Sử dụng phản ứng ngưng kết nhanh trên phiến kính:
- Nguyên lý: Khi kháng nguyên gặp kháng thể tương ứng, chúng sẽ kết
hợp với nhau. Sự kết hợp đó thể hiện bằng sự tập trung vi khuẩn thành từng đám lấm tấm hay hạt lổn nhổn trên phiến kính.
- Chuẩn bị phản ứng:
+ Kháng thể ghi: Huyết thanh của gà ghi mắc bệnh (có thể dùng máu làm phản ứng nhưng hiệu quả không cao). Lấy 1ml máu ở tĩnhmạch cánh của gà cho vào ống nghiệm đã tiệt trùng, đặt nghiêng ống nghiệm, để vào tủ lạnh sau đó chắt lấy huyết thanh. Yêu cầu huyết thanh phải tươi, không bị vỡ hồng cầu và không được bảo quản ở nhiệt độ đông lạnh vì như vậy làm kháng thể bị phá hủy dẫn đến phản ứng không đặc hiệu. Gà lấy máu được đánh dấu bằng Xanhmethylen vào mào.
+ Kháng thể chuẩn do Intervet sản xuất
+ Kháng chuẩn chuẩn: M. gallisepticum do Intervet (Hà Lan) sản xuất sẵn (là kháng nguyên hữu hình).
- Tiến hành: Dùng ống hút nhỏ có định lượng sẵn, hút huyết thanh và nhỏ
1 giọt lên phiếm kính sạch đã tiệt trùng, dùng ống hút khác nhỏ tiếp 1 giọt kháng nguyên lên giọt huyết thanh. Trộn huyết thanh với kháng nguyên chuẩn đã được nhộm tím kết tinh, sau đó dàn mỏng thành một hình tròn đường kính khoảng
1,5cm nghiêng nhẹ phiếm kính để kích thích sự ngưng kết. Để yên trong 5 phút ở nhiệt độ 20 – 250C là tốt nhất, rồi đọc kết quả.
- Đọc kết quả phản ứng trong thời gian 2 phút.: Phản ứng dương tính vi
khuẩn tập trung thành từng hạt lấm tấm (xảy ra hiện tượng ngưng kết). Phản ứng âm tính thì hỗn dịch đục đều, huyết thanh gà hòa đều với kháng thể chuẩn
Mycoplasma thành một chất lỏng đồng chất.