- Mẫu huyết tương trắng: Huyết tương không chứa ST và BR, để bảo quản trong tủ lạnh sâu (-20°). Để rã đông ở nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.
- Dung dịch gốc strychnin (SST): Cân chính xác khoảng 20mg ST, hòa tan trong MeOH sau đó cho vào bình định mức 100 ml và thêm MeOH đến vạch, được dung dịch ST trong MeOH có nồng độ khoảng 0,2mg/ml, để bảo quản trong tủ lạnh sâu (-20°C). Để rã đông ở nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.
- Dung dịch gốc brucin (SBR): Cân chính xác khoảng 20mg BR, hòa tan trong MeOH sau đó cho vào bình định mức 100 ml và thêm MeOH đến vạch, được dung dịch BR trong MeOH có nồng độ khoảng 0,2mg/ml, để bảo quản trong tụ lạnh sâu (-20°C). Để rã đông ở nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.
Từ 2 dung dịch gốc này ta pha thành các dung dịch sau:
- Mẫu ST và BR chuẩn trong huyết tương có nồng độ ST và BR lần lượt là 3600ng/ml và 3600ng/ml, để bảo quản trong tủ lạnh sâu (-20°C). Để rã đông ở nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.
- Mẫu huyết tương tự tạo chứa ST và BR: Từ dung dịch huyết tương chuẩn ST và BR trên, thêm huyết tương trắng, lắc đều được các mẫu ST và BR trong huyết tương có nồng độ khoảng từ 40- 1800ng/ml (tương ứng với khoảng nồng độ ST và BR từ 1/30- 1/20 Cmaxđến 2-3 Cmax).
- Dung dịch chuẩn nội: cân chính xác khoảng 20mg chất chuẩn nội cho vào bình định mức 100ml, thêm MeOH đến vạch, lắc đều được dung dịch nồng độ 0,2mg/ml, để bảo quản trong tủ lạnh sâu (-20°C). Để rã đông ở nhiệt độ phòng trước khi sử dụng. Từ dung dịch này pha thành dung dịch chuẩn nội gốc nồng độ 45µg/ml.
- Mẫu kiểm chứng (QC): Chuẩn bị tương tự mẫu chuẩn nhưng từ dung dịch chuẩn gốc độc lập với dung dịch chuẩn gốc để pha mẫu chuẩn. Mẫu QC gồm 3 loại:
+ Mẫu LQC có nồng độ ≤ 3 lần nồng độ LLOQ.
+ Mẫu MQC có nồng độ gần điểm giữa của đường chuẩn. + Mẫu HQC có nồng độ bằng 75- 80% ULOQ.