CHƯƠNG 5: PHÂN TÍCH CARBONHYDRATE 5.1 Xử lý mẫu thử
5.2.Phương pháp Lane Eynon
5.2.1. Nguyên tắc
Cho một lượng dư đường khử trong mẫu tác dụng với thuốc thử Feling. Lượng thuốc thử dư được xác định bằng một dung dịch đường khử tiêu chuẩn với chỉ thị metyl xanh. Từ đó định lượng được đường khử trong mẫu.
5.2.2. Tiến hành
a. Chuẩn bị mẫu
Tương tự như chuẩn bị mẫu rau quả. Có thể dùng dung dịch mẫu rau quả đã chuẩn bị như trên để tiến hành định lượng
b. Chuẩn độ
v Làm mẫu trắng:
Cho 10ml Feling A, 10ml Feling B, 20ml nước cất vào bình tam giác, đun sôi dung dịch trong bình tam giác 1 phút, cho thêm 3 – 5 giọt metyl xanh, luôn tay lắc bình
tam giác, đồng thời đun sôi. Chuẩn độ nóng dung dịch trong bình tam giác bằng dung dịch đường khử 1% cho đến khi mất màu xanh thì dừng lại. Ghi thể tích dung dịch đường khử 1% tiêu tốn. (V)
v Làm mẫu chính
Dùng pipet cho Vdd ml dung dịch mẫu vào bình tam giác 250ml, thêm 10ml Feling A, 10ml Feling B, 10ml nước cất. Đun sôi 1 phút, cho thêm 3 – 5 giọt metyl xanh, luôn tay lắc bình tam giác, đồng thời đun cho sôi. Tiếp tục chuẩn độ nóng dung dịch trong bình tam giác bằng dung dịch đường khử 1% cho đến khi mất màu xanh thì dừng lại. Thêm vài giọt metyl xanh, nếu màu dung dịch trong bình tam giác không đổi là phản ứng đã kết thúc. Ghi thể tích dung dịch đường khử 1% tiêu tốn. (V1)
c. Kết quả
v Đối với mẫu rắn
Hàm lượng đường khử của mẫu tính bằng % theo công thức sau:
Trong đó:
D: phần trăm đường khử trong mẫu (%)
V là thể tích dung dịch đường khử 1% tiêu tốn trong mẫu trắng, tính bằng ml. V-
1 là thể tích dung dịch đường khử 1% tiêu tốn trong mẫu chính, tính bằng ml. Vđm: thể tích bình định mức
Vdd: thể tích dung dịch thử được hút ra để thực hiện phản ứng. m là khối lượng mẫu, tính bằng gam.
v Đối với mẫu lỏng: