Bước đầu nghiên cứu tạo chế phẩm sinh học dưới dạng synbiotic để bổ sung vào thức ăn nuôi tôm thẻ chân trắng (penaeus vannamei)

i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài “Bước đầu nghiên cứu chế phẩm sinh học dạng synbiotic để bổ sung vào thức ăn nuôi tôm thẻ chân trắng (Penaeus vannamei)” cơng trình nghiên cứu tơi dựa tài liệu, số liệu trực tiếp thực hướng dẫn trực tiếp TS Hoàng Phương Hà TS Lê Thị Nhi Cơng Chính vậy, kết nghiên cứu đảm bảo trung thực khách quan Đồng thời, kết chưa xuất nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực sai tơi hồn chịu trách nhiệm Hà Nội, ngày ……tháng ……năm 2021 Học viên Nguyễn Tiến Đạt ii LỜI CẢM ƠN Trước tiên, tơi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, đồng nghiệp Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, thầy cô công tác Khoa Công nghệ sinh học - Học Viện Khoa học Công Nghệ Việt Nam hỗ trợ tơi khuyến khích liên tục suốt năm học tập qua trình nghiên cứu viết luận văn Thành tựu khơng thể có khơng có họ Tơi xin cảm ơn TS Hồng Phương Hà – Phó trưởng phịng Cơng nghệ sinh học môi trường, Viện Công nghệ Sinh học – Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, giảng viên hướng dẫn trực tiếp Cảm ơn cánh cửa đến với phịng Sinh học mơi trường rộng mở gặp phải rắc rối có câu hỏi vấn đề nghiên cứu Tiến sĩ Hà ln tận tâm, ln cho phép tự bày tỏ quan điểm đồng thời đưa nhận xét, góp ý, dẫn dắt tơi hướng suốt thời gian nghiên cứu, thực đề tài luận văn thạc sĩ Tôi xin cảm ơn TS Lê Thị Nhi Cơng - Trưởng phịng Sinh học Môi trường - Viện Công Nghệ Sinh học – Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt truyền đạt cho kiến thức chuyên ngành suốt thời gian học tập để tơi có tảng kiến thức hỗ trợ cho q trình làm luận văn thạc sĩ Tơi xin cám ơn chị em phịng thí nghiệm Cơng nghệ sinh học môi trường- Viện Công nghệ Sinh học, đặc biệt Ths Nguyễn Thị Minh chia sẻ kinh nghiệm, giúp đỡ thời gian làm thực nghiệm Phịng Cuối cùng, tơi muốn bày tỏ biết ơn sâu sắc đên thầy Đỗ Mạnh Hào – Trạm trưởng trạm nghiên cứu biển Đồ Sơn – Viện tài nguyên môi trường biển – Viện Hàn Lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam, đồng thời trưởng phịng nơi công tác, với kinh nghiệm nghiên cứu, hướng dẫn cụ thể vào tạo điều kiện cho theo học Thạc sĩ Học Viện Khoa học Công Nghệ Việt Nam Xin chân thành cảm ơn! iii MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ vii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT viii MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU PROBIOTIC 1.1.1 Định nghĩa probiotic 1.1.2 Một số nhóm vi sinh vật probiotic 1.1.3 Các đặc tính tiêu biểu vi sinh vật probiotic 1.1.4 Nghiên cứu ứng dụng chế phẩm probiotic NTTS Việt Nam PREBIOTIC 10 1.2.1 Khái niệm prebiotic 10 1.2.2 Ứng dụng prebiotic NTTS 11 1.2.3 Khô đậu nành 13 SYNBIOTIC 14 1.3.1 Khái niệm synbiotic 14 1.3.2 Lên men xốp tạo tạo synbiotic từ probiotic prebiotic 14 1.3.3 Ứng dụng sản phẩm synbiotic giới Việt Nam 15 VÀI NÉT VỀ NGHỀ NUÔI TÔM NƯỚC LỢ TRÊN THẾ GIỚI VÀ VIỆT NAM 17 1.4.1 Trên giới 17 1.4.2 Tại Việt Nam 18 1.4.3 Tình hình dịch bệnh NTTS Việt Nam 19 CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU…………… 22 VẬT LIỆU, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ, MÁY MÓC 22 2.1.1 Vật liệu 22 2.1.2 Các thiết bị máy móc 22 iv 2.1.3 Môi trường 23 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU, KỸ THUẬT SỬ DỤNG 23 2.2.1 Phương pháp hóa sinh học 24 2.2.2 Phương pháp xác định đặc điểm hình thái định danh vi khuẩn 27 2.2.3 Phương pháp xác định mật độ tế bào vi khuẩn 30 2.2.4 Đánh giá khả sử dụng prebiotic khô đậu nành probiotic 30 2.2.5 Phương pháp xác định điều kiện thích hợp để lên men xốp tạo chế phẩm synbiotic 31 2.2.6 Khảo sát nhiệt độ thời gian sấy chế phẩm 31 2.2.7 Phương pháp xác định hàm lượng chất ức chế trypsin 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA CÁC CHỦNG PROBIOTIC NGHIÊN CỨU 34 3.1.1 Khả sinh enzyme tiêu hóa probiotic 34 3.1.2 Khả kháng Vibrio parahaemolyticus 37 3.1.3 Đánh giá khả tạo màng sinh học chủng probiotic 38 ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI TẾ BÀO VI KHUẨN PROBIOTIC VÀ VỊ TRÍ PHÂN LOẠI CỦA CHỦNG 40 3.2.1 Hình thái khuẩn lạc tế bào 40 3.2.2 Phân loại chủng vi khuẩn probiotic 41 ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG SỬ DỤNG KHÔ ĐẬU NÀNH CỦA PROBIOTIC 43 TỐI ƯU MỘT SỐ ĐIỀU KIỆN CHO QUÁ TRÌNH LÊN MEN XỐP 45 3.4.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình lên men 46 3.4.2 Ảnh hưởng độ ẩm đến trình lên men 47 3.4.3 Ảnh hưởng độ dày chất đến trình lên men 49 KHẢO SÁT NHIỆT ĐỘ VÀ THỜI GIAN SẤY CHẾ PHẨM 51 3.5.1 Ảnh hưởng đến mật độ tế bào vi khuẩn chế phẩm 51 3.5.2 Ảnh hưởng đến khả sinh enzyme tiêu hóa chế phẩm 53 v 3.5.3 Ảnh hưởng đến khả kháng lại vi khuẩn gây bệnh chế phẩm… 55 KHẢ NĂNG PHÂN HỦY CHẤT ỨC CHẾ TRYPSIN TRƯỚC VÀ SAU LÊN MEN 56 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO 60 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Diện tích sản lượng tôm nuôi nước lợ 2010-2015 19 Bảng 1.2 Tổng hợp tình hình dịch bệnh tơm nuôi từ năm 2013-2016 20 Bảng 2.1 Bảng thiết bị, máy móc phòng thí nghiệm 22 Bảng 2.2 Thành phần hóa chất sử dụng để xác định đơn vị chất ức chế trypsin khô đậu nành 32 Bảng 3.1 Hoạt tính sinh enzyme α-amylase chủng nghiên cứu 35 Bảng 3.2 Hoạt tính sinh enzyme cellulase chủng nghiên cứu 36 Bảng 3.3 Hoạt tính sinh enzyme protease chủng nghiên cứu 37 Bảng 3.4 Đường kính vịng kháng khuẩn chủng (mm) 37 Bảng 3.5.Đặc điểm hình thái, màu sắc khuẩn lạc chủng probiotic tuyển chọn 40 Bảng 3.6 Hình thái tế bào chủng probiotic tuyển chọn 40 Bảng 3.7 Mật độ vi khuẩn probiotic chế phẩm trước sau lên men (CFU/g) 44 Bảng 3.8 Ảnh hưởng nhiệt độ lên men đến mật độ tế bào vi khuẩn khả sinh enzyme tiêu hóa chế phẩm sau lên men 46 Bảng 3.9 Ảnh hưởng nhiệt độ lên men đến khả kháng khuẩn chế phẩm sau lên men 47 Bảng 3.10 Ảnh hưởng độ ẩm lên men đến khả sinh enzyme tiêu hóa chế phẩm sau lên men 47 Bảng 3.11 Ảnh hưởng độ ẩm lên men đến khả kháng khuẩn chế phẩm sau lên men 48 Bảng 3.12 Ảnh hưởng độ dày chất lên men đến mật độ tế bào vi khuẩn chế phẩm tạo thành 49 Bảng 3.13 Ảnh hưởng độ dày chất lên men đến khả sinh enzyme tiêu hóa chế phẩm tạo thành 50 Bảng 3.14 Ảnh hưởng độ dày chất lên men đến khả kháng khuẩn chế phẩm tạo thành 50 Bảng 3.15 Thời gian sấy cần thiết để thu chế phẩm có độ ẩm theo yêu cầu 51 Bảng 3.16 Ảnh hưởng độ ẩm lên men đến khả sinh enzyme tiêu hóa chế phẩm sau lên men 54 Bảng 3.17 Ảnh hưởng nhiệt độ độ ẩm sau sấy chế phẩm đến mật độ tế bào vi khuẩn 55 vii a DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 2.1 Sơ đồ tóm tắt phương pháp nghiên cứu 24 Hình 3.1 Hoạt tính sinh enzyme α-amylase chủng nghiên cứu 34 Hình 3.2 Hoạt tính sinh enzyme cellulose chủng nghiên cứu 35 Hình 3.3 Hoạt tính sinh enzyme protease chủng nghiên cứu 36 Hình 3.4 Khả tạo màng chủng probiotic sau 24, 48 72h 39 Hình 3.5 Ảnh tạo màng sinh học chủng probiotic sau 24, 48 72h 39 Hình 3.6 Hình ảnh nhuộm Gram chủng probiotic sau 24 ni 41 Hình 3.7 Sản phẩm điện di 42 Hình 3.8 Cây phát sinh chủng loại chủng probiotic nghiên cứu 43 Hình 3.9 Mật độ vi khuẩn probiotic trước (trái) sau (phải) lên men công thức phối trộn 1-6 45 Hình 3.10 Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến mật độ tế bào vi khuẩn chế phẩm A: nhiệt độ sấy 40⁰C, B: Nhiệt độ sấy 50⁰C, C: Nhiệt độ sấy 60⁰C, D: Nhiệt độ sấy 70⁰C 53 Hình 3.11 Đơn vị chất ức chế trypsin chế phẩm sau lên men 57 viii b DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Ý nghĩa CT Công thức ĐBSCL Đồng sông Cửu Long NTTS Nuôi trồng thủy sản TT Thứ tự VK Vi khuẩn VSV Vi sinh vật SHPT Sinh học phân tử c MỞ ĐẦU Tại Việt Nam, ngành Thủy sản góp phần quan trọng vào tăng trưởng kinh tế Hoạt động nuôi trồng thủy sản liên tục có bước phát triển mạnh, sản lượng tăng trung bình đạt 12,77% qua năm Năm 2019, tổng sản lượng khai thác nuôi trồng đạt khoảng 8,15 triệu kim ngạch xuất ước đạt 8,6 tỷ USD Theo định hướng phát triển đến năm 2030, tổng sản lượng thủy sản đạt khoảng 9,0 triệu tấn, sản lượng ni trồng thủy sản chiếm đến khoảng 70% sản lượng khai thác chiếm khoảng 30% [1] Tuy nhiên, nghề nuôi tôm đương đầu với nhiều loại bệnh khác nhau: bệnh phát sáng, bệnh đầu vàng, bệnh cịi tơm (EMS), hay bệnh hoại tử gan tụy… nguyên nhân phần lớn vi khuẩn gây bệnh thuộc chi Vibrio gây Chính vậy, thuốc kháng sinh thường sử dụng rộng rãi để ngừa bệnh cho vật nuôi nuôi trồng thủy sản Tuy nhiên, có đến 80% kháng sinh sử dụng tiết qua nước tiểu phân vật ni mà khơng bị phân hủy hồn tồn Theo số liệu báo cáo, việc sử dụng kháng sinh nuôi trồng thủy sản nguyên nhân cho việc tồn dư kháng sinh môi trường Các nghiên cứu từ Bangladesh, Ấn Độ, Indonesia Thái Lan báo cáo dư lượng kháng sinh sản phẩm thủy sản nước nuôi trồng thủy sản Trong đó, Chloramphenicol ghi nhận cá từ Bangladesh (~ 5ng/L), tôm từ Ấn Độ (~ 32ng/L) Indonesia (~ 45ng/L), v.v [2] Do đó, việc lạm dụng kháng sinh dẫn đến xuất vi khuẩn kháng kháng sinh (ARB) gen kháng kháng sinh (ARGs) môi trường nuôi trồng thủy sản [3] Trên giới, thực phẩm bổ sung dạng synbiotic dòng sản phẩm trọng tâm nghiên cứu đối tượng động vật thủy sản Tại Việt Nam, nghiên cứu thực phẩm hỗ trợ chuyển hóa thức ăn động vật thủy sản chủ yếu dạng probiotic, dạng prebiotic riêng lẻ xuất báo cáo Việt Nam Nhưng chưa có nhiều báo cáo cho thấy phối hợp prebiotic với sản phẩm prebiotic probiotic thành synbiotic tôm, cá nuôi Đề tài nghiên cứu tạo sản phẩm synbiotic với kết hợp trực tiếp probiotic prebiotic khơ đậu nành thơng qua q trình lên men, dùng để bổ sung vào thức ăn nuôi tơm, từ cân hệ vi sinh đường ruột, kích thích để làm tăng cường hệ miễn dịch, tăng cường chuyển hóa thức ăn từ làm tăng sản lượng tơm Những chủng vi sinh vật có lợi sử dụng đề tài có khả sinh enzyme tiêu hóa amylase, cellulase, protease, khả kháng lại Vibrio parahaemolyticus chủng tạo màng sinh học (biofilm) tốt Đây sở để chủng probiotic có khả bám dính giá thể tốt tồn lâu dài thành ruột tôm hay động vật chủ khác Prebiotic-chất sơ thực phẩm, lựa chọn khô đậu nành, loại phụ phẩm nông nghiệp chứa nhiều dinh dưỡng sau sản xuất dầu Các Oligosaccharride - thành phần có mặt chất sơ thực phẩm số chất ức chế dinh dưỡng ức chế tripsine (trypsine inhibitor) chứa khơ dầu đậu nành chuyển hóa thành axit béo mạch ngắn loại chất ức chế dinh dưỡng nhờ trình lên men chủng probiotic Hiện việc sử dụng probiotic NTTS thường theo hai hướng: phối trộn vào thức ăn cho tôm, cá ăn bổ sung trực tiếp vào môi trường nước ao nuôi Nhiều nghiên cứu cho thấy hiệu probiotic xử lý môi trường ao nuôi Tuy nhiên, nghiên cứu tập trung vào sàng lọc chủng vi khuẩn có khả cải thiện sức khỏe tơm thơng qua kích thích q trình trao đổi chất, tăng cường hệ thống miễn dịch tôm, cá ứng dụng chất bổ trợ prebiotic hay cịn gọi chất xơ hòa tan để kích thích phát triển nhóm lợi khuẩn cịn chưa nhiều Đây vấn đề quan trọng điều kiện thâm canh siêu thâm canh hóa nước ta Trước yêu cầu thực tiễn, tiến hành thực đề tài: “Bước đầu nghiên cứu chế phẩm sinh học dạng synbiotic để bổ sung vào thức ăn nuôi tôm thẻ chân trắng (Penaeus vannamei)” Mục đích nghiên cứu: Tạo chế phẩm sinh học dạng synbiotic bổ sung vào thức ăn nuôi tôm thẻ chân trắng, giúp nâng cao tăng trưởng tăng cường miễn dịch cho tôm Nội dung nghiên cứu : - Nội dung Sàng lọc vi sinh vật probiotic TUI/mg 57 45 40 35 30 25 20 15 10 41,12 6,63 Hỗn hợp chủng VK Trước lên men 9,72 11,77 LB BS 12,85 8,39 BSHC HM Sau lên men Hình 3.11 Đơn vị chất ức chế trypsin chế phẩm sau lên men Kết Hình 3.11 chứng minh tồn với hàm lượng cao chất ức chế trypsin khô đậu nành chưa lên men, giá trị đơn vị chất ức chế trypsin cao mức 41,12 TUI/mg Tuy nhiên, hàm lượng chất ức chế trypsin giảm đáng kể sau trình lên men xốp Độ giảm chất ức chế khác tùy thuộc vào loại vi khuẩn sử dụng, nhìn chung có đến 68% đơn vị chất bị loại bỏ chế phẩm tạo thành Cụ thể, chế phẩm lên men từ hỗn hợp vi khuẩn có khả phân hủy chất kháng dinh dưỡng tốt loại chế phẩm thử nghiệm, đơn vị chất ức chế trypsin giảm 83,9% Hàm lượng lại chất mức 6,63 TUI/mg chế phẩm sau lên men Đối với chế phẩm lên men chủng probiotic đơn lẻ, độ giảm chất ức chế trypsin thấp Trong đó, chủng BSHC có khả loại chất ức chế trypsin cao ba chủng lại, đơn vị TUI sau lên men ngưỡng 8,39 TUI/mg Chủng HM có hoạt tính lại chất ức chế trypsin nhất, giá trị đơn vị chất ức chế trypsin lại sau lên men mức cao 12,85 TUI/mg Giá trị cao gấp 1,94 lần so với chế phẩm lên men hỗn hợ chủng vi khuẩn Còn chế phẩm lên men chủng LB BS, đơn vị chất ức chế trypsin sau lên men ghi nhận 9,72 11,77 TUI/mg Các thí nghiệm thực nghiên cứu cho thấy trình lên men xốp chất khô đậu nành với chủng vi khuẩn probiotic có hiệu cao phân hủy chất ức chế trypsin Trong đó, sử dụng hỗn hợp bốn chủng probiotic LB, BS, BSHC, HM lên men chế phẩm có khả loại bỏ chất kháng dinh dưỡng tốt so với chế phẩm lên men chủng vi khuẩn đơn lẻ Đơn vị chất ức chế trypsin giảm đến 83,9% chể phẩm sau lên 58 men Đồng thời, chế phẩm tạo thành có mật độ vi khuẩn cao đạt 60 × 109 CFU/g khả sinh enzyme tiêu hóa, kháng lại vi khuẩn gây bệnh tốt 59 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đã lựa chọn bốn chủng vi khuẩn probiotic ký hiệu BS, BSHC, HM LB có khả sinh enzyme tiêu hóa, tạo màng sinh học tốt kháng lại vi khuẩn gây bệnh Vibrio parahaemolyticus Các chủng vi khuẩn có khả sử dụng khô đậu nành nguồn chất cho sinh trưởng Phân loại chủng vi khuẩn nghiên cứu thơng qua kit API 50 CHB so sánh trình tự gen 16S rRNA Các chủng BS, BSHC, HM thuộc chi Bacillus chủng LB thuộc chi Lactobacillus với độ tương đồng 99% Điều kiện thích hợp cho lên men xốp tạo chế phẩm synbiotics xác định nhiệt độ 35˚C, độ ẩm 40% độ dày chế phẩm lên men từ 3-6 cm (dùng cho khay lên men 2,5 lít), nhiệt độ sấy 40-50⁰ C độ ẩm chế phẩm trì 20-30% Chế phẩm synbiotics tạo thành có mật độ tế bào đạt 108 CFU/g, có hoạt tính sinh enzyme ức chế vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus thể tốt với đường kính phân giải chất kháng khuẩn đạt 20 mm, có khả loại bỏ 83,9% chất ức chế trypsin chất khô đậu nành KIẾN NGHỊ Ứng dụng sản phẩm nghiên cứu vào thực tiễn, ao ni tơm thương phẩm từ đánh giá ảnh hưởng chế phẩm đến phát triển tôm thẻ chân trắng Đưa liều lượng bổ sung chế phẩm vào thức ăn theo phát triển tơm từ đánh giá giá trị kinh tế chế phẩm 60 d TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 13 14 Tổng cục thủy sản, 2020, Nuôi biển - trọng tâm đột phá phát triển thủy sản 10 năm tới From https://tongcucthuysan.gov.vn Manage, P M., 2018, Heavy use of antibiotics in aquaculture; emerging human and animal health problems–a review Chen, B., Lin, L., Fang, L., Yang, Y., Chen, E., Yuan, K., & Luan, T , 2018, Complex pollution of antibiotic resistance genes due to beta-lactam and aminoglycoside use in aquaculture farming Water research, 134, 200-208 Śliżewska, K., Chlebicz-Wójcik, A., & Nowak, A , 2021, Probiotic properties of new Lactobacillus strains intended to be used as feed additives for monogastric animals Probiotic and Antimicrobial Proteins, 13(1), 146-162 Zhang, H., Wang, H., Shepherd, M., Wen, K., Li, G., Yang, X., & Yuan, L., 2014, Probiotic and virulent human rotavirus modulate the transplanted human gut microbiota in gnotobiotic pigs Gut pathogens, 6(1), 1-7 Rengpipat, S., Rukpratanporn, S., Piyatiratitivorakul, S., & Menasaveta, P , 2000, Immunity enhancement in black tiger shrimp (Penaeus monodon) by a probiont bacterium (Bacillus S11) Aquaculture, 191(4), 271-288 Lee, N K., Kim, W S., & Paik, H D , 2019, Bacillus strains as human probiotic: characterization, safety, microbiome, and probiotic carrier Food science and biotechnology, 28(5), 1297-1305 Hossain, M N., Afrin, S., Humayun, S., Ahmed, M M., & Saha, B K , 2020, Identification and growth characterization of a novel strain of Saccharomyces boulardii isolated from soya paste Frontiers in nutrition, 7, 27 Yi, R., Pan, Y., Long, X., Tan, F., & Zhao, X , 2020, Enzyme Producing Activity of Probiotic and Preparation of Compound Enzyme Journal of Chemistry, 2020 Vaughan, E E., Heilig, H G., Ben-Amor, K., & De Vos, W M , 2005, Diversity, vitality and activities of intestinal lactic acid bacteria and bifidobacteria assessed by molecular approaches FEMS Microbiology Reviews, 29(3), 477-490 Lebeer, S., Verhoeven, T L., Perea Vélez, M., Vanderleyden, J., & De Keersmaecker, S C , 2007, Impact of environmental and genetic factors on biofilm formation by the probiotic strain Lactobacillus rhamnosus GG Applied and Environmental Microbiology, 73(21), 6768-6775 Mokoena, M P , 2007, Lactic acid bacteria and their bacteriocins: classification, biosynthesis and applications against uropathogens: a minireview Molecules, 22(8), 1255 Islam, S U , 2016, Clinical uses of probiotic Medicine, 95(5) Collins, J W., La Ragione, R M., Woodward, M J., & Searle, L E , 2009, Application of prebiotic and probiotic in livestock Prebiotic and probiotic 61 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 science and technology, 1123 Chalasani, A G., Dhanarajan, G., Nema, S., Sen, R., & Roy, U , 2015, An antimicrobial metabolite from Bacillus sp.: significant activity against pathogenic bacteria including multidrug-resistant clinical strains Frontiers in microbiology, 6, 1335 Phuong, T T N., & Oanh, Đ T H , 2016, Sàng lọc chủng vi khuẩn lactic từ ruột số loài cá da trơn có tiềm sử dụng làm probiotic Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, (44), 76-85 Linh, N T T., Phú, T Q., Oanh, Đ T H., & Nghĩa, N T , 2017, Ảnh hưởng vi khuẩn lactic bổ sung vào thức ăn lên khả kháng bệnh hoại tử gan tụy cấp tính tôm thẻ chân trắng (Litopenaeus vannamei) Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, (52), 122-130 Ngân, P T T., Út, V N., & Anh, N T N , 2018, Ảnh hưởng bổ sung grobiotic®-a thức ăn lên tăng trưởng sức đề kháng bệnh cá tra (Pangasianodon hypothalamus) Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, 54(6), 115-119 Collins, J W., La Ragione, R M., Woodward, M J., & Searle, L E , 2009, Application of prebiotic and probiotic in livestock Prebiotic and probiotic science and technology, 1123 Hlordzi, V., Kuebutornye, F K., Afriyie, G., Abarike, E D., Lu, Y., Chi, S., & Anokyewaa, M A , 2020, The use of Bacillus species in maintenance of water quality in aquaculture: A review Aquaculture Reports, 18, 100503 Aachary, A A., & Prapulla, S G , 2009, Value addition to corncob: production and characterization of xylooligosaccharides from alkali pretreated ligninsaccharide complex using Aspergillus oryzae MTCC 5154 Bioresource Technology, 100(2), 991-995 Aachary, A A., & Prapulla, S G , 2011, Xylooligosaccharides (XOS) as an emerging prebiotic: microbial synthesis, utilization, structural characterization, bioactive properties, and applications Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety, 10(1), 2-16 Patindol, J., Wang, L., & Wang, Y J , 2007, Cellulase‐assisted extraction of oligosaccharides from defatted rice bran Journal of food science, 72(9), C516C521 Bongers, R S., Hoefnagel, M H., Starrenburg, M J., Siemerink, M A., Arends, J G., Hugenholtz, J., & Kleerebezem, M , 2003, IS 981-mediated adaptive evolution recovers lactate production by ldhB transcription activation in a lactate dehydrogenase-deficient strain of Lactococcus lactis Journal of bacteriology, 185(15), 4499-4507 Merrifield, D L., & Ringo, 2014, Aquaculture nutrition: gut health, probiotic and prebiotic John Wiley & Sons 62 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 Rastall, B., & Gibson, 2006, Prebiotic: development and application John Wiley & Sons Li, P., & Gatlin III, D M ,2004, Dietary brewers yeast and the prebiotic Grobiotic™ AE influence growth performance, immune responses and resistance of hybrid striped bass (Morone chrysops× M saxatilis) to Streptococcus iniae infection Aquaculture, 231(1-4), 445-456 Mahious, A S., Gatesoupe, F J., Hervi, M., Metailler, R., & Ollevier, F., 2006, Effect of dietary inulin and oligosaccharides as prebiotic for weaning turbot, Psetta maxima (Linnaeus, C 1758) Aquaculture International, 14(3), 219-229 Bir, J., Golder, M R., Kiswas, S K., Islam, S S., Kumar, R., & Huq, K A , 2020, Application of probiotic and prebiotic for promoting growth of Tiger shrimp (Penaeus monodon): an approach to eco-friendly shrimp aquaculture International Journal of Agricultural Research, Innovation and Technology (IJARIT), 10(2355-2021-430), 15-20 Liu, K , 1997, Chemistry and nutritional value of soybean components In Soybeans (pp 25-113) Springer, Boston, MA Derbyshire, E., Wright, D J., & Boulter, D , 1976, Legumin and vicilin, storage proteins of legume seeds Phytochemistry, 15(1), 3-24 Hajos, G., Gelencsér, E., Grant, G., Bardocz, S., Sakhri, M., Duguid, T J., & Pusztai, A , 1996, Effect of proteolytic modification and methionine enrichment on the nutritional value of soya albumins for rats The Journal of Nutritional Biochemistry, 7(9), 481-487 Leeson, S , 2008, Predictions for commercial poultry nutrition Journal of Applied Poultry Research, 17(2), 315-322 Švejstil, R., Musilová, Š., & Rada, V., 2015, Raffinose-series oligosaccharides in soybean products Sci Agric Bohem, 46, 73-77 Liener, I E , 1994, Implications of antinutritional components in soybean foods Critical Reviews in Food Science & Nutrition, 34(1), 31-67 Song, Y S., Pérez, V G., Pettigrew, J E., Martinez-Villaluenga, C., & de Mejia, E G , 2010, Fermentation of soybean meal and its inclusion in diets for newly weaned pigs reduced diarrhea and measures of immunoreactivity in the plasma Animal feed science and technology, 159(1-2), 41-49 Yuan, Y C., Lin, Y C., Yang, H J., Gong, Y., Gong, S Y., & Yu, D H , 2013, Evaluation of fermented soybean meal in the practical diets for juvenile C hinese sucker, M yxocyprinus asiaticus Aquaculture Nutrition, 19(1), 74-83 Chi, C H., & Cho, S J., 2016, Improvement of bioactivity of soybean meal by solid-state fermentation with Bacillus amyloliquefaciens versus Lactobacillus spp and Saccharomyces cerevisiae LWT-Food Science and Technology, 68, 619-625 63 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 Cerezuela, R., Meseguer, J., & Esteban, M A , 2011, Current knowledge in synbiotic use for fish aquaculture: a review Journal of Aquaculture Research & Development S, 1, 1-7 Divate, R D., Wang, C C., Chou, S T., Chang, C T., Wang, P M., & Chung, Y C., 2017, Using wheat bran and soybean meal as solid state fermentation substances for the production of Xylaria nigripes with bioactivities Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers, 70, 127-133 Durand, A., 2003, Bioreactor designs for solid state fermentation Biochemical Engineering Journal, 13(2–3), 113–125 Khattab, Y A E., Shalaby, A M E., Sharaf, S M., El-Marakby, H I., & Rizkalla, E H , 2004, The physiological changes and growth performance of the Nile tilapia Oreochromis niloticus after feeding with Biogen® as growth promoter Egypt J Aquat Biol & Fish, 8(2), 145-158 Eid, A., & Mohamed, K A., 2008, Effect of using probiotic as growth promoter in commercial diets for monosex Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fingerlings In 8th International Symposium on Tilapia in Aquaculture, Cairo, Egypt (pp 12-14) Daniels, C L., Merrifield, D L., Boothroyd, D P., Davies, S J., Factor, J R., & Arnold, K E., 2010, Effect of dietary Bacillus spp and mannan oligosaccharides (MOS) on European lobster (Homarus gammarus L.) larvae growth performance, gut morphology and gut microbiota Aquaculture, 304(14), 49-57 Huynh, T G., Cheng, A C., Chi, C C., Chiu, K H., & Liu, C H., 2018, A synbiotic improves the immunity of white shrimp, Litopenaeus vannamei: Metabolomic analysis reveal compelling evidence Fish & shellfish immunology, 79, 284-293 Okey, I B., Gabriel, U U., & Deekae, S N., 2018, The use of synbiotics (Prebiotic and probiotic) in aquaculture development Sumerianz Journal of Biotechnology, 1(2), 51-60 Lu, H D., Ky, P X., Tram, D T T., Bich, N T K., Lam, H S., van Huynh, T., & Vi, P B , 2014, Effects of dietary mannan oligosaccharide on muscle protein, intestinal morphology and blood cell count of clownfish, amphiprion ocellaris Vietnam Journal of Marine Science and Technology, 14(2), 156-162 Van Doan, H., Doolgindachbaporn, S., & Suksri, A J A N., 2016, Effect of Lactobacillus plantarum and Jerusalem artichoke (Helianthus tuberosus) on growth performance, immunity and disease resistance of Pangasius catfish (Pangasius bocourti, Sauvage 1880) Aquaculture Nutrition, 22(2), 444-456 Crespi, V., & New, M (2009) Cultured aquatic species fact sheets FAO 64 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 Shinn, A P., Pratoomyot, J., Griffiths, D., Trong, T Q., Vu, N T., Jiravanichpaisal, P., & Briggs, M , 2018, Asian shrimp production and the economic costs of disease Asian Fish Sci S, 31, 29-58 Báo cáo tổng hợp, 2015, Quy hoạch nuôi tôm nước lợ vùng Đồng sông Cửu Long đến năm 2020, tầm nhìn 2030, Viện Kinh tế Quy hoạch thủy sản Bộ Nông nghiệp phát triển Nông thôn Vermelho, A B., Meirelles, M N L., Lopes, A., Petinate, S D G., Chaia, A A., & Branquinha, M H., 1996, Detection of extracellular proteases from microorganisms on agar plates Memorias Instituto Oswaldo Cruz, 91(6), 755-760 Johnsen, H R., & Krause, K., 2014, Cellulase activity screening using pure carboxymethylcellulose: application to soluble cellulolytic samples and to plant tissue prints International Journal of Molecular Sciences, 15(1), 830-838 Briggs, D E., 1962, Gel‐diffusion method for the assay of α‐amylase Journal of the Institute of Brewing, 68(1), 27-32 Morikawa, M ,2006, Beneficial biofilm formation by industrial bacteria Bacillus subtilis and related species Journal of bioscience and bioengineering, 101(1), 1-8 Lân, D N., Nguyễn, Q D., & Pham, T V , 2010, Vi sinh vật học NXB Giáo dục Việt Nam Trần, L T ,2006, Phương pháp phân tích vi sinh vật nước, thực phẩm mỹ phẩm NXB Giáo dục Việt Nam Hosseininaveh, V., Bandani, A., Azmayeshfard, P., Hosseinkhani, S., & Kazzazi, M., 2007, Digestive proteolytic and amylolytic activities in Trogoderma granarium Everts (Dermestidae: Coleoptera) Journal of Stored Products Research, 43(4), 515-522 Śliżewska, K., & Chlebicz-Wójcik, A., 2020, Growth kinetics of probiotic Lactobacillus strains in the alternative, cost-efficient semi-solid fermentation medium Biology, 9(12), 423 Andhika Cahaya Titisan Sukma, A C T S., Herwati Oktavianty, H O., & Siswo Sumardiono, S S., 2021, Optimization of solid‐state fermentation condition for crude protein enrichment of rice bran using Rhizopus oryzae in tray bioreactor Indonesian Journal of Biotechnology, 26(1), 33-40 65 65 PHỤ LỤC Bảng Kết phân loại chủng vi khuẩn theo kit API 50 CHB TT Chủng phân loại với kit API 50CHB Cơ chất BS BSHC HM LB Glycerol + + + - Erythritol - - - - D- Arabinose - - - - L-Arabinose + + + - Ribose + + + + D-Xylose + + + - L-Xylose - - - - Adonitol - - - - -Methyl-Xylose - - - - 10 Galactose - - - + 11 Glucose + + + + 12 Fructose + - - + 13 Mannose + + + + 14 Sorbose - - - - 15 Rhamnose - - - - 16 Dulcitol - - - - 17 Inositol + + + - 18 Mannitol + + + + 19 Sorbitol + + + + 20 -Methyl-D-Mannoside - - - - 21 -Methyl-D-Glucoside - + + - 22 N-acetyl-Glucosamine - - - + 23 Amidaglin + + + + 66 24 Arbutin + + + + 25 Esculin + + + + 26 Salicin + + + + 27 Celiobiose + + + + 28 Maltose + + + + 29 Lactose + + + + 30 Melibiose + + + - 31 Sucrose + + + + 32 Trehalose + + + + 33 Inulin - + + - 34 Melezitose - - - + 35 Rafinose + + + - 36 Starch - + + - 37 Glycogen + + + - 38 Xylitol - - - - 39 Gentiobiose - + + + 40 Turanose - - - - 41 D-Lyxose - - - - 42 D-Tagatose - - - + 43 D-Fucose - - - - 44 L-Fucose - - - - 45 D-Arabitol - - - - 46 L-Arabitol - - - - 47 GlucoNaTe - - - - 48 Keto-Gluconate - - - - 49 Keto-Gluconate - - - - 67  Trình tự đoạn gen 16S rRNA chủng BS “AGTTTGATCATGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACA TGCAGTCGAGCGGACAGATGGGAGCTTGCTCCCTGATGTTAGCGGCG GACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCTGTAAGACTGGGATAA CTCCGGGAAACCGGGGCTAATACCGGATGGTTGTcTGAACCGCATGG TTCAGACATAAAAGGTGGCTTCGGCTACCACTTACAGATGGACCCGC GGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATG CGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACAC GGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCGCAATG GACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGTTTTC GGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTGCCGTTCAAATA GGGSGGCACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACG TGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGAATT ATTGGGCGTAAAGGGCTCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAA GCCCCCGGCTCAACCGGGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTGA GTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGT AGAGATGTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTCTCTGGTCTGT AACTGACGKTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGAT ACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGGGGG TTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGG GAGTACGGTCGCAAGACTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCG CACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAAC CTTACCAGGTCTTGACATCCTCTGACAATCCTAGAGATAGGACGTCC CCTTCGGGGGCAGAGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGT GTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGATC TTAGTTGCCAGCATTCAGTTGGGCACTCTAAGGTGACTGCCGGTGAC AAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATG ACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGACAGAACAAAGGGCAGCGA AACCGCGAGGTTAAGCCAATCCCACAAATCTGTTCTCAGTTCGGATC GCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCG GATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTGCACACCGC CCGTCACACCACAAGAGTTTGTAACACCCGACGTCGGTCAGGTAACC TTTTAGGAGCCAGCCGCCGAAGGTGGGACAGATGATTGGGGTGAAG TCGTAACAAA” 68  Trình tự đoạn gen 16S rRNA chủng BSHC “CTAATACATGCAAGTCGAGCGGACAGATGGGAGCTTGCTCCCTGAT GTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCTGTAAG ACTGGGATAACTCCGGGAAACCGGGGCTAATACCGGATGGTTGTTTG AACCGCATGGTTCAAACATAAAAGGTGGCTTCGGCTACCACTTACAG ATGGACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAA GGCGACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGG ACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATC TTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAT GAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTAC CGTTCGAATAGGGCGGTACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACG GCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTT GTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGCAGGCGGTTTCTTAAGTC TGATGTGAAAGCCCCCGGCTCAACCGGGGAGGGTCATTGGAAACTG GGGAACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATTCCACGTGTAGCGG TGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTC TCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAAC AGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAG TGTTAGGGGGTTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCA CTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGACTGAAACTCAAAGGAATTG ACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCA ACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCTGACAATCCTAGAG ATAGGACGTCCCCTTCGGGGGCAGAGTGACAGGTGGTGCATGGTTGT CGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGC AACCCTTGATCTTAGTTGCCAGCATTCAGTTGGGCACTCTAAGGTGA CTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATC ATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGACAGAACA AAGGGCAGCGAAACCGCGAGGTTAAGCCAATCCCACAAATCTGTTCT CAGTTCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGCTGGAATCGC TAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTT GTACACACCGCCCGTCACACCACGAGAGTTTGTAACACCCGAAGTCG GTGAGGTAACCTTTTAGGAGCCAGCCGCCGAAGGTGGGACAGATGA TTGGGGTGAAGTCGTAACAAG”  Trình tự đoạn gen 16S rRNA chủng HM 69 “ACGTGGGGGGGGGTGCTATACATGCAGTCGAGCGGACAGATGGGA GCTTGCTCCCTGATGTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTA ACCTGCCTGTAAGACTGGGATAACTCCGGGAAACCGGGGCTAATACC GGATGGTTGTTTGAACCGCATGGTTCAAACATAAAAGGTGGCTTCGG CTACCACTTACAGATGGACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGT AACGGCTCACCAAGGCAACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGAT CGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCA GCAGTAGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACG CCGCGTGAGTGATGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGG GAAGAACAAGTACCGTTCGAATAGGGCGGTACCTTGACGGTACCTAA CCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGT AGGTGGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGCAGG CGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCCCGGCTCAACCGGGGAGGG TCATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATT CCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACACCAGTG GCGAAGGCGACTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGAGCGAAAGC GTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAA CGATGAGTGCTAAGTGTTAGGGGGTTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGC TAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGACTGAAA CTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGT TTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCT GACAATCCTAGAGATAGGACGTCCCCTTCGGGGGCAGAGTGACAGG TGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTC CCGCAACGAGCGCAACCCTTGATCTTAGTTGCCAGCATTCAGTTGGG CACTCTAAGGTGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATG ACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTAC AATGGACAGAACAAAGGGCAGCGAAACCGCGAGGTTAAGCCAATCC CACAAATCTGTTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGT GAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATA CGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCACGAGAGTTTGT AACACCCGAAGTCGGTGAGGTAACCTTTTAGGAGCCAGCCGCCGAA GGTGGGACAGATGATTGGGGTGAAGTCGTAACCAAGTAGCCTGAGG C” 70  Trình tự đoạn gen 16S rRNA chủng LB “TGATCATGGCTCGGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCA AGTCGAGCGAGCTGAACCAACAGATTCACTTCGGTGATGACGTTGGG AACGCGAGCGGCGGATGGGTGAGTAACACGTGGGGAACCTGCCCCA TAGTCTGGGATACCACTTGGAAACAGGTGCTAATACCGGATAAGAAA GCAGATCGCATGATCAGCTTATAAAAGGCGGCGTAAGCTGTCGCTAT GGGATGGCCCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTAGGGTAACGGCCTAC CAAGGCAATGATGCATAGCCGAGTTGAGAGACTGATCGGCCACATTG GGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAA TCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGA AGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTGGTGAAGAAGGATAG AGGTAGTAACTGGCCTTTATTTGACGGTAATCAACCAGAAAGTCACG GCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTT GTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGAAGAATAAGT CTGATGTGAAAGCCCTCGGCTTAACCGAGGAACTGCATCGGAAACTG TTTTTCTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGT GGAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTCT CTGGTCTGCAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGGGTAGCGAACA GGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGT GTTGGGAGGTTTCCGCCTCTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCAC TCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGA CGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAA CGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTAGTGCAATCCGTAGAGA TACGGAGTTCCCTTCGGGGACACTAAGACAGGTGGTGCATGGCTGTC GTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCA ACCCTTGTCATTAGTTGCCAGCATTAAGTTGGGCACTCTAATGAGACT GCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCATCAT GCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGACAGTACAAC GAGGAGCAAGCCTGCGAAGGCAAGCGAATCTCTTAAAGCTGTTCTCA GTTCGGACTGCAGTCTGCAACTCGACTGCACGAAGCTGGAATCGCTA GTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGT ACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTCTGCAATGCCCAAAGCCGGT GGCCTAACCTTCGGCAAGGAGCCG” ... ? ?Bước đầu nghiên cứu chế phẩm sinh học dạng synbiotic để bổ sung vào thức ăn nuôi tơm thẻ chân trắng (Penaeus vannamei)? ?? Mục đích nghiên cứu: Tạo chế phẩm sinh học dạng synbiotic bổ sung vào thức. .. độ ăn có bổ sung Biogen nấm men biểu tăng trưởng lớn so với nuôi chế độ ăn tương ứng không bổ sung Biogen nấm men (đối chứng), nghiên cứu chế độ ăn chứa 30% protein bổ sung 0,1% Biogen tạo hiệu... vào thức ăn nuôi tôm thẻ chân trắng, giúp nâng cao tăng trưởng tăng cường miễn dịch cho tôm Nội dung nghiên cứu : - Nội dung Sàng lọc vi sinh vật probiotic + Chọn chủng vi sinh vật sinh enzyme