Luận văn thạc sĩ nghiên cứu một số phương pháp tổng hợp corticosteroid từ androstendion và hợp chất tương tự

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN VIỆN H N L M KHO HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HỐ HỌC NGU ỄN V N ĐẠ NGHIÊN CỨU MỘT S P Ư NG P P T NG P CORT OST RO TỪ N ROST N ON V P ẤT TƯ NG TỰ LUẬN V N T Ạ SĨ K O ỌC ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN VIỆN H N L M KHO HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HOÁ HỌC NGU ỄN V N ĐẠ Hà Nội - 2015 NGHIÊN CỨU MỘT S P Ư NG P P T NG P CORT OST RO TỪ N ROST N ON V P TƯ NG TỰ Chuyên ngành: Hóa Hữu Mã số: 60 44 01 14 LUẬN V N T Ạ SĨ K O ỌC NG I H NG N KHO HỌ : PGS.TS Lưu Đức Huy Hà Nội - 2015 ẤT LỜ ẢM N Với lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin chân thành cảm ơn PGS.TS Lưu Đứ u gi o đ t i v nh nhi u thời gi n hướng dẫn, giúp đỡ qu tr nh nghi n u, hồn thành luận v n n y Tơi xin chân thành cảm ơn ThS Nguy n Th i p, CN Ph m Th Thảo v tập thể Phòng Ho họ Steroi v lk loi , Vi n Ho họ , Vi n H n lâm Kho họ v ng ngh Vi t N m giúp đỡ, t o u ki n thuận l i ho t i suốt qu tr nh họ tập v nghi n u Họ vi n Nu Đ MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU hương 1: T NG QUAN V i n t v Steroid u trú Phân lo i M t số steroi ti u iểu .5 Chuyển h vi sinh steroid Phương ph p t ng h p orticosteroid 12 Phương ph p đ hydrat hóa h p ch t 9α-hydroxysteroid .12 Phương ph p t ng h p m ch bên pregnan 13 1.3.2.1 Phương ph p cyanhydrin t ng h p m ch bên pregnan 14 1.3.2.2 Phương ph p etylen t ng h p m ch bên pregnan 17 1.3.3 T ng h p m h n orticoid .26 1.3.4 Phương ph p 1,2- đ hydro hóa h p ch t steroid 30 hương 2: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 2.1 Phương ph p đ hy r t h 9α-hydroxy-androst-4-en-3,17-dion (9α-OH AD) 37 2.1.1 nh hưởng n ng đ i H2SO4 đến hi u su t phản ng 39 2.1.2 nh hưởng nhi t đ đến hi u su t phản ng .40 Phương ph p ng h p nitril v o h p h t 7-cetosteroid 41 2.2.1 Phương ng ng h p nitril v o 2.2.2 Phương ng ng h p nitril v o s ng t nhân K N 41 AD 43 Nghi n u phản ng ng h p nitril v o h p h t n rost-1,4-dien-3,17dion (ADD) 46 2.3 Nghi n u phản ng với m t số t nhân ảo v nh m acbonyl .48 2.3.1 Phản ng với neopentyl glycol .48 2.3.2 Phản ng ADD với ethylen glycol 49 Phản ng ADD với ethyl methyl dioxolan 50 Phương ph p 1,2- đ hydro h h p h t - eto steroi s ng SeO2 51 Phản ng 1,2- đ hydro h 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-di-3-on 51 2.4.2 Phản ng 1,2- đ hydro h pregn-4,16-dien-3,20-dion 53 2.4.2 Phản ng 1,2- đ hydro h 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-4-en-3-on 55 hương 3: T ỰC NGHIỆM 58 T ng h p n rost-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) 59 T ng h p 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) s ng KCN 60 3 T ng h p 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9-dien-3-on (5) 61 3.3.1 S ng t nhân acetone cyanohydrin 61 3.3.2 S ng t nhân KCN 61 Nghi n u phản ng ng nitril v o Nghi n u phản ng với s t ng etone cyanohydrin 61 nhân ảo v nh m acbonyl .62 3.5.1 Phản ng với neopentyl glycol 62 3.5.2 Phản ng với ethylen glycol 62 3.5.3 Phản ng với ethyl methyl dioxolan 62 T ng h p 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) 63 T ng h p pregn-1,4,16-trien-3,20-dion (12) 63 T ng h p 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) 64 KẾT LUẬN 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO 66 P Ụ LỤ BẢNG KÍ ỆU Ữ V ẾT TẮT Ac acetyl AD androstendion ADD androstandiendion Đn điểm n ng hảy Et ethyl g gam h KCN kali cyanua ph phút M Mol l t Me methyl ml mililit Ph phenyl Py pyridin SKBM sắ ký ản mỏng t-BuOH tert-Butanol THF tetrahidrofuran p-TSA para-toluen sunfonic acid 9α-OH AD 9α-hydroxy-androst-4-en-3,17-dion -AD androst-4,9-dien-3,17-dion N MỤ S Đ BẢNG B ỂU Trang ảng 1: huyển h ảng vi sinh sản xu t 7-ceto steroid .11 1: Hi u su t, đ trưng h ảng 2: Khảo s t ảnh hưởng lý v ph n ng đ h p h t .35 i H2SO4 đến hi u su t phản ng đ hy r t h 39 iểu đ ảng iểu đ : S ph thu hi u su t phản ng v o n ng đ : Khảo s t ảnh hưởng : S ph thu i H2SO4 40 nhi t đ đến hi u su t phản ng đ hy r t h 40 hi u su t phản ng v o nhi t đ 41 N MỤ CÁC ÌN VẼ Trang H nh : u trú khung steroi H nh : H nh : T ng qu n v sản xu t steroi t nh m u trú kh ng gi n hi u ản steroi nguy n li u th .9 Hình 1: SKBM c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) so với 9α- OH AD (1) 37 Hình 2: Ph IR c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) 38 Hình 3: Ph H-NMR c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) .38 Hình 4: SKBM c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) so với AD (3) 42 Hình 5: Ph IR c Hình 6: Ph 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) 42 H-NMR c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) 43 Hình 7: SKBM c h p h t 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,179 dion (6) so với -AD (5) 44 Hình 8: Ph IR c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,17-dion (6)44 Hình 9: Ph H-NMR c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,17- dion (6) 45 Hình 10: SKBM c a androst-1,4-dien-3,17-dion (7) so với sản ph m .46 Hình 11: SKBM c a anandrost-1,4-dien-3,17-dion (7) so với sản ph m 47 Hình 12: SKBM c a anandrost-1,4-dien-3,17-dion (7) so với sản ph m 47 Hình 13: SKBM c a 17,17-(2,2-dimethyl propylene dioxy)- androst-1,4-dien-3on (8) so với ADD (7) 48 Hình 14: Ph IR c a 17,17-(2,2-dimethyl propylene dioxy)- androst-1,4-dien-3on (8) 49 Hình 15: SKBM c a 17,17-(etylene dioxy)- androst-1,4-dien-3-on (9) so với ADD (7) 50 Hình 16: Ph IR c a 17,17-(etylene dioxy)- androst-1,4-dien-3-on (9) 50 Hình 17: SKBM c a 7α-hydroxy-17β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) so với 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (3) .52 Hình 18: Ph IR Hình 19: Ph 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) 52 H-NMR 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien 3-on (10) 53 Hình 20: SK M pregn-1,16-dien-3,20-on (12) so với pregn-1,4,16-trien- 3,20on (11) 54 Hình 21: Ph IR c a pregn-1,4,16-trien-3,20-on (12) 54 Hình 22: Ph H-NMR c a pregn-1,4,16-trien-3,20-dion (12) .55 Hình 23: SK M 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) so với 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-4-en-3-on (13) 56 Hình 24: Ph IR c a 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) .56 Hình 25: Ph 1H-NMR c a 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) 57 Hình : M tả ng , thiết phản ng .58 MỞ ĐẦU Vi t N m n m v ng kh hậu nhi t đới gi m đư thi n nhi n ưu đãi với ngu n t i nguy n thi n nhi n, h đ ng th vật phong phú đ ng v th nh ph n, h ng lo i v tr lư ng – l ti m n ng ph t triển r t lớn ho ng nh nghi p H Tuy nhi n, nh ng n m đ u k kh u tới 90% ho t h t l m thuố , 00% thuố ng I, Vi t N m đ ng phải nhập gố steroi v n n ng nghi p H g n l hư N m 007, h nh ph Vi t N m ph uy t hương tr nh trọng điểm quố gi v Ho - t 007 đến t nh đến 0, nh m thú đ y v t o r ú huý h ho ng nghi p Ho - nướ nh ph t triển Ngày 10/01/2014 Th tướng Chính ph có Quyết đ nh số 68 QĐ-TTg phê t Chiến lư c quốc gia phát triển ng nh c Vi t N m gi i đo n đến n m 2020 t m nh n đến n m 0 Theo đ , đến n m 0, thuốc sản xu t nước chiếm 80% t ng giá tr thuốc tiêu th n m, sản xu t đư c 20% nhu c u nguyên li u cho sản xu t thuố nước Ngay t Đ i h i Ho - th ng 007 i n r H N i, ph n lớn ý kiến nh kho họ đ u nhận đ nh, ng nh Ho - Vi t N m muốn th nh ng phải ưu ti n v o ngu n h p h t thi n nhi n sterol đậu tương, fl vonoi … [9], oi l m t nh ng m nh ng nh Trướ đây, l nh v t ng h p lo i thuố ngu n gố steroi , diosgenin solasodin hiết xu t t ios ore v Sol num tương ng đư nguy n li u số n m Tuy nhi n nhi u nh t v ây n y phải tr ng tr n đ t n ng nghi p nhi u thu ho h, o gi th nh ngu n nguy n li u rẻ ti n húng oi o T lâu người t r s sterol th vật (phytosterol) đư tr lư ng r t lớn v thể thu h i đư t t m kiếm hú ý đến phế ph thải ng nghi p gi y, ng nghi p m đường v ng nghi p u đậu tương Đi u n y trở th nh hi n th s u ph t minh r m t số h ng vi sinh phân họn l 10 hương 3: T Ự NG ỆM lo i ung m i, ho h t mu ng ty l ri h, Mer k v Trung Quố lo i ung m i đ u đư tinh hế v t l i điểm s i trướ s ng Kiểm tr đ nh t nh ng ản mỏng tr ng sẵn silufol Mer k 60 F 254 Sắ ký ản mỏng u hế ng sili gel G Mer k 60 F254 v sắ k t ng sili gel Mer k h t -200àm, Celite đ545 (Filter agent) Điểm hảy đo tr n m y oetius ( H Đ ) Ph IR ghi tr n m y FT-IR-IMPACT-410 ng vi n n n K r Ph 1H-NMR đo tr n m y ruker 500 MHz, Bruker 400 MHz, dung môi CDCl3, DMSO h t hu n TMS đư t ng h p t phytosterol phòng th nghi m H họ Steroi v Alk loi , Vi n H họ , Vi n H n lâm Kho họ v ng ngh Vi t Nam ng v thiết phản ng s ng th nghi m đư m tả n 1: n 1: M ứ (1): Sinh h n; (2): Ph u nhỏ giọt; (3): Ống l m kh n l2; (4): M y khu y t , gi nhi t; (5): on t T ng h n 4,9(11)-dien-3,17-dion (2) Th nghiệ 1: ml acid H2SO4 55% đư Khu y đảo nhi t đ 00 u, th m nh u h 0, g 9α-OH n đ u h t đ u hư t n hết S u 6h, kiểm tr SK M th y òn h t đ u, để y n qu đ m 0-50C H m s u tiếp t khu y đảo th m h, kiểm tr SK M th y òn t h t đ u ng phản ng ng th m nướ đ l nh hiết ng hloroform r i r h ng nướ đến pH = 7, l m kh n v t qu y thu đư sản ph m th Kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,066 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t 70,4% Rf = 0,66 (hexan/aceton = 3: 2) Đn : 201- 203oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1659 (C=O v trí 3), 1733 (C=O v trí 17), 1616 (C=C) Ph 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz, δ, ppm): 5,764 (s, 1H, H-4); 5,567 (m, 1H, H-11); 1,361 (s, 3H, CH3-19); 0,884 (s, 3H, CH3-18) Th nghiệ 2: L m tương t qui tr nh th nghi m th y đ i n ng đ i H2SO4 60 % ng phản ng sau 7h, x lý sản ph m, kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0689 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t , % Th nghiệ 3: L m tương t qui tr nh th nghi m th y đ i n ng đ i H2SO4 65% ng phản ng s u 6h, x lý sản ph m, kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0706 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 75,1% Th nghiệ 4: L m tương t qui tr nh th nghi m th y đ i n ng đ i H2SO4 70% ng phản ng s u h, x lý r i kết tinh l i t ethylacetat thu đư 0,0750 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 79,7% Th nghiệ 5: L m tương t qui tr nh th nghi m th y đ i n ng đ i H2SO4 75% ng phản ng s u ,5h, x lý thu đư sản ph m th m u v ng đậm, kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,06920 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 73,6% Th nghiệ 6: L m tương t qui tr nh th nghi m th y đ i n ng đ i H2SO4 80% ng phản ng s u 0,8h, x lý thu đư sản ph m th m u v ng đậm, kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0675 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 71,8% Th nghiệ 7: ml acid H2SO4 70% đư th m nh u h 0, g 9α-OH Khu y đảo nhi t đ 00 u, n đ u h t đ u hư t n hết S u 7h, kiểm tr SK M th y òn h t đ u, để y n qu đ m 0-5 0C H m s u tiếp t khu y đảo th m 7h, kiểm tr SK M th y òn t h t đ u ng phản ng ng th m nướ đ l nh hiết ng hloroform r i r h ng nướ đến pH = 7, l m kh n v t qu y thu đư sản ph m th Kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0700 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 74,5% Th nghiệ 8: L m tương t qui tr nh th nghi m nâng nhi t đ l n 50 ng phản ng s u khoảng 0h, x lý v kết tinh l i sản ph m t ethyl et t thu đư 0,07 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t 76,7% Th nghiệ 9: L m tương t qui tr nh th nghi m nâng nhi t đ l n 50 ng phản ng s u h, x lý sản ph m Kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0780 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t ,0% Th nghiệ 10: L m tương t qui tr nh th nghi m nâng nhi t đ l n 00C ng phản ng s u ,5h v x lý sản ph m Kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0732 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t 77,9% Th nghiệ 11: L m tương t qui tr nh th nghi m nâng nhi t đ l n 50 ng phản ng s u ,5h v x lý sản ph m Kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0643 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t 68,4% T ng h 17α-hydroxy-17β-cyanandrost-4-en-3-on (4 ụng K N Acid aceti ( 8,0 ml) đư th m t t khoảng thời gi n phút 5oC v o h n h p đư khu y đảo n rost-4-en-3,17-dion (AD) (52,0 g) kali cyanua (50,0 g) meth nol ( 00 ml) H n h p đư khu y đảo nhi t đ phòng khoảng thời gi n Để y n qu đ m nhi t đ phòng, s u đ th m acid aceti ( ml) Ph loãng với nướ , lọ kết t t hr,r ng nướ v l m kh t s y hân kh ng o , nhận đư sản ph m tinh s h 57,5 g (3) Hi u su t: 90 % Kết tinh l i t eth nol, nhận đư sản ph m ng tinh thể R f = 0,54 (hexan/aceton = 3: 2) Đn : 174-176o Ph IR (K r, ν, m-1): 3244 (O-H); 2233 ( ≡N); ( =O v tr -3) Ph 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz, δ, ppm): 5,750 (s, 1H, H-4); 2,850 (s, 1H, O-H); 1,207 (s, 3H, CH3-19); 0,993 (s, 3H, CH3-18) 3 T ng h 17α-hydroxy-17β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3-on (5) 3 S ụng c nhân acetone cyanohydrin Hò t n 5,60 g h p h t Δ9- h n h p ml meth nol ng với 6, ml acetone cyanohydrin 0,6 ml ung h KOH 3,3M Khu y đảo 536oC Kiểm tr SK M th y òn h t đ u n n thêm vào 3,4 ml acetone cyanohydrin khu y th m h, th y hết h t đ u thêm ml H 2O Để y n qu đ m, h m s u thêm 13 ml H2O Khu y đảo h n h p phản ng h nhi t đ phòng, h t rắn đư t h r , r ng h n h p meth nol nướ ( : ) v uối ng ng nướ nhận đư 4,9 g sản ph m s h Hi u su t: 80% Kết tinh l i t ethyl etat đư sản ph m ng tinh thể Rf = 0,47 (hexan/aceton = 3: 2) Đn : -183o Ph IR (K r, ν, cm ): 3236 (O-H); 1645 (C=O) Ph 1H-NMR (CDCl3, 400 MHz, δ, ppm): 5,75 ( r s, 1H, H-4); 5,57 (dd, 1H, H-11); 2,97 (s, 1H, O-H); 1,34 (s, 3H, CH 3-19); 0,93 (s, 3H, CH3-18) 3 S ụng c nh n KCN Acid aceti (0, ml) đư c thêm t t khoảng thời gian 30 phút 25 oC vào h n h p đư c khu y đảo c a 1,23 g androst-4,9(11)-dien-3,17-dion 1,72 g kali cyanua 8,5 ml methanol H n h p đư c khu y đảo nhi t đ phòng khoảng thời gian Thêm acid acetic (30 ml), pha loãng với nước, kết t t h r , lọ r a b ng nướ đến pH = v l m kh t s y chân không 45o , thu đư , g sản ph m s h Hi u su t: 85% Kết tinh l i t ethanol, nhận đư c sản ph m d ng tinh thể Sản ph m có R f, Đn , Ph IR 1H-NMR trùng h p với sản ph m nhận đư theo phương ph p s ng etone cyanohydrin Nghi n cứu hản ứng cộng h ni i ụng c ne cyanohydrin Hòa tan 0,3 g h p ch t ADD h n h p ml methanol với 0,8 ml dung d ch NaOH 3,3 M Thêm 0,13 ml acetone cyanohydrin, khu y đảo 3536o S u 6h kiểm tr SK M khoảng 0% sản ph m n m ưới h t đ u uy tr phản ng th m h, đ u xu t hi n v t sản ph m th h i Th m h n , SK M vt sản ph m lớn tương đương h t đ u Tiếp t th m 5h n , h t đ u kh ng hết, h nh ảnh tr n SK M kh ng th y đ i T ng nhi t đ l n 55 gi khoảng 6h, h t đ u kh ng hết, xu t hi n sản ph m th ng phản ng s u khoảng h, thu đư h n h p h t đ u v sản ph m Nghi n cứu hản ứng c ới c c c nh n ả ệ nh cacbonyl Phản ứng ới neopentyl glycol 1,5 g h p h t ADD hò t n ml H2Cl2 đư ung h suốt L m l nh h n h p ng đ l nh xuống (0-5 ), th m tiếp ,75 ml triethyl orthoformat, 2,6 gam neopentyl gly ol v 0, g m p-TS Khu y đảo òng kh N2 trơ S u h ung h huyển m u t m, kiểm tr SK M th y òn h t đ u Để nh phản ng qu đ m t l nh H m s u, tiếp t uy tr phản ng th m h, kiểm tr SK M th y òn t h t đ u, h th m ,5 ml triethyl v kh ng th y kết t hiết ng sản ph m ph ng phản ng ml nướ , để v o ng n đ hloroform, r ng nướ ng t l nh phút, đến pH =7 Kết tinh l i aceton thu đư 1,603 g sản ph m s h Hi u su t 82% R f = 0,65 (hexan/aceton = 3: 2) Đn = 153-154oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1663 (C=O v tr 3); 1626 (C=C); 1107 (C-O ketal) Phản ứng ới ethylen glycol 0,2 g hò t n ,6 ml H 2Cl2, th m v o 2,6 ml ethylene glycol, 1,4 ml triethyl orthoform t v 0,0 g m p-TS Khu y đảo nhi t đ phòng òng kh N2 trơ S u h, SK M th y h t đ u òn r t t, sản ph m h nh n m tr n h t đ u, v v t sản ph m ph ml nướ hiết ng phản ng ng ng hloroform, r h th m 0, ml triethyl ng nướ đến pH =7, t qu y hết ung m i Kết tinh l i eton thu đư 0, g sản ph m s h Hi u su t 79% R f = 0,62 (hexan/aceton = 3: 2) Đn = 174-176oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1657 (C=O v tr ); 1619 (C=C) Phản ứng ới ethyl methyl dioxolan 0,19 g ADD đư th m v o ml ethyl methyl dioxolan v 0,0075 g m p-TS , h t đ u t n hết t qu y ưới p su t th p nhi t đ 750 S u h 0, kiểm tr SK M sản ph m n m tr n h t đ u, v t h t đ u òn r t t, v t sản ph m ph ng phản ng, trung hò ởi ung h N H O3 hiết ng hloroform, r đến pH = Kết tinh l i eton thu đư 0,167 g sản ph m s h Hi u su t đ t 76% Sản ph m Rf, Đn , Ph IR tr ng h p với sản ph m nhận đư theo phương ph p s ng ethylen glycol T ng h 17α-hydroxy-17β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) Hòa tan g h p h t 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on 65 ml tert- butanol, thêm vào 0,875 g SeO v 0,25 ml pyridin H n h p phản ng đư khu y đảo h i lưu nhi t đ 85 0C òng kh N2 trơ Sau 30h, kiểm tr SK M nhận th y vết h t đ u òn r t t có vết sản ph m ph mờ ưới sản ph m h nh ng phản ng t qu y ớt tert– butanol, thêm chloroform hò t n sản ph m r i tiến h nh tinh hế sản ph m ng sắ k t (Sili gel elite = 3: , h ung m i hex n: eton) t h đư 0,56 g sản ph m h nh s h Kết tinh l i t eton đư sản ph m ng tinh thể Hi u su t 56%, Rf = 0,52 (hexan/aceton = 3: 2) Đn : 86-188o Ph IR (K r, ν, m-1): 76 (O-H); 65 ( =O v tr ); 60 ( = ) Ph 1H-NMR (DMSO, 500 MHz, δ, ppm): 7,206 (d, 1H, H-1, J= 10 Hz); 6,110 (dd, 1H, H-2, J1= 10 Hz, J2= Hz); 5,981 (s, 1H, H-4); 6,251 (s, 1H, O- H); 1,208 (s, 3H, CH3-19); 0,905 (s, 3H, CH3-18) T ng h p pregn-1,4,16(17)-trien-3,20-dion (12) Hòa tan 0,2 g h p h t pregn-4,16(17)-dien-3,20-dion 12,5 ml tertbutanol, thêm vào 0,175 g SeO v 0,05 ml pyridin H n h p phản ng đư khu y đảo h i lưu nhi t đ 850C òng kh N2 trơ Sau 28h, kiểm tr SK M nhận th y vết h t đ u òn r t t n m tr n sản ph m h nh ng phản ng t qu y ki t tert– butanol, thêm chloroform hò t n sản ph m Tinh hế sản ph m ng sắ k t (silicagel/celite = 3: , h dung môi hexan: aceton) t h đư 0, g sản ph m h nh s h Kết tinh l i t eton thu đư sản ph m tinh thể Hi u su t 61%, R f= 0,49 (hexan/aceton = 3: 2) Đn : 9-221oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1661 (C=O); 1586 (C=C) Ph 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz, δ, ppm): 7,057 ( , 1H, H-1, J= 10 Hz); 6,232 (d, 1H, H-2, J= 10 Hz); 6,077 (s, 1H, H-4); 6,690 (t, 1H, H-16, J1= 1,5 Hz, J2= 1,5 Hz); 1,267 (s, 3H, CH3-19); 0,970 (s, 3H, CH3-18); 2,260 (s, 3H, CH3CO-21) T ng h p 17α-etynyl-17β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) Hòa tan 0,5 g h p h t 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-4-en-3-on 35 ml tert-butanol, thêm vào 0,45 g SeO v 0,125 ml pyridin H n h p phản ng đư khu y đảo h i lưu nhi t đ 85 0C òng kh N2 trơ Sau 31h, kiểm tr SK M nhận th y v t h t đ u r t mờ n m tr n sản ph m h nh, n m ưới sản ph m h nh ng phản ng t qu y ki t tert– butanol, thêm chloroform hò t n sản ph m Tinh hế sản ph m b ng sắ k : , h ung m i hex n: eton) t h đư v i v t sản ph m ph 0,29 g sản ph m t (sili gel celite = h nh Kết tinh l i t aceton thu đư sản ph m tinh thể Hi u su t 59%, R f= 0,55 (hexan/aceton = 3: 2) Đn : 6-228oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1660 (C=O); 1611 (C=C) Ph 1H-NMR (DMSO, 500 MHz, δ, ppm): 7,202 (d, 1H, H-1, J= 10 Hz); 6,107 (dd, 1H, H-2, J1= 10 Hz, J2= Hz); 5,973 (s, 1H, H-4); 5,319 (s, 1H, O-H); 3,272 (s, 1H, ≡ H); 1,200 (s, 3H, CH3-19); 0,801 (s, 3H, CH3-18) KẾT LUẬN Đã nghi n u th nh ng phương ph p v u ki n tối ưu phản ng đ hydrat h 9αOH AD Hi u su t đ t % Đã nghi n u th nh ng phương ph p t ng h p 7α-hydroxy- 7β- cyanandrost4-en-3-on ng phản ng ng h p K N v o Hi u su t đ t 90% 2 Đã nghi n u th nh ng phương ph p t ng h p 7α-hydroxy- 7βcyanandrost-4,9(11)-dien-3-on ng phản ng K N v acetone cyanohydrin v o 9- Hi u su t tương ng đ t 85% v 80% Đã nghi n u phản ng ng h p acetone cyanohydrin v o Kết h r r ng phản ng ph t p h o s m t h p h t 1(2)-olefin Nghi n u phản ng ADD với neopetyl glycol, t ng h p đư h p h t 7, 7-( , - imethyl propylen ioxy)- n rost- , - ien- -on Hi u su t đt8% Nghi n u phản ng ADD với ethylene glycol, t ng h p đư 7, 7-(ethylen ioxy)- n rost- , - ien- -on Hi u su t đ t 79% 3 Nghi n u phản ng ADD với ethyl methyl dioxolan, t ng h p đư 7, 7(ethylen ioxy)- n rost- , - ien- -on Hi u su t đ t 76% Đã nghi n u th nh ng phương ph p , - đ hy ro h m t số h p h t 3-cetosteroi s ng t nhân SeO2 - Đã t ng h p đư 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on Hi u su t đ t 56% - Đã t ng h p đư pregn-1,4,16-trien-3,20-dion Hi u su t đ t % - Đã t ng h p đư 7α-etynyl-17β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on Hi u su t đ t 59% sản ph m đư NMR nhận đ nh v nghi n u u trú ng Đn , Rf, ph IR 1H- T L ỆU T M K ẢO T ẾNG V ỆT Lưu Đ Huy (1992), o n t n m t số p ơn p p mớ tổn ợp ort o thông qua 17-cetosteroid trung gian, Luận n Tiến s , Vi n H n lâm Kho họ Li n bang Nga, M tx ơv Lưu Đ mớ o tổn Huy (2001), ợp un mớ u n ort ostero , H i ngh Kho họ v sterol, m t n u ên l u ng ngh Ho H u to n quố l n th h i, H N i, tr 249-254 Lưu Đ Huy (2002), “Phương ph p t ng h p h p h t S Rei hstein t pregnyne”, Tạp í D ợ ọ , số (9), tr 23-25 Lưu Đ Huy, Nguy n Th i p (2000), “Phương ph p t ng h p h p h t 7α-hydroxy- 7β-etynylsteroi t ẫn xu t 7β-hy roxy tương ng húng”, Tạp í o ọ , 38(2), tr 40-44 Lưu Đ Huy, Nguy n Th i p ( 00 ), “Epime h tr tiếp northin ron”, Tạp chí Ho ọ , (đ ), tr 78-83 Lưu Đ Huy, Nguy n Th i p (2002), “ ire t α-hy roxyl tion of 7β-acetyl steroi s using phenylio oso i et te”, J.Advanced in Natural Sciences, 3(2), t 179- 184 Lưu Đ Huy, L Th uy n (2000), “T ng h p m t v i ẫn xu t bromopregn-4-en-3-on-20-yne t pregnyne Phản ng H -bromo- 16,17alpha-epoxypregn-4-en-3-on-20-yne với Py HF”, Tạp í o ọ , 38(1), tr 43-47 Lưu Đ Huy, Nguy n Th Hương (2001), “Nghi n u epime h 7α- etynylestr iol”, Tạp í o ọ , 39(4), tr 78 T Minh Ko ng (2007), “M t số ý kiến v ph t triển ng nghi p H Vi t N m”, Tạp í D ợ ọ , 337, tr 39 – T ẾNG N 10 Andryushina V A., Karpova-Rodina N V., Luu Duc Huy (2011), Russian Journal of Applied Biochemistry and Microbiology, 47(3), pp 270-273 11 Baldwin J E., Hoefle G A., Jr Lever O W (1974), J Am Chem Soc, 96(22), pp 7125-7127 12 Baldwin J E., Lever O W., Jr., and Tzodikov N R (1976), J Org Chem, 41(13), pp 2312-2314 13 Batist J N M., Barendse Nicholas C M E., Marx A F (1990), Steroids, 5.5, pp 109 14 Batist J N M., Slobbe A F M., Marx A F (1989), Steroids, 54, pp 321 15 Bergstrom C G., Dodson R M (1961), Chem and Ind., (38), pp 1530 16 Beumel O F., Harris F F (1963), J Org Chem., 28(10), pp 2775 17 Chinn L., Dodson R (1959), J Org Chem., 24(6), pp 879 18 Danishefsky S., Nagasawa K: Wang N (1975), J Org Chem., 40(13), pp 1989-1990 19 Daniewski A R., Wojciechowska W (1982), “Synthesis of orti oi si e h in”, J Org Chem., 47(15), pp 2993-2995 20 Ereoli A., Ruggieri P (1953), J Amer Chem Soc., 75(3), pp 650 Fokin , V V , onov , M V ( 00 ), “ -Acetoxy-pregna-4(5), 9(11), 16(17)triene-21-ol-3,20-dione conversion by Nocardioides simplex VKM Ac- ”, The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology, 87(4), p 319-325 22 Fokina, V V., Sukhodolskaya G V., Baskunov B P., Turchin K F., Grinenko G S , onov , M V ( 00 ), “Mi ro i l onversion of pregna-4,9(11)-diene7α, -diol-3,20-dione acetates by Nocardioides simplex VKM Ac- ”, Steroids, 68(5), p 415-421 23 Fried J., Edvards J A (1972), Organic Reactiones in Steroid Chemistry, N.Y.,2 24 Fujimoto K., Chen Ch.-S et al (1982), J Amer Chem Soc., 104(17), pp 4718 25 Groebel B-T., Seebach D (1977), “Umpolung of re tivity of onyl Compounds through Sunfur - ont ining re gents”, Synthesis, pp 357-367 26 Gumulka M., Kurek A., Wicha I Pol (1982), J Chem., 56, pp 741-747 27 Halpern O., Djerassi C (1959), J Am Chem Soc., 81(2), pp 439-441 28 Hofmeister H., Annen K et al (1978), Chem Ber., 111, pp 3086 29 Hofmeister H., Annen K., Laurent H Liebigs (1987), Ann Chem., pp 423 30 Horiguchi Y., Nakamura E., Kuwajima I (1986), J Org Chem., 51(22), pp 4323 31 Huffmann J W., Arapakos P G (1965), J Org Chem., 30(5), pp 1604 32 Inhoffen H H., Koster H (1939), Ber., 72, pp 595 33 Inhoffen H H., Logemann W et al (1983), Ber., 71, pp 1024 34 Kanojia R M., Allen G O et al (1979), J Med Chem., 22, p 1538 35 Kanojia R M., Yarmchuck L., Scheer I (1974), J Org Chem., 39(15), p 2304 36 Kamernitsky A V., Turuta A M, Fadeeva T M., Istomina Z I (1985), Synthesis, 3, pp 326 37 Kapur J C., Marx A F., Verweij J (1988), Steroids, 52, pp 181 38 Lever O W., Jr (1976), Tetrahedron, 32, pp 1943-1971 39 Moriarty R M., Hu H., Gupta S C (1981), Tetr Lett., 22, pp 1283 40 Moriarty R M., John L S., Du P C (1981), J Chem Soc Chem Commun, pp 641 41 Nan Xing Hu, Yoshio Aso et al (1986), Tetr Lett., 27(50), pp 6099 42 Nicholas K M ( 1987), Acc Chem Res., 20(6), pp 207 43 Nitta I., Fujimori S., Ueno H (1985), Bull Chem Soc Jp., 58, pp 978 44 Nitta I., Fujimori S., et al (1985)., Bull Chem Soc Jp., 58, pp 981 45 Ogata Y., Urasaki I (1971), J Org Chem., 36(15), pp 2164 46 Pat 57062298 (1982), JP 47 Pat 57197299 (1982), Jp CA., 98, 215894d 48 Pat 53127 455 (1978), Jp CA., 91, 74781f 49 Pat 0253 415 AI (1987), EU CA., 108, 221967w 50 Pat 0294 911 AI (1988), EU CA., 111, 39674h 51 Pat 02 207 096 (1990), Jp CA., 114, 43310r 52 Pat 282 695 (1990), D Germany CA., 115, 9129z 53 Pat 582644 (1986), USA CA., 105, 79230t 54 Pat 0188 010 AI (1986), EU CA., 105, 209280x 55 Pat 147 669 (1979), D Germany CA., 96, 20370f 56 Pat 82 622, 96 (1982), Jp CA., 97, 145148s 57 Pat 500 461 (1985), USA CA., 103, 22844a 58 Pat 427486 AI (1986), F Germany CA., 105, 97805p 59 Pat 68400 AI (1988), EU CA., 109, 170717 60 Pat 441 647 (1975), F Germany CA., 83, 28456r 61 Pat 023 122 (1970), F Germany CA., 76, 72715d 62 Pat 625306 BI (1977) F Germany CA., 88, 105656 63 Pat 63 369 AI (1982) EU CA., 98, 198593k 64 Pat 434 448 AI (1986), F Germany CA., 105, 115286b 65 Pat 2140 291 (1973) F Germany CA., 78, 124811v 66 Pat 53 845 AI (1982), EU CA., 97, 182740z 67 Pat 57 139, 099 (1982), Jp CA., 98, 72567m 68 Pat 71 178 (1983), EU CA., 99, 38712 69 Pat 2156255 (2000), RU 70 Pat 281394 (1990), DD 71 Pat 263569 (1988), EP 72 Pat 147669 (1981), DD 73 Pat 0189951 (1986), EP 74 Pat 0153001 (1985), EP 75 Pat 138054 (1986), PL 76 Pat 138150 (1986), PL 77 Pat 141469 (1987), PL 78 Pat 2521567 (1983), FR 79 Pat 4342702 (1982), US 80 Pat 4357279 (1982), US 81 Pat 960928 (1964), GB 82 Pat 065146, US 83 Pat 7802302, NL 84 Pat 20528, DDR 85 Pat 2806687, DE 86 Pat 491 7827, US 87 Pat 4839282 (1989), US 88 Pat 1361287 (2002), CN 89 Pat 3715376 (1973), US 90 Pat 1303638 (1973), GB 91 Pat 1364193 (1974), GB 92 Pat 3780177 (1973), US P rez , Falero A., H Luu Duc, Y Balcinde (2006), J Ind Microbiol Biotachnol, 148, pp 719-723 94 P Fernandes, A Cruz, B Angelova, H.M Pinheiro , J.M.S Cabral ( 20 03 ) , “ Microbial conversion of steroid compounds: recent developments”, Enzyme and Microbial Technology, 32, 688-705 95 Rothman E S, Perlstein T., Wall M E (1960), J Org Chem., 25(11), pp 19661968 96 Salce L., Hazen G G., Schonewaldt E F (1970), J Org Chem., 35(5), pp 1681 97 Seebach D (1974), Chemistry and Industry, pp 687-692 98 Tamura Y., Yakura T et al (1985), Tetr Lett., 26(32), pp 3837 99 Van Rheenen V., Shephard K P (1979), J Org Chem., 44(9), pp 1582 100 Westmijze H., Kleijn H., Vermeer P et al (1980), 2665 T ẾNG NG 101 Меркушев Е Б ( 987), Успехи химии, 56(9), C 1444 Tetr Lett., 21(27), pp 102 Меркушев Е Б , Карпицкая Л Г , Новосельцева Б И , Райда В С ( 978), Изв АН СССР Сер хим, (5), C 1153 103 Меркушев Е Б , Карпицкая Л Г , Новосельцева Б И ( 979), ДA , 245(3), C 607 104 Меркушев Е Б , Шварцберг М С (1978), ЙодисТые органические соединения и синТезы на их основе, Томск ГПИ, С 05 Физер Л , Физер М ( 96 ), СТероиды, М Мир P Ụ LỤ l : ng ố kho họ Lưu Đ c Huy, Ph m Th Thảo, Nguy n Th Di p, Lưu Đ c Hùng, Nguy n V n Đ i, Tr n Phương Đ t, Bùi Th Hương Gi ng, Đ Quang Huy, p ơn p p u tổn ợp 7α-hydroxy- 7β-nitrilandrosten, T p h H họ , T , số – 2014 l Ph IR c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) l Ph 1H-NMR c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) l Ph IR c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) l Ph 1H-NMR c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) l Ph IR c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,17-dion (6) l Ph 1H-NMR c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,17dion (6) l Ph IR c a 17,17-(2,2-dimethyl propylen dioxy)- androst-1,4-dien-3on (8) l Ph IR c a 17,17-(ethylen dioxy)- androst-1,4-dien-3-on (9) l 10: Ph IR 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) l 11: Ph 1H-NMR 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) l Ph IR c a pregn-1,4,16-trien-3,20-on (12) l Ph 1H-NMR c a pregn-1,4,16-trien-3,20-dion (12) l Ph IR c a 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) l (14) Ph H-NMR c a 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on ...NGHIÊN CỨU MỘT S P Ư NG P P T NG P CORT OST RO TỪ N ROST N ON V P TƯ NG TỰ Chuyên ngành: Hóa Hữu Mã số: 60 44 01 14 LUẬN V N T Ạ SĨ K O ỌC NG I H NG N KHO HỌ :... m vi luận v n n y, húng t i đ t r nhi m v nghi n u m t số phương ph p t ng h p orti osteroi t h p h t 7-cetosteroi s u: Phương ph p đ hy r t h 9α-hydroxy androst-4-en-3,17- ion (9α-OH AD) Phương. .. H3 O hương 2: KẾT QUẢ V T ẢO LUẬN Đã tiến h nh nghi n u m t số phương ph p t ng h p orticosteroi t 7cetosteroi s u:  Phương h ề hy h 9α-OH AD O O H2SO4 OH O O  Phương h cộng h ni i h chấ 17-cetosteroid