Phương pháp quang phổ đạo hàm, phổ đạo hàm tỷ đối, Fourier, wavelet và HPLC được sử dụng trong đề tài này. Đề tài được tiến hành qua các bước sau:
2.2.1. Xây dựng phương pháp định lượng đồng thời cefoperazon và sulbactam bằng các phương pháp giao điểm 0 và phương pháp tỷ đối lấy HPLC làm phương pháp đối chiếu
Các phương pháp giao điểm 0:
- Lựa chọn bước sóng định lượng thích hợp dựa vào các giao điểm 0
- Lựa chọn khoảng nồng độ có sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và các giá trị PĐH, Fourier và wavelet của PHT
- Lựa chọn hệ số làm trơn và số lần làm trơn
- Lựa chọn số chia nồng độ với phương pháp PĐHTĐ - Kiểm tra độ lặp lại của phương pháp
- Kiểm tra độ đúng của phương pháp Phương pháp tỷ đối
- Lựa chọn bước sóng định lượng thích hợp dựa vào sự trùng lặp của phổ tỷ đối các dãy dung dịch đơn chất và hỗn hợp.
- Lựa chọn khoảng nồng độ có sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và các giá trị PĐH, Fourier, wavelet của PTĐ
- Lựa chọn hệ số làm trơn và số lần làm trơn - Lựa chọn số chia nồng độ với phương pháp - Kiểm tra độ lặp lại của phương pháp
Phương pháp HPLC
- Lựa chọn điều kiện sắc ký: pH và nồng độ đệm, tỉ lệ dung môi pha động, tốc độ dòng, bước sóng phát hiện theo tài liệu tham khảo [29].
- Thẩm định phương pháp:
Xác định khoảng tuyến tính giữa diện tích pic và nồng độ chất phân tích Xác định độ lặp lại của phương pháp
Xác định độ đúng của phương pháp
2.2.2. Ứng dụng các phương pháp quang phổ đã nêu và HPLC để định lượng đồng thời cefoperazon và sulbactam trong chế phẩm
Tiến hành định lượng đồng thời cefoperazon và sulbactam trong cùng một mẫu bằng các phương pháp:
- Quang phổ UV-Vis: Phổ đạo hàm, phổ đạo hàm tỷ đối, Fourier và wavelet - HPLC