Chuẩn bị giống gốc Streptomyces 15.2.9 được phân lập, nguyên gốc. Xác định đặc điểm hình thái và sắc tố hoà tan:
- MT xác định: ISP1, ISP2, ISP3, ISP4 đã được hấp tiệt trùng đổ vào hộp Petri, mỗi MT làm 4 đĩa, cấy vạch bào tử của Streptomyces 15.2.9 lên bề mặt thạch, ủ ở 30°c, tiến hành quan sát sau khi nuôi cấy 7, 14, 21 ngày.
+ Màu của bề mặt khuẩn lạc: Quan sát trực tiếp bề mặt khuẩn lạc.
+ Màu của khuẩn ty cơ chất: Quan sát mặt sau của khuẩn lạc.
+ Chuỗi bào tử và bề mặt bào tử được quan sát dưới kính hiển vi điện tử độ phóng đại cao.
- Dạng chuỗi bào tử: thẳng (R), uốn cong (RF), móc câu (RA), lò xo (S). Nếu chuỗi bào tử có nhiều đặc điểm thì ghi đầy đủ (ví dụ SRA).
- Bề mặt bào tử có dạng sau:
Phẳng nhẵn (Sm), gai (Sp), mụn cơm (Wa), tóc (Ha).
- Sắc tố hoà tan: nằm trong MT có màu đỏ, vàng, xanh lá cây, xanh da trời, nâu, tím.
Xác định sắc tố melanoid: Nuôi cấy xạ khuẩn trên M TISP6, ISP7. Phát hiện sắc tố melanoid ở ngày thứ 2, ngày thứ 4. Nếu có ký hiệu là (1), nếu không ký hiệu là (0).
-$■ Khả năng tiêu thụ nguồn cacbonhydrat: Nuôi cấy chủng xạ khuẩn sau chọn lọc ngẫu nhiên trên MT ISP9 và các MT D*ISP9. Đánh giá ở ngày thứ 10, 16, dùng mẫu xạ khuẩn phát triển trên MT D*ISP9 chứa đường glucose làm chứng dương và mẫu xạ khuẩn phát triển trên MT ISP9 làm chứng âm. Nếu mẫu phát triển mạnh hơn đáng kể chứng dương thì đánh dấu (++), nếu mẫu phát triển tương đương chứng dương thì đánh dấu (+), nếu mẫu phát triển yếu hơn đáng kể so vói chứng dương nhưng phát triển mạnh hơn chứng âm thì đánh dấu (±), nếu mẫu phát triển yếu hơn hoặc bằng chứng âm thì đánh dấu (-).
2.3. KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT
2.3.1. Phổ tác dụng của kháng sinh do Streptomyces 15.2.9 sinh tổng hợp
Phổ tác dụng của kháng sinh do Streptomyces 15.2.9 gốc sinh tổng hợp được giới thiệu ở bảng 3.
Bảng 3: Kết quả thử tác dụng của kháng sinh do Streptomyces 15.2.9 gốc sinh tổng hợp với các vỉ khuẩn kiểm định
Vi khuẩn Gram(+) D(mm) Vi khuẩn Gram(-) D(mm) Bc 14,00 Ec 12,34 Bp 13,62 Pro 19,90 Bs 11,58 Pseu 13,62 SI 14,14 Shi 19,92 Sta 10,42 Ơ VpĩP 14,58
Nhận xét: Kháng sinh do xạ khuẩn Streptomyces 15.2.9 tạo ra có phổ tác dụng rộng trên cả vi khuẩn Gram (+) và vi khuẩn Gram (-) nhưng tác dụng trên vi khuẩn Gram (-) mạnh hơn hẳn. Chọn 2 loại vi khuẩn kiểm định đại diện có độ nhạy cảm thích hợp với kháng sinh sinh tổng hợp là Bs và Ec.