đọt non. Khi cây ra đọt non khoảng 3 cm (khoảng 1 tháng sau khi trồng trong nhà
lưới) thì chậu cây được bao lại bằng trong, thả một cặp thành trùng của một loài sâu cuốn lá cây cam quýt vào rồi đậy bên trên lại bằng vải mùng (Hình 3.2). Ghi nhận triệu chứng gây hại của từng loài sâu cuốn lá cây cam quýt.
Hình 3.2 Bố trí thí nghiệm khảo sát triệu chứng gây hại của ấu trùng cuốn lá.
3.3 XỬ LÝ SỐ LIỆU
Số liệu thí nghiệm sẽ được xử lý bằng phần mềm MSTATC, Microsoft Excel 2003 dưới dạng biểu đồ.
CHƯƠNG 4
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1 KHẢO SÁT THÀNH PHẦN LOÀI VÀ DIỄN BIẾN MẬT SỐ QUẦN THỂ CỦA NHÓM SÂU CUỐN LÁ CAM QUÝT TẠI TP QUẦN THỂ CỦA NHÓM SÂU CUỐN LÁ CAM QUÝT TẠI TP CẦN THƠ VÀ TỈNH HẬU GIANG
Kết quả điều tra thành phần và diễn biến mật số quần thể của nhóm sâu cuốn lá cam quýt tại Tp Cần Thơ và tỉnh Hậu Giang trong 8 tháng từ tháng 01 năm 2013 đến tháng 08 năm 2013 được trình bày trong bảng 4.1. cho thấy:
Bảng 4.1. Mức độ phong phú của các loài sâu cuốn lá cam quýt năm 2013 Số lượng thành trùng vũ hóa (con/ đợt) Đợt Số ấu trùng (con) Tỷ lệ vũ hóa (%) Archips atrolucens Adoxophyes privatana Homona tabescens Agonopterix sp. Psorosticha. melanocrepida 19/ 01 251 95,62 75 96 40 21 8 19/ 02 211 93,84 66 37 35 32 27 19/ 03 236 91,95 170 12 17 18 0 19/ 04 179 96,09 134 15 17 6 0 19/ 05 172 88,95 74 35 7 29 8 19/ 06 140 92,14 68 20 16 22 3 19/ 07 153 84,97 72 23 24 11 0 19/ 08 149 93,96 69 35 22 14 0 Tần suất (%) 100 100 100 100 50 Tổng 1491 - 728 273 178 153 46 Tỷ lệ (%) 92,19 52,83 19,81 12,92 11,10 3,34
* Được định danh bởi Trường Đại học Nông nghiệp và Công nghệ Tokyo và Đại học Osaka (Nhật Bản).
Kết quả trình bày ở Bảng 4.1 cho thấy thành phần loài sâu cuốn lá cam
quýt gồm 5 loài, trong đó 3 loài thuộc họ Tortricidae là Archips atrolucens, A. privatana và H. tabescens; hai loài thuộc họ Oecophoridae là Agonopterix sp. và P. melanocrepida (Hình 4.1).
Hình 4.1. Thành trùng của các loài sâu cuốn lá cam quýt.
(A) thành trùng Archips atrolucens đực; (B) thành trùng Archips atrolucens cái (C) thành trùng Agonopterix sp. cái; (D) thành trùng Agonopterix sp. đực. (E) thành trùng Homona tabescens cái; (F) thành trùng Homona tabescens đực. (G) thành trùng Psorosticha melanocrepida đực; (H) Psorosticha melanocrepida cái (I) thành trùng Adoxophyes privatana đực; (J) thành trùng Adoxophyes privatana cái.
Qua 8 đợt khảo sát cả 4 loài Archips atrolucens, A. privatana, H. tabescens và Agonopterix sp. có tần suất xuất hiện (tính trên số đợt khảo sát) là 100%, trong khi tần suất xuất hiện của loài P. melanocrepida chỉ là 50%. Ở khía cạnh khác, loài Archips atrolucens có tỷ lệ trưởng thành vũ hóa cao nhất đạt 52,83%, theo sau là A. privatana đạt 19,81%, H. tabescens đạt 12,92%, Agonopterix sp. đạt 11,10% và P. melanocrepida đạt 3,4% (Bảng 4.1). Điều
này chứng tỏ, các loài thuộc họ Tortricidae có mức độ phong phú cao hơn (chiếm tỷ lệ vũ hóa 85,56%) so với các loài thuộc họ Oecophoridae (chiếm tỷ lệ vũ hóa 14,44%).
Kết quả ghi nhận về thành phần loài là tương tự như ghi nhận của Hồ Như Thủy (2012). Khảo sát của Hồ Như Thủy (2012), được thực hiện trong năm 2011. Như vậy, cho đến cuối năm 2012, thành phần loài sâu cuốn lá cam quýt ở thành phố Cần Thơ và tỉnh Hậu Giang chỉ gồm 5 loài (Bảng 4.1). Mặc dù, số liệu ghi nhận về mức độ phong phú là trên tỷ lệ vũ hóa do không phân
F E ♀ ♂ ♀ ♂ ♀ G H I J ♂ ♀ ♀ ♂ ♂ A B C D
biệt được các loài ở giai đoạn ấu trùng. Tuy nhiên, tỷ lệ ấu trùng đến vũ hóa thu thập là 92,19%, nên ảnh hưởng của số lượng ấu trùng bị chết (7,81%) đối với kết quả ghi nhận là có thể chấp nhận được.
4.2 KHẢO SÁT MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI, SINH HỌC CỦA
ARCHIPS ATROLUCENS (LEPIDOPTERA: TORTRICIDAE) GÂY HẠI
TRÊN CAM QUÝT
4.2.1 Đặc điểm về hình thái và thời gian phát triển
Kích thước các giai đoạn phát triển từ trứng đến thành trùng của sâu xếp
lá Archips atrolucens (Lepidoptera: Tortricidae) được trình bày trong Bảng
4.2.
Bảng 4.2. Kích thước của Archips atrolucens ở các giai đoạn phát triển trong phòng thí
nghiệm (T0C = 28–30,20C; RH0 = 75,2–83%). Kích thước (mm) Giai đoạn Số quan sát Dài (dọc) Rộng (ngang) Trứng 50 0,64 ± 0,12 0,49 ± 0,1 Ấu Trùng - Tuổi 1 30 1,71±0,33 0,18±0,04 - Tuổi 2 30 3,22±0,53 0,38±0,08 - Tuổi 3 30 6,26±0,79 0,62±0,07 - Tuổi 4 30 9,86±0,84 1,23±0,14 - Tuổi 5 30 14,42±1,49 1,93±0,35 Vỏ Đầu - Vỏ đầu tuổi 2 30 0,35±0,04 0,26±0,17 - Vỏ đầu tuổi 3 30 0,53±0,06 0,58±0,07 - Vỏ đầu tuổi 4 30 0,86±0,12 0,92±0,12 - Vỏ đầu tuổi 5 30 1,30±0,13 1,74±0,41 Nhộng 30 9,18±1,25 2,13±0,35 Thành trùng đực 20
- Thân 6,73±0,79 2,17±0,24 - Cánh trước 15,65±1,5 2,04±0,36 - Cánh sau 15,14±0,52 2,43±0,39 Thành trùng cái 20 - Thân 9,60±1,39 3,20±0,28 - Cánh trước 20,35±2,28 3,52± 0,41 - Cánh sau 20,14±1,9 4,65±0,47
Bảng 4.3. Thời gian phát triển của sâu xếp lá Archips atrolucens (Lepidoptera:
Tortricidae) trong điều kiện phòng thí nghiệm
(T0C = 28–30,20C; RH0 = 75,2–83%).
Giai đoạn Số quan sát Thời gian trung bình (ngày) ± SE
Thời gian biến động (ngày) Trứng 50 3,43±0,05 3–4 Ấu Trùng -Tuổi 1 30 1,87±0,02 2–3 -Tuổi 2 30 3,67±0,07 3–4 -Tuổi 3 30 4,50±0,09 4–5 -Tuổi 4 30 4,23±0,07 3–5 -Tuổi 5 30 4,07±0,08 3–5 Tiền nhộng 30 1,00±0,00 1 Nhộng 30 7,87±0,07 7–8 Thành trùng – trứng 12 2,08±0,08 2-3 Thành trùng 30 6,97±0,08 6–8 Vòng đời 33,87±2,34 31-36 * Trứng:
Trứng hình bầu dục dẹp, nhẵn, được đẻ thành từng ổ, trên bề mặt ổ trứng có phủ một lớp màng mỏng trong suốt giúp cho ổ trứng không bị thấm nước. Khi mới đẻ trứng có màu vàng nhạt, sắp nở chuyển sang màu vàng sẫm có thể nhìn thấy phần đầu màu đen của ấu trùng sắp nở (Hình 4.2). Trứng có chiều dài trung bình là 0,64 mm, chiều rộng trung bình là 0,49 mm (Bảng 4.2). Thời
gian ủ trứng trung bình là 3,43 ngày (Bảng 4.3).
Hình 4.2. Ổ trứng của sâu xếp lá Archips atrolucens
(A) Ổ trứng mới đẻ; (B) Trứng hình thành đốm đen; (C) Trứng sắp nở
* Ấu trùng:
Kết quả ghi nhận cho thấy giai đoạn ấu trùng sâu xếp lá cam quýt
Archips atrolucens gồm 5 tuổi. Ở các độ tuổi ấu trùng của Archips atrolucens
đều có 13 đốt thân (3 đốt ngực và 10 đốt bụng), 3 đôi chân ngực và 5 đôi chân bụng. Bốn đôi chân bụng phía trước nằm ở các đốt bụng thứ 3, thứ 4, thứ 5 và thứ 6, còn đôi chân bụng sau cùng nằm ở đốt bụng thứ 10.
- Ấu trùng tuổi 1: rất linh động cơ thể có màu vàng nhạt khi mới nở, chuyển sang màu vàng sẫm hơn khi sắp lột xác để bước sang tuổi 2. Trên cơ thể sâu lúc này có nhiều lông cảm giác phân bố dọc theo cơ thể (Hình 4.3). Chiều dài và rộng trung bình của ấu trùng tuổi 1 vừa mới nở lần lượt là 1,71 mm và 0,18 mm (Bảng 4.2). Thời gian phát triển của ấu trùng tuổi 1 kéo dài trong 1,87 ngày (Bảng 4.3).
Hình 4.3. Ấu trùng tuổi 1 của sâu xếp lá Archips atrolucens
- Ấu trùng tuổi 2: sâu tuổi 2 có cơ thể màu vàng nhạt, lúc mới lột vỏ đầu
có màu trắng trong suốt, sau 1 ngày vỏ đầu chuyển sang màu nâu đen bóng, đây là đặc điểm giúp phân biệt giữa ấu trùng tuổi 2 và tuổi 1. Các lông cảm giác trên cơ thể sâu dài hơn và kích thước của ấu trùng cũng gia tăng gấp đôi so với ấu trùng tuổi 1 (Hình 4.4). Ấu trùng có chiều dài trung bình đo được là 3,92 mm, chiều rộng trung bình là 0,38 mm (Bảng 4.2). Thời gian phát triển ấu trùng kéo dài 3,67 ngày (Bảng 4.3). Ở cuối tuổi 2, trên cơ thể ấu trùng chuyển sang màu trắng trong, trên bề mặt cơ thể xuất hiện các đốm nhạt màu, ít di chuyển.
Hình 4.4. Ấu trùng tuổi 2 của sâu xếp lá Archips atrolucens