Phổ hấp thụ phân tử được dùng rộng rãi trong các phép phân tích định tính và định lượng. Để nhận biết các hợp chất, nhất là các hợp chất hữu cơ thì phổ hồng ngoại IR có ý nghĩa đặc biệt vì chúng có chứa một lượng lớn các pic hẹp, đặc trưng cho chất, mỗi hợp chất hữu cơ lại có một cấu trúc phổ tinh vi. Ngược lại phổ hấp thụ trong vùng khả kiến và tử ngoại thường gồm các dải phổ bị dãn rộng, điều này làm che mất các cấu trúc tinh vi của chúng nên không thích hợp để nhận biết nhưng lại có giá trị quan trọng để phân tích định lượng.
Ngoài ra những nghiên cứu quang phổ trong vùng này thường cho thông báo định tính bổ ích về sự có mặt hay không có mặt của một số nhóm chức trong các hợp chất hữu cơ ( như nhóm cacbonyl; vòng thơm ; nhóm nitro hay liên kết đôi liên hợp…). Một ứng dụng quan trọng khác của phổ hấp thụ phân tử là phát hiện hỗn hợp hấp thụ mạnh trong môi trường không hấp thụ, nếu hệ số hấp thụ trong cực đại hấp thụ đủ lớn thì dễ dàng thiết lập sự có mặt những lượng vết nhiễm bẩn. Hình 2.9 và 2.10 cho thấy phổ hấp thụ của một số chất.
Hình 2.9. Một số phổ hấp thụ tử ngoại
Hình 2.10. Phổ hồng ngoại của anđehyt CH3 CH2CH2CHO
1- Các dao động hóa trị của liên kết C- H của nhóm metyl; 2- Các dao động hóa trị của liên kết C- H của nhóm anđehyt; 3- Các dao động hóa trị của liên kết
C=O; 4- Các dao động biến dạng của liên kết C- H của nhóm anđehyt.
Dưới đây chúng ta chủ yếu đề cập đến phương pháp phân tích định lượng cho các máy so màu quang điện hay máy UV-VIS, còn gọi là các phương pháp trắc quang phân tử hay đo quang. Còn các phương pháp phổ hồng ngoại IR sẽ có chuyên đề riêng.
Để phân tích định lượng trắc quang phân tử, có hai phương pháp hay được sử dụng là phương pháp đường chuẩn; phương pháp thêm chuẩn; ngoài ra còn có phương pháp vi sai. Tuy nhiên trước khi thực hiện các phương pháp này, người phân tích phải tìm được các điều kiện tối ưu cho sự làm việc của máy đo, xác định bước sóng cực đại λmax và khoảng tuyến tính của nồng độ.