3 giống hoa.
Ánh sáng có tác dụng mạnh mẽ lên sự phát triển hình thái của mô nuôi cấy in vitro. Sự phát sinh hình thái của mô nuôi cấy phụ thuộc nhiều vào cường ựộ chiếu sáng và thành phần quang phổ của ánh sáng.
Nhân nhanh là giai ựoạn tăng nhanh số lượng cây giống trong nuôi cây mô. Giai ựoạn này cần phải ựạt ựược các yêu cầu:
- Tạo ựược hệ số nhân giống cao nhất (thời gian nuôi cấy ngắn, ựạt số lượng chồi nhiều).
- Các chồi tạo ra phải ựồng nhất, có sức sinh trưởng tốt, khi tạo thành cây hoàn chỉnh (có rễ) ựem trồng có tỷ lệ sống cao, cây phát triển mạnh, khả năng dị dạng thấp.
- Hiệu quả kinh tế cao (tiết kiệm ựược tối ựa nguyên liệu, sử sụng môi trường ựơn giản, hóa chất rẻ tiền dễ kiếm).
Ở giai ựoạn nhân nhanh việc xác ựịnh ựược môi trường nuôi cấy và ựiều kiện ngoại cảnh thắch hợp có ý nghĩa quyết ựịnh ựến hiệu quả của quá trình nhân nhanh. Trong ựó phổ ánh sáng là một nhân tố tác ựộng mạnh mẽ ựến sinh trưởng của cây in vitro.
3.1.1. Nghiên cứu sự ảnh hưởng của một số hệ thống chiếu sáng ựến khả năng nhân nhanh giống cây salem
Trong quy trình nhân giống cây trồng in vitro, ựể có ựược hệ số giống cao, số lượng giống cây lớn, ựồng nhất, cây có sức dinh trưởng tốt thì việc xác ựịnh ựược môi trường nhân nhanh thắch hợp có vai trò quyết ựịnh. Tuy nhiên, các ựiều kiện ngoại cảnh thắch hợp cũng có ý nghĩa quyết ựịnh ựến hiệu quả của quá trình nhân nhanh ựặc biệt là ựối với những loài cây hoa. Trong ựó hệ thống chiếu sáng là một nhân tố tác ựộng mạnh mẽ ựến sinh trưởng của cây in vitro.
* Ảnh hưởng của một số hệ thống chiếu sáng ựến khả năng nhân nhanh giống cây salem nuôi cấy trong bình trụ có nút không thoáng khắ
Hệ số nhân chồi cao nhất là ở công thức ựèn HQNN T8-36W R/B với 13,23 chồi/mẫu, sau ựó là, ựèn đC là 10,52 chồi/ mẫu, ựèn HQNN T8-36W DELUX với 10,25 chồi/ mẫu, LED là 9,52 chồi/ mẫu.
Về chỉ tiêu chiều cao trung bình của cây: chiều cao cây cao nhất là ở công thức ựèn LED với chiều cao là 56,55 mm, sau ựó là công thức ựèn đC là 50,75 mm, ựèn HQNN T8-36W DELUX là 50,09 mm, thấp nhất là ựèn HQNN T8-36W R/B là 48,25 mm.
Số lượng lá trung bình trên 1 mẫu: Số lượng lá trung bình cao nhất ở công thức ựèn HQNN T8-36W DELUX là 87,55 lá/mẫu, LED là 84,93 lá/mẫu, công thức HQNN T8-36W R/B ựèn là 78,18 lá/mẫu, ựèn ựối chứng có số lá thấp nhất 74,73 lá/mẫu.
Diện tắch là trung bình của 1 mẫu: cao nhất là ựối với công thức ựèn HQNN T8-36W R/B với 28,46 cm2/cụm chồi, sau ựó là công thức ựèn LED với 27,53 cm2/cụm chồi, công thức đC là 21,44 cm2/cụm chồi, diện tắch lá trung bình thấp là công thức ựèn HQNN T8-36W DELUX (18,56 cm2/cụm chồi).
Khối lượng khô và khối lượng tươi cao nhất ở công thức ựèn HQNN T8-36W R/B. Chỉ số SPAD cao nhất là ở công thức ựèn HQNN T8-36W R/B là 14,34 (tăng 12,47% so với công thức ựối chứng), công thức ựèn HQNN T8-36W DELUX là 13,92 (tăng 9.18% so với công thức ựối chứng), công thức ựèn đC có chỉ số 12,75, công thức LED là 11,26 (giảm 11,69% so với công thức ựối chứng).
Nhìn chung, với công thức nhân nhanh cây salem ở bình hình trụ nút nilon không thoáng khắ cũng chokết quả hệ số nhân chồi cao nhất ở công thức ựèn HQNN T8-36W R/B. Ngoại trừ chỉ số về số lượng lá ra thì tất cả các chỉ tiêu theo dõi còn lại ựều ưu thế ở công thức ựèn HQNN T8-36W R/B.
Bảng 3.1: Ảnh hưởng của một số hệ thống chiếu sáng ựến khả năng nhân nhanh giống cây salem nuôi cấy trong bình trụ có nút không thoáng khắ
(sau 4 tuần theo dõi)
Loại ựèn Chiều cao chồi (mm) Số lá (lá/ mẫu) Số lượng chồi (chồi/mẫu) Diện tắch lá (cm2/mẫu) Khối lượng tươi (mg/ mẫu) Khối lượng khô (mg/mẫu) Chỉ số SPAD đC 50,75 74,73 10,52 21,44 3845,20 154,04 12,75 LED 56,55 84,93 8,66 27,53 3704,15 133,97 11,26 HQNN T8- 36W R/B 48,25 78,18 12,8 28,46 3986,00 156,5 14,34 HQNN T8- 36W DELUX 50,9 87,55 10,25 18,56 3478,79 115,04 13,92 CV% 2,1 3,1 1,9 1,7 2,1 1,1 2,3 LSD5% 0,11 0,22 0,18 0,31 0,37 0,26 0,08 LED HQNN T8-36W DELUX đC HQNN T8-36W R/B
Hình 3.1. Chồi in vitro salem ựược nuôi trong bình trụ có nút nilon không thoáng khắ ựặt dưới các hệ thống chiếu sáng khác nhau trong giai ựoạn
* Ảnh hưởng của một số hệ thống chiếu sáng ựến khả năng nhân nhanh giống cây salem nuôi cấy trong bình trụ có nút thoáng khắ
Kết quả nuôi cấy giống salem trong bình hình trụ nút nilon thoáng khắ, kết quả sau 4 tuần theo dõi ựược ghi trong bảng 4.2 cho thấy:
Hệ số nhân chồi cao nhất là ở công thức ựèn HQNN T8-36W R/B với 12,8
chồi/ mẫu, sau ựó là ựèn HQNN T8-36W DELUX với 12,42 chồi/mẫu, ựèn đC là 11,73 chồi/mẫu, LED là 8,66 chồi/mẫu.
Về chỉ tiêu chiều cao trung bình của cây: chiều cao cây cao nhất là ở công thức ựèn LED với chiều cao là 52,76 mm, sau ựó là công thức ựèn đC là 48,33 mm, ựèn HQNN T8-36W DELUX là 46,29 mm, ựèn HQNN T8-36W R/B là 44,14mm.
Số lượng lá trung bình trên 1 mẫu: Số lượng lá trung bình cao nhất ở công thức HQNN T8-36W DELUX là 103,41 lá/cụm chồi, sau ựó là công thức ựèn HQNN T8-36W R/B là 98,22 lá/cụm chồi, công thức ựèn ựối chứng là 97,18 lá/mẫu, thấp nhất là ở công thức ựèn LED là 88,8 lá/cụm chồi.
Diện tắch lá trung bình của 1 cụm chồi: cao nhất là ựối với công thức ựèn HQNN T8-36W R/B với 26,61cm2/cụm chồi, sau ựó là công thức ựèn đC với 22,59
cm2/cụm chồi, công thức HQNN T8-36W DELUX là 21,06 cm2/cụm chồi, diện tắch lá trung bình thấp là công thức ựèn LED (20,05 cm2/cụm chồi).
Khối lượng khô và khối lượng tươi cao nhất ở công thức ựèn HQNN T8- 36W R/B.
Chỉ số SPAD cao nhất là ở công thức ựèn HQNN T8-36W R/B là 13,08 (tăng 18,9% so với công thức ựối chứng), công thức ựèn HQNN T8-36W DELUX là 12,80 (tăng 16,45% so với công thức ựối chứng), công thức LED là 11,43 (tăng 3,91% so với công thức ựối chứng), thấp nhất là công thức ựèn ựối chứng có chỉ số 11,00.
Bảng 3.2: Ảnh hưởng của một số hệ thống chiếu sáng ựến khả năng nhân nhanh giống cây salem nuôi cấy trong bình trụ có nút thoáng khắ (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
(sau 4 tuần theo dõi)
Loại ựèn Chiều cao chồi (mm) Số lá (lá/ mẫu) Số lượng chồi (chồi/ mẫu) Diện tắch lá (cm2/ mẫu) Khối lượng toàn cây tươi (mg/mẫu) Khối lượng toàn cây khô (mg/mẫu) Chỉ số SPAD đC 48,33 97,18 11,73 22,59 3726,33 209,38 11 LED 52,76 88,80 9,52 20,05 3339,69 203,70 11,43 HQNN T8- 36W R/B 44,14 98,22 13,23 26,61 3936,17 225,25 13,08 HQNN T8- 36W DELUX 46,29 103,41 12,42 21,06 3392,33 149,97 12,80 CV% 2,2 1,3 6,0 3,7 1,2 1,6 1,7 LSD5% 1,97 2,30 1,3 1,55 7,42 6,09 0,17 LED HQNN T8- 36W DELUX HQNN T8-36W R/B đC
Hình 3.2. Chồi in vitro salem ựược nuôi trong bình trụ có nút nilon thoáng khắ ựặt dưới các hệ thống chiếu sáng khác nhau trong giai ựoạn nhân
nhanh (sau 3 tuần)
Qua các kết quả thu ựược ta thấy rằng cây salem trong giai ựoạn nhân nhanh loại hình bình hình trụ nút thoáng khắ nhân chồi tốt ở công thức ựèn HQNN T8- 36W R/B, trị số về số lượng lá trung bình nổi trội ở công thức ựèn HQNN T8-36W DELUX (103,41 lá/cây). Chiều cao cây trung bình cao nhất ở công thức ựèn LED
(52,76 mm) do dưới tác dụng của nguồn sáng ựỏ ựơn sắc tác ựộng nên thân cây làm tăng chiều dài chồi trong quá trình sinh trưởng. Các chỉ tiêu nghiên cứu còn lại về diện tắch lá, khối lượng tươi, khối lượng khô thì công thức ựèn HQNN T8-36W R/B tỏ ra ưu việt nhất, ựiều này cho ta thấy khả năng tắch lũy vật chất khô của cây salem khi nghiên cứu với loại ựèn HQNN T8-36W R/B là tốt nhất. Ngoài ra, chỉ số SPAD ở công thức ựèn HQNN T8-36W R/B cao nhất cho ta thấy ựược hàm lượng diệp lục ựược tắch cao nhất khi sử dụng loại ựèn này.
* So sánh khả năng sinh trưởng của cây salem giai ựoạn nhân nhanh khi sử dụng các loại hình bình nuôi cấy
Hình 3.3 Ảnh hưởng của các hệ thống chiếu sáng ựến khả năng nhân nhanh cây salem khi sử dụng loại hình bình nút thoáng khắ và không
thoáng khắ (sau 4 tuần theo dõi)
Nhìn chung, qua 4 tuần quan sát thì tỷ lệ mẫu tạo chồi ựạt 100%, hệ số nhân chồi cao nhất là ở công thức ựèn HQNN T8-36W R/B ở cả 2 loại hình nút thoáng khắ và không thoáng khắ. Khi nuôi cấy trong loại hình bình nút thoáng khắ (13,23 chồi/mẫu) cho số lượng chồi cao hơn so với loại hình bình nút không thoáng khắ (12,8 chồi/mẫu).
Chiều cao cây tốt nhất tại công thức ựèn LED ở cả 2 công thức chứng tỏ khả năng tiếp nhận ánh sáng ựơn sắc ựỏ của loài cây này là lớn và liều lượng ánh sáng ựỏ có tác dụng làm tăng chiều dài của chồi.
Diện tắch lá của cây salem trong công thức nút không thoáng khắ (28,46
cm2/mẫu) thấp hơn so với loại hình nút thoáng khắ (26,61 cm2/mẫu). Trong ựiều kiện nuôi cấy không thoáng khắ, lượng hơi nước nhiều còn gây lên hiện tượng trương nước và thủy tinh thể mẫu cấy. điều này thể hiện tương tự khi chúng ta cân khối lượng tươi và so sánh khi sấy khô sản phẩm. Tại công thức nút không thoáng khắ thì hàm lượng nước trong cây chiếm tới 96,27% khối lượng toàn cây tươi, trong khi ựó tại công thức nút thoáng khắ thì hàm lượng nước là 94,52% khối lượng cây tươi.
Chỉ số SPAD công thức HQNN T8-36W R/B nút thoáng khắ thấp hơn so với công thức nút không thoáng khắ. Tuy nhiên, xét về mặt chênh lệch giữa các công thức ựèn thì tại công thức nút không thoáng khắ ựộ ổn ựịnh trước tác nhân ánh sáng là thấp hơn so với công thức nút thoáng khắ.
Quan sát chất lượng chồi cho thấy: Tại công thức chiếu sáng của ựèn LED chồi thường yếu, lá nhỏ, có xuất hiện nhiều màu trắng trên lá, mép lá ở phắa ựuôi lá có màu tắa. Công thức ựèn HQNN T8-36W R/B cho thấy chất lượng cây tốt nhất, lá cây dày và có màu xanh phân bố ựều.
Ngoài ra, tại công thức ựèn LED còn xuất hiện mô sẹo ở vài mẫu. điều này có thể giải thắch là dưới tác dụng của phổ ánh sáng có màu xanh và cường ựộ bức xạ chiếu sáng cao của loại ựèn LED này ựã khiến cho mẫu xảy ra hiện tượng mô sẹo sản sinh. Hiện tượng này hoàn toàn phù hợp với nghiên cứu của Ammirato 1986.
Kết luận: cây hoa salem sinh trưởng tốt tại dưới phổ ánh sáng của công thức ựèn HQNN T8-36W R/B và loại hình bình có nút có màng thoáng khắ.