- Hóa chất: Methanol, acetonitril, acid acetic, nước vôi trong, cloroform, amoniac đạt tiêu chuẩn DĐVN IV [8]
2.2.2.1. Đánh giá sự thay đổi hàm lượng alcaloid toàn phần trong củ loài S glabra theo tuổi và theo các mùa trong năm
S. glabra theo tuổi và theo các mùa trong năm
Các bước thực hiện
Bước 1: Lấy mẫu
- Mẫu lấy theo năm tuổi: mẫu được lấy vào tháng 3 hàng năm (mỗi mẫu lấy 2 năm liên tiếp để đánh giá độ lặp lại cụ thể là 3/2013 và 3/2014, thời gian này phù hợp với thời gian thực nghiệm của luận văn này)
Bảng 2.6: Số lượng củ Bình vôi lấy theo số năm tuổi
Số năm tuổi 1 2 3 4
Số lượng mẫu 30 củ 30 củ 30 củ 30 củ
- Mẫu lấy theo các mùa trong năm: để đánh giá hàm lượng hoạt chất tích lũy trong
củ có bị ảnh hưởng theo thời tiết. Lấy mẫu củ của cây đã trưởng thành, số lượng 30 củ/ lần. Lịch lấy mẫu dự kiến:
Bảng 2.7: Ngày lấy mẫu theo mùa trong năm
Mùa Xuân Hạ Thu Đông
(Ngày lấy mẫu)* 20-21/3 21-22/6 23-24/9 21- 22/12
(*) Các ngày được lựa chọn đại diện cho tiết trời giữa các mùa cụ thể là ngày xuân phân, thu phân, hạ chí và đông chí.
Bước 2: Xử lý mẫu: Mẫu được lấy về rửa sạch, thái lát mỏng 3- 4 mm, sấy khô đến độ ẩm khoảng 5 - 8%, đồng nhất mẫu, xay và rây qua rây 1mm. Đem chiết (mỗi mẫu lấy 6 mẫu đem tiến hành độc lập, song song với nhau)
29
Bước 3: Tiến hành định lượng: alcaloid toàn phần bằng phương pháp acid - base theo DĐVN III [7]
Tiến hành 6 mẫu độc lập, loại bỏ giá trị không phù hợp, tính giá trị trung bình, tính sai số tương đối của 6 mẫu, yêu cầu RSD (%) không lớn hơn 6,0
Theo yêu cầu của chuyên luận Bình vôi - DĐVN III: Hàm lượng alkaloid toàn phần trong dược liệu ít nhất 2,0% tính theo dược liệu khô.
Bước 4: Tập hợp số liệu báo cáo phân tích dữ liệu