Trong quá trình kiểm tra ELISA trên cây bí xanh, bí ngô, dưa chuột, dưa bở mới chỉ phát hiện được các potyvirrus gây bệnh trên cây bầu bí, chưa phát hiện được các begomovirrus gây bệnh trên cây bầu bí tại Hòa Bình năm 2014 và vụ xuân 2015.
Tại miền Bắc Việt Nam, đã có ít nhất 1 begomovirus được phát hiện thấy trên cây bầu bí là Squash leaf curl china virus (SqLCCNV) (Revill et al., 2003). Mục tiêu của nghiên cứu này là phát hiện begomovirus bằng PCR dùng mồi đặc hiệu cho begomovirus (cặp mồi BegoAFor1/BegoARev1) trên các mẫu cây bầu bí biểu hiện triệu chứng bệnh virus tại Hòa Bình. Kết quả được thể hiện trong Bảng 3.9 (hình 3.11)
Bảng 3.9. Phát hiện begomovirus bằng PCR trên cây bầu bí tại Hòa Bình TT Cây trồng Mẫu Triệu chứng Phản ứng PCR 1 Bí xanh M1 Khảm - M2 Khảm vàng - 2 Bí đỏ M3 Khảm vàng - M4 Khảm - M5 Khảm vàng - M6 Khảm cuốn (biến dạng) - 3 Dưa chuột M7 Khảm cuốn (biến dạng) - M8 Khảm vàng - M9 Khảm - 4 Dưa bở M10 Khảm vàng -
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 52
Hình 3.11. Kết quả PCR phát hiện begomovirus
(Cặp mồi BegoAFor1 & BegoARev1) trên 10 mẫu bầu bí thu tại Hòa Bình năm 2014 (thứ tự mẫu trình bày ở Bảng 3.9). M là thang DNA (Genruler 1 Kb, hãng Fermentas) với băng tham khảo 1 kb được chỉ bằng mũi tên. +ve là đối chứng dương (plasmid mang cấu trúc xâm nhiễm của 1 begomovirus là Tomato leaf curl Hainan virus)
Kết quả PCR cho thấy tất cả 10 mẫu bầu bí biểu hiện các triệu chứng bệnh virus đều có phản ứng PCR âm tính với cặp mồi đặc hiệu begomovirus. Như
vậy, các virus gây hại trên bầu bí tại Hòa Bình đều là các potyvirus và CMV, chưa phát hiện được begomovirus.
Từ kết quả chạy ELISA, PCR chúng tôi đã xác định thành phần virus gây hại trên cây bầu bí tại Hòa Bình năm 2014-2015, gồm 3 loài virus gây hại là PRSV, CMV, ZYMV. Trong 3 loài virus xác định được trên cây họ bầu bí tại Hòa Bình thì PRSV là loài gây hại phổ biến chiếm 50,75%, tiếp đến là CMV chiếm 22,39%, ZYMV chiếm 1,49% số mẫu kiểm tra. Virus CMV xuất hiện trên tất cả các cây họ bầu bí điều tra, virus ZYMV mới ghi nhận được trên cây dưa bở, PRSV chưa thất xuất hiện trên cây dưa bở tại Hòa Bình.