3. Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI
2.2.1. Tình hình nghiên cứu trong nước
Năm 1975 - 1979 điều tra ở 10 địa điểm thuộc 10 vùng địa lý khác nhau
trong những điều kiện chăn nuôi khác nhau trên khoảng 2000 con lợn bằng cách xét nghiệm phân cho thấy tỷ lệ nhiễm giun đầu gai
(Ascaris suum) là 56%, các loài giun xoăn (Strongilata) là 3,25%. Tuổi lợn nhiễm các loại giun tròn nặng nhất là từ 2 - 4 tháng tuổi trên một tỷ lệ nhiễm chung là 49 - 65,9%. Qua mổ khám thấy các loài giun sán chính ở lợn là:
Ascaris suum, Metastrongylus enlongatus, T. suis, Oesophagostomum dentatum...(Đỗ Dương Thái, Trịnh Văn Thịnh, 1975) [24].
Theo Nguyễn Đăng Khải (1996) [8] , tỷ lệ nhiễm T. suis ở 7 vùng kinh tế như sau:
1.Trung du và miền núi bắc bộ + Trung du: 29,8% + Miền núi: 27,8% 2.Đồng bằng sông Hồng: 24,8% 3.Bắc trung bộ: 13,9% 4.Nam trung bộ + Đồng bằng: 17,5% + Miền núi: 34,7% 5.Tây Nguyên: 20,8% 6.Tây Nam Bộ: 9,4% 7.Đông Nam Bộ: 13,1%
Ở một số tỉnh phía Nam, Lương Văn Huấn và cs (1990) [6], ở các tỉnh: Quảng Bình, Quảng Trị, Thừa Thiên Huế, lợn nhiễm giun T. suis với tỷ lệ 14%; Quảng Nam, Đà Nẵng 8,75%; Quảng Ngãi, Bình Định 27,5%; Phú Yên, Khánh Hoà 8,3%; Lâm Đồng 10%; Đồng Nai 26,3%; Bình Dương, Bình Phước 10%; Tây Ninh 8,6%; thành phố Hồ Chí Minh 39,0%; Long An 11%, Tiền Giang 2%; Cần Thơ, Sóc Trăng 8,69 - 30%.
Theo Phan Địch Lân và cs (2005) [16], kết quả điều tra mổ khám ở 7 tỉnh miền Bắc và miền Trung như sau: Tỷ lệ nhiễm giun đũa từ 13 - 43 % với cường độ nhiễm trung bình từ 3,0 - 21,5 con /lợn. Tỷ lệ nhiễm giun T. suis từ
12,5 - 40,3%. Tác giả còn cho biết: Do giun T. suis lợn và loài giun tóc gây bệnh cho người có rất nhiều điểm giống nhau về mặt hình thái. Do vậy, bệnh này ở lợn có thể lây sang người, người nhiễm bệnh một cách tự nhiên do nuốt trứng giun T. suis của lợn chứa ấu trùng. Sau khi vào ruột người, ấu trùng phát triển thành giun T. suis trưởng thành, cư trú ở ruột và gây bệnh giun tóc ở người. Sau khi trứng giun T. suis được bài xuất ra ngoài qua phân người có khả năng gây nhiễm lại cho lợn (tỷ lệ trứng phát triển chỉ có 11% so với trứng của lợn có tỷ lệ phát triển là 86%).
Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2006) [12], khi nghiên cứu T. suis và các loại ký sinh trùng đường tiêu hóa lợn tại Thái Nguyên thấy: Đàn lợn nuôi ở Thái Nguyên nhiễm T. suis, Oesophagostomum sp. và Fasciolopsis buski. Trong đó, lợn bình thường nhiễm T. suis 23,01%; Oesophagostomum 20,86%;
Fasciolopsis buski 18,71%; tỷ lệ nhiễm tương ứng ở lợn tiêu chảy là 27,01 %; 23,85% và 16,95%, mức độ nhiễm T. suis ở lợn tiêu chảy lớn hơn lợn bình thường.
Giun sán ở đường tiêu hóa có vai trò rõ rệt trong hội chứng tiêu chảy ở lợn sau cai sữa. Lợn sau cai sữa tại Thái Nguyên mắc tiêu chảy là 11,81 %. Ở lợn bình thường và lợn bị tiêu chảy đều nhiễm các loại Ascaris suum,
Oesophagostomum sp., Strongyloides, Fasciolopsis buski và T. suis nhưng ở lợn tiêu chảy nhiễm tỷ lệ cao hơn và mức độ nặng hơn (theo Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2009 ) [14].
2.2.2. Tình hình nghiên cứu ở nước ngoài
Hale O. M. và Stewart T. B. (1979) [41], đã tiến hành thí nghiệm như sau: 48 lợn ở 83 ngày tuổi có khối lượng trung bình 25,7 kg /con. Căn cứ vào tính biệt và khối lượng ban đầu, số lợn này được chia thành 4 nhóm, mỗi nhóm 12 con. Mỗi nhóm lợn được gây nhiễm bằng một trong 4 mức như sau:
Nhóm 1 : 0 trứng giun T. suis /kg TT Nhóm 2 : 550 trứng giun T. suis /kg TT Nhóm 3 : 1100 trứng giun T. suis /kg TT Nhóm 4 : 1650 trứng giun T. suis /kg TT
Khẩu phần ăn và chế độ chăm sóc, nuôi dưỡng ở mỗi nhóm được thực hiện như nhau trong suốt thời gian thí nghiệm.
Trứng giun T. suis dùng để gây nhiễm được lấy từ những lợn bị bệnh
giun T. suis nặng trong tự nhiên. Những trứng này được nuôi trong dung dịch
Kali Bicromat 1% trong phòng thí nghiệm ở nhiệt độ 25oC và chỉ những trứng đã phát triển thành trứng cảm nhiễm (trứng có ấu trùng) mới được gây nhiễm cho lợn. Mỗi nhóm lợn được gây nhiễm qua đường tiêu hóa bằng một số lượng trứng như đã trình bày. Lợn thí nghiệm được theo
dõi trong vòng 77 ngày.
Kết quả thí nghiệm như sau: Khối lượng cuối cùng (khi kết thúc thí nghiệm) và tăng trọng hàng ngày của lợn gây nhiễm bị ảnh hưởng dưới tác động của giun T. suis. Mức độ bị ảnh hưởng tỷ lệ thuận với số lượng trứng
giun T. suis đã gây nhiễm ban đầu. Khi kết thúc thí nghiệm, lợn không bị nhiễm giun T. suis nặng hơn 23% và tăng trọng hàng ngày nhanh hơn 35% so với những lợn bị nhiễm trung bình 1650 trứng giun T. suis /kg thể trọng (P < 0,05).
Vào ngày thứ 21 sau gây nhiễm, khối lượng trung bình của những lợn gây nhiễm bắt đầu giảm xuống so với những lợn đối chứng (lợn nhóm 1). Kết quả này phù hợp với những nghiên cứu của Powers (1960) khi tác giả cho rằng có sự khác nhau về khối lượng giữa nhóm lợn đối chứng và nhóm lợn thí nghiệm trong 3 tuần đầu sau gây nhiễm.
Kết quả sau 77 ngày, tất cả những lợn gây nhiễm (lợn nhóm 2, 3 và 4) đều bị tiêu chảy với những mức độ khác nhau. Lợn ở nhóm 4 (gây nhiễm với
cường độ cao nhất 1650 trứng giun T. suis / kg TT) bị nặng nhất: Có 4 lợn trong nhóm 4 bị ỉa ra máu trong khi đó nhóm 3 có 2 lợn ỉa ra máu.
Cuối cùng, có sự khác nhau lớn về số lượng giun ký sinh tìm được khi mổ khám giữa các nhóm lợn được gây nhiễm. Số lượng giun biến động từ 0 - 4410 ở nhóm 2; từ 0 - 8850 ở nhóm 3 và từ 10 - 3350 ở nhóm 4. Số lượng
giun T. suis trung bình khi mổ khám ở lợn thuộc nhóm 2, nhóm 3 và nhóm 4
tương ứng là 1067, 2386, và 1532. Lợn chỉ tăng được 10,9 kg trong 77 ngày. Không tìm thấy giun T. suis khi mổ khám những lợn thuộc nhóm 1. Kết quả này phù hợp với những nghiên cứu của Hass và Collins (1973).
Johanes Kaufmann (1996) [46] cho biết: Ivermectin với liều 300 µm /kg TT cho hiệu quả tốt trong 1 - 2 tuần. Tuy nhiên, cần chú ý tới lượng sữa của lợn mẹ khi sử dụng thuốc tẩy.
Theo Bowman D. D. (1999) [39], biện pháp tẩy giun trước khi chúng trưởng thành có tác dụng phòng bệnh rất tốt. Hầu hết các tác giả đều thống nhất Phenothiazin là một trong những thuốc ức chế giun trưởng thành đẻ trứng và có tác dụng tẩy cả giun non nên được khuyến cáo dùng Mejer. H và cs (2001) [46]cho biết: Ngoài Ascaris suum thì Oesophagostomum và T. suis cũng rất phổ biến ở lợn tại Đan Mạch. Oesophagostomum và T. suis ký sinh ở ruột già (manh tràng) nhưng những tác động bệnh lý do chúng gây ra là rất đáng kể. T. suis nhiễm ở mức nặng ảnh hưởng đến tăng trọng và có thể gây chết nhiều lợn con.
Pedersen. S và cs (2001) [48] đã nghiên cứu ảnh hưởng của giun T. suis
và A. suum ký sinh đến sự thiếu sắt của cơ thể lợn. Sáu mươi hai lợn ở 10 tuần tuổi được chia làm 2 lô: Lô 1 gây nhiễm đồng thời 4500 trứng giun
T. suis và 1200 trứng giun A. suum. Lô 2: Đối chứng. Khẩu phần ăn của lợn ở 2 lô là như nhau. Kết quả cho thấy, giun T. suis và A. suum ký sinh đã làm
cho cơ thể lợn thiếu sắt, ngoài ra số lượng hồng cầu trong máu của những lợn này giảm thấp.
Helene Kringel và cs (2006) [42] đã làm thí nghiệm sau:
Lô thí nghiệm: Gây nhiễm 40 lợn với 5000 trứng giun T. suis /lợn. Lô đối chứng: 40 lợn. Số lợn của 2 nhóm được nuôi trong những điều kiện tương tự nhau và theo dõi từ tuần 1 - 11. Kết quả mổ khám lợn thí nghiệm đã thu được những giun T. suis ký sinh.
Kết quả nghiên cứu mô học cho thấy sự xuất hiện của T. suis gắn liền với những biến đổi bệnh lý đường ruột lợn. Tại niêm mạc manh tràng của những lợn bị nhiễm, số lượng bạch cầu ái toan tăng lên ở tuần thứ 5. Số lượng đại thực bào tăng đáng kể từ tuần thứ 5 - 11 sau gây nhiễm.
Jarvis Toivo và cs (2007) [43] nghiên cứu về nội ký sinh trùng lợn tại một trang trại nuôi lợn rừng ở Estonia, thấy tỷ lệ nhiễm các loài như sau:
Oesophagostomum spp. 64%, T. suis 21%, Metastrongylus sp. 7% và Eimeria spp 100%.
PHẦN 3
ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1. ĐỐI TƯỢNG VÀ VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU
3.1.1. Đối tượng nghiên cứu
- Lợn các lứa tuổi nuôi tại nông hộ, trại gia đình và tập thể ở một số xã thuộc huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang.
- Bệnh giun T. suis ở lợn.
3.1.2. Vật liệu nghiên cứu
- Mẫu phân mới thải của lợn.
- Giun T. suis đực và cái, trứng giun T. suis .
- Kính hiển vi quang học Labophot - 2 gắn máy ảnh và màn hình, buồng đếm Mc. Master, máy li tâm điện.
- Hoá chất: dung dịch muối NaCl bão hoà, dung dịch Babargallo và dụng cụ thí nghiệm khác.
- Thuốc tẩy giun T. suis cho lợn : Ziquan - mectin, Bendazol.
3.2. ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU
3.2.1. Địa điểm nghiên cứu
- Địa điểm triển khai đề tài: Đề tài được thực hiện ở các nông hộ, các trang trại chăn nuôi lợn với quy mô khác nhau ở một số xã thuộc huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang.
- Địa điểm xét nghiệm, phân tích mẫu: Phòng thí nghiệm Khoa chăn nuôi thú y - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên.
3.2.2. Thời gian nghiên cứu
3.3. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
3.3.1. Xác định loài giun và hình thái, kích thước của giun Trichocephalus spp ở huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang spp ở huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang
- Mổ khám lợn để thu thập mẫu giun tròn Trichocephalus spp.
- Định danh loài giun T. suis ký sinh ở lợn tại huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang.
- Đặc điểm sinh học của giun T. suis ở lợn.
3.3.2. Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh giun T. suis lợn ở huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang
- Tỷ lệ và cường độ nhiễm giun T. suis lợn ở các địa phương. - Tỷ lệ và cường độ nhiễm giun T. suis theo tuổi lợn.
- Tỷ lệ và cường độ nhiễm giun T. suis theo phương thức chăn nuôi. - Tỷ lệ và cường độ nhiễm giun T. suis theo tình trạng vệ sinh thú y.
3.3.3.Nghiên cứu biện pháp phòng và trị bệnh giun T. suis lợn ở huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang
- Hiệu lực của thuốc tẩy giun T. suis cho lợn trên thực địa. - Độ an toàn của thuốc tẩy giun T. suis lợn trên thực địa.
3.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.4.1. Phương pháp xác định loài giun và hình thái, kích thước của giun Trichocephalus spp. ở huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang Trichocephalus spp. ở huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang
3.4.1.1. Phương pháp xác định thành phần loài giun T. suis ký sinh ở lợn * Phương pháp mổ khám lợn * Phương pháp mổ khám lợn
Áp dụng phương pháp mổ khám phi toàn diện cơ quan tiêu hoá. Thu lượm giun T. suis trong chất chứa ruột già bằng phương pháp lắng cặn, thu lượm hết giun còn bám trên niêm mạc.
Mẫu giun T. suis thu được ở mỗi lợn đều được bảo quản ở lọ riêng. Trước hết, để chúng chết trong nước sạch, sau đó đưa vào bảo quản trong
dung dịch Barbagallo. Mỗi lọ đều có nhãn ghi số thứ tự, tuổi lợn, địa điểm, thời gian mổ khám, nơi giun ký sinh, số lượng giun ký sinh / lợn, tên người mổ khám.
* Phương pháp định danh loài giun T. suis
Định danh loài giun T. Suis theo khóa định loài của Nguyễn Thị Lê và cs (1996) [20], căn cứ vào hình thái, kích thước và cấu tạo của các loài để xác định.
3.4.1.2. Phương pháp đo kích thước của giun T. suis trưởng thành và trứng
Tiến hành đo kích thước của giun trưởng thành bằng thước (mm),đo chiều rộng phần đầu và phần thân bằng trắc vi thị kính và trứng giun T. suis trên kính hiển vi có gắn vimet thị kính.
3.4.2. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh giun T. suis lợn ở
huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang
3.4.2.1. Phương pháp điều tra công tác phòng chống bệnh ký sinh trùng nói chung, bệnh giun T. suis nói riêng cho lợn ở huyện Yên Sơn. chung, bệnh giun T. suis nói riêng cho lợn ở huyện Yên Sơn.
- Trực tiếp quan sát: chuồng trại, khu chăn nuôi, bãi chăn thả, dụng cụ chăn nuôi, thức ăn và nước uống sử dụng cho chăn nuôi có đăm bảo vệ sinh thú y hay không.
- Phỏng vấn:
+ Chuồng trại, khu chăn nuôi có được thường xuyên vệ sinh, tiêu độc khử trùng không, định kỳ mấy tuần một lần.
+ Có thu gom phân ủ không, một năm ủ bao nhiêu lần, phân ủ xong dùng làm gì.
+ Gia súc có được tẩy giun không, định kỳ bao nhiêu lần trong năm.
3.4.2.2. Quy định những yếu tố cần xác định liên quan đến tình hình nhiễm giun T. suis ở lợn
- Tuổi lợn: chia thành 4 lứa tuổi. ≤ 2 tháng
> 2 - 4 tháng > 4 - 6 tháng > 6 tháng
- Phương thức chăn nuôi: Nghiên cứu với 3 phương thức chăn nuôi + Phương thức chăn nuôi tận dụng : Hộ gia đình chăn nuôi với số lượng ít, thức ăn cho lợn chủ yếu là các phế phụ phẩm tận dụng của ngành trồng trọt (khoai, sắn, bột ngô, cám xát, rau xanh).
+ Phương thức chăn nuôi bán công nghiệp: Chăn nuôi với số lượng lớn, thức ăn cho lợn là thức ăn tổng hợp, hệ thống chuồng trại khá hiện đại, điều kiện vệ sinh thú y tốt.
+ Phương thức chăn nuôi công nghiệp: Chăn nuôi với số lượng khá lớn, thức ăn cho lợn là thức ăn hỗn hợp, hệ thống chuồng trại sạch sẽ, điều kiện vệ sinh thú y tương đối tốt.
- Tình trạng vệ sinh thú y: Nghiên cứu ở 3 tình trạng vệ sinh thú y
+ Vệ sinh thú y tốt: Chuồng trại cao ráo, thoáng mát về mùa hè, ấm áp về mùa đông, có rãnh thoát nước và phân ra khỏi chuồng. Thường xuyên dọn phân và cọ rửa, không có hiện tượng phân lưu quá một ngày trong chuồng. Thức ăn, nước uống sạch sẽ, rau xanh được rửa sạch trước khi cho lợn ăn, thường xuyên cọ rửa máng ăn, máng uống, không để tồn thức ăn, nước uống trong máng.
+ Vệ sinh thú y trung bình: Không thường xuyên cọ rửa chuồng và dọn phân, có hiện tượng phân lưu 2 - 3 ngày trong chuồng. Mỗi tuần rửa máng ăn, máng uống 1 - 2 lần, rau xanh có lúc rửa lúc không.
+ Vệ sinh thú y kém: Chuồng trại không cọ rửa và dọn phân, có hiện tượng phân lưu trong chuồng hàng tuần, máng ăn, máng uống không được cọ rửa, rau xanh không rửa trước khi ăn.
3.4.2.3. Phương pháp thu thập, xét nghiệm mẫu, thu nhận trứng giun T. suis
- Bố trí thu thập mẫu theo phương pháp phân tầng. Mỗi huyện chọn 5 xã, mỗi xã chọn 5 thôn (bản) để lấy mẫu.
Mẫu được thu thập ngẫu nhiên tại các nông hộ, trang trại chăn nuôi lợn tại huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang.
Các loại mẫu được xét nghiệm trong ngày hoặc xét nghiệm sau khi bảo quản theo quy trình bảo quản mẫu trong nghiên cứu ký sinh trùng học.
- Xét nghiệm mẫu bằng phương pháp Fulleborn.
Cách tiến hành: Lấy khoảng 5 - 10 gam phân của con vật cần xét nghiệm cho vào cốc thủy tinh. Cho nước muối bão hòa vào cốc với lượng thể tích gấp 10 lần khối lượng phân. Dùng đũa thủy tinh khuấy nát phân và lọc qua lưới lọc bỏ phần cặn bã, dung dịch lọc được đổ vào các lọ nhỏ cho đầy đến miệng. Đậy phiến kính lên trên ống cho tiếp xúc với mặt nước, để khoảng 15 phút rồi lấy phiến kính ra soi dưới kính hiển vi tìm trứng giun.
- Thu thập trứng bằng phương pháp Darling.
Cách tiến hành: Lấy khoảng 5 - 10 gam phân của con vật cần xét nghiệm cho vào cốc thủy tinh, cho một lượng nước sạch gấp 10 lần thể tích khối lượng phân vào rồi dùng đũa thủy tinh khuấy đều và lọc qua lưới lọc.