Phương pháp nghiên cứu đa dạng loài nấm ký sinh côn trùng

Một phần của tài liệu Đặc điểm hình thái và sự hình thành synnema của isaria tenuipes (PECK) samson trên nhộng tằm dâu bombyx miri linnaeus luận văn tốt nghiệp đại học (Trang 35 - 36)

Địa điểm và thời gian nghiên cứu

Thu thập mẫu vật côn trùng bị nấm ký sinh được tiến hành 10 đợt chính vào thời gian 07/2007 – 10/2009, mỗi ngày tiến hành thu thập từ 4 đến 6 giờ/1 khu vực cụ thể. Mỗi đợt thu thập có từ 5 – 16 người tham gia. Tiến hành thu thập tự do theo phương châm càng nhiều điểm điều tra càng tăng thêm cơ hội bắt gặp EPF.

Thu thập mẫu vật được tiến hành tại Khe Kèm (11 lần), Khe Choang (1 lần) và Khe Mọi (2 lần) thuộc Vườn Quốc gia Pù Mát. Ngoài ra còn có một số mẫu được thu thập trong hệ sinh thái nông nghiệp.

Một vài kiểu vi sinh cảnh được tiến hành khảo sát bao gồm: (i) mặt dưới của lá cây và thân cây, (ii) tàn dư thực vật, (iii) trong đất. Khi các mẫu được phát hiện, chúng được thu thập và lưu giữ trong trong hộp nhựa.

Vật liệu nghiên cứu

Bao gồm 154 mẫu nấm Isaria (gồm 123 mẫu I.tenuipes chiếm 79.87%) thu

thập tại Vườn Quốc gia Pù Mát (bao gồm Khe Kèm, Khe Mọi, Khe Choang, Khe Bu) và một số địa điểm khác

Phương pháp nghiên cứu

Các mẫu được phân tích dưới kính hiển vi theo phương pháp Lacey và Brooks (1997). Phân lập nấm ký sinh côn trùng theo phương pháp của Goettel và Inglis (1997). Phân lập các bào tử đơn dựa theo phương pháp của Choi và cs. (1997). Cấy chuyển sang môi trường PDA (Potato Dextrose Agar) theo phương pháp của Brown và Smith (1957).

Sau khi bảo quản ở nhiệt độ 25 - 260C trong 14 ngày đặc điểm hình thái của

bào tử, sợi nấm, cấu trúc quả thể và một số đặc điểm sinh học khác được phân tích, nhận dạng các loài nấm ký sinh côn trùng theo phương pháp của Samson và cs. (1988), Kobayasi (1981, 1982), Kobayasi và Shimizu (1983), Tzean và cs. (1997), Luangsa - ard và cs. (2007) và Sung và cs. (2007).

Tần suất bắt gặp của mỗi giống loài được tính bằng công thức sau:

Tần suất bắt gặp của giống/loài A = Số lần xuất hiện của giống/loài ATổng số mẫu thu thập x 100

Một phần của tài liệu Đặc điểm hình thái và sự hình thành synnema của isaria tenuipes (PECK) samson trên nhộng tằm dâu bombyx miri linnaeus luận văn tốt nghiệp đại học (Trang 35 - 36)