Thăm dò ảnh hưởng của cường độ và thời gian chiếu sáng đến sinh trưởng, khả năng cố định nitơ của hai chủng vi khuẩn lam nostoc calcicola, cylindropermum licheniforme

Mở đầu Lạc vừa công nghiệp, vừa thực phẩm quan trọng, có giá trị kinh tế cao Để nâng cao suất sản l-ợng lạc, bên cạnh việc tạo giống lạc có suất cao chất l-ợng tốt nên áp dụng biện pháp kỹ thuật vào nông nghiệp Trong việc sử dụng nguồn phân bón vô hữu đ-ợc đẩy mạnh để tăng sù béi thu cđa mïa vơ Tuy vËy sư dơng nguồn phân bón, đặc biệt phân bón hóa học đà để lại hiệu xấu cho môi tr-ờng n-ớc đất bị thoái hóa Việc sử dụng phân bón hóa học để nâng cao suất trồng đà để lại hậu ô nhiễm môi tr-ờng làm giảm độ phì đất, đồng thời làm tăng l-ợng Nitơ(vô cơ) nông phẩm có hại cho sức khỏe ng-ời Để hạn chế tiêu cực môi tr-ờng ng-ời ta đà sử dụng nguồn phân bón sinh học để thay phần ph©n bãn hãa häc ViƯc sư dơng vi khn lam cố định Nitơ làm nguồn phân bón cho ruộng lúa nh- hoạt động Nitơ địa ph-ơng, lÃnh thổ khác để giành đ-ợc ý nhà khoa học, đặc biệt vùng trồng lúa Châu á, Nhật Bản, Trung Quốc, ấn Độ, Ai Cập Ngày vi khuẩn lam đ-ợc tập trung sản xuất quy mô lớn, đ-ợc sử dụng nh- tác nhân hữu hiệu biện pháp sinh học, xử lý nguồn n-ớc thải, khai thác giá trị dinh d-ỡng d-ợc liệu làm thức ăn cho chăn nuôi Ngoài việc cố định đạm cung cấp Nitơ cho trồng, nuôi cấy vi khuẩn lam ruộng lúa n-ớc ta làm tăng hàm l-ợng Oxi hòa tan, loại trừ đ-ợc tích lũy sắt sun phát khử độc cho lóa, sù ph¸t triĨn cđa vi khn lam cã thể làm tăng khả giữ n-ớc, độ thoáng khí, cải tạo đất mặn chua Vi khuẩn lam tiết vào môi tr-ờng chất có hoạt tính sinh häc cao kÝch thÝch sù sinh tr-ëng cđa c©y trồng Điều đà cho thấy khả ứng dụng vi khuẩn lam vào thực tiễn sản xuất lớn Xuất phát từ thực tế tiến hành tìm hiểu đề tài: Thăm dò ảnh h-ởng hai chủng vi khuẩn lam cố định Nitơ lên nảy mầm sinh tr-ởng giống lạc L20 Sản Dầu Qua việc thăm dò ảnh h-ởng vi khuẩn lam cố định đạm lên nảy mầm sinh tr-ởng lạc, sở ®ã ®Ị xt sư dơng chóng nh- mét biƯn ph¸p sinh học để tăng suất lạc thay phần phân bón hóa học Ch-ơng tổng quan tài liệu 1.1 Vài nét tình hình nghiên cứu vi khuẩn lam giới Việt Nam 1.1.1 Tình hình nghiên cứu vi khuẩn lam giới Vi khuẩn lam sinh vËt tù d-ìng cã kÝch th-íc hiĨn vi sèng ë nhiỊu m«i tr-êng nh-ng chđ u sèng m«i tr-êng n-íc ViƯc nghiªn cøu vi khn lam trªn thùc tế đà có từ lâu đ-ợc tiến hành theo nhiều h-ớng khác nhau.Tr-ớc hết điều tra phân loại tìm hiểu quy luât phân bố chúng, sau sâu vào tìm hiểu chất trình trao đổi chất vi khuẩn lam cuối nghiên cứu ứng dụng phục vụ lợi ích ng-ời [5] Những công trình nghiên cứu vi khuẩn lam đ-ợc tiến hành đầu kỷ XIX Cơ sở hệ thống phân loại vi khuẩn lam Thuret (1875) đặt móng sau đ-ợc Kirchner (1900) phát triển, với đóng góp Stizenberger (1860) Sach (1874) sau hàng loạt công trình phân loại tảo lam nhà tảo học có tên tuổi khác đà khiến cho tri thức tảo lam tăng lên nhiều[18] Sau năm 1914, đà xuất hàng loạt hệ thống phân loại vi khuẩn lam, số l-ợng, loài ngày tăng Đó công trình Elenkin (1916, 1923, 1936), Borch (1914, 1916, 1917), Geitle (1925, 1932) Những năm nhà tảo học Liên Xô (cũ) đà tiếp tục phát triĨn theo h-íng nµy nh- (Gollebax, kosonki, Polianki, 1953) víi công trình gần Kondraticva (1986) H-ớng nghiên cứu phân loại vi khuẩn lam vùng nhiệt đới coi nh- : P Fremy (1930) ng-ời đà có công khai phá[18] Cùng với h-ớng phân loại h-ớng nghiên cứu khả đồng hóa Nitơ phân tử Frank (1889) ng-ời nghiên cứu vấn đề này, sau Drew (1928) đà nghiên cứu số chủng vi khuẩn lam, chủng cho thấy chúng có khả đồng hóa Nitơ phân tử Cùng với thời gian có công trình nghiên cứu Frich (1938,1939) đà tìm hiểu nguyên nhân số vùng đất chuyên trồng lúa nhiều năm không phân bón ấn Độ mà lúa phát triển thu hoạch tốt kết cho thấy đất trồng đà tích lũy l-ợng đạm đáng kể vi khuẩn lam tổng hợp Tiếp đến hàng loạt công trình cña Fogg (1950, 1951, 1956, 1962); Singh (1941, 1961); Herissa (1946, 1952); Watababe (1950, 1956, 1965, ) đà tìm hiểu mối quan hệ cố định Nitơ với hoạt động khác vi khuẩn lam [17] Trong thập kỷ gần vi khuẩn lam làm nguồn phân bón cho ruộng lúa đà dành đ-ợc nhiều ý nhiều nhà khoa học Đặc biệt vùng trồng lúa Châu á: Nhật Bản, ấn Độ, Trung Quốc, Ai Cập, Các hoạt hóa enzim trình cố định Nitơ mối quan tâm nhiều nhà khoa học nghiên cứu nh-: Singh (1960), Stina (1970) Về sau hàng loạt công trình nghiên cứa vi khuẩn lam độc đ-ợc Theodosese alson - Đại học tổng hợp Minnesoto (Mỹ) tiến hành Ông đà thu đ-ợc nhiều mẫu nở hoa màu xanh phân lập đ-ợc nhiều vi khuẩn lam thuộc chi Microcystis Anabaena Từ sau nhiều nghiên cứu độc tố vi khuẩn lam thủy vực đ-ợc tiến hành toàn giới 1.1.2 Tình hình nghiên cứu vi khuÈn lam ë ViÖt Nam ë viÖt nam, ch-a có tài liệu chuyên khảo tảo vi khuẩn lam đất Những dẫn liệu vi khuẩn lam P Fremy (1927), ông đà công bố loài vi khuẩn lam tìm thấy Việt Nam sở định loại mẫu D.Gaumont thu thập Ng-ời Việt Nam công bố kết đàu tiên tảo lam Cao Ngọc Ph-ơng (1964), bà đà viết 23 taxon tảo lam sát mặt đất Sài Gòn Đà Lạt, có 11 chi với chi có tế bào dị hình chi tế bào dị hình số loài khoa học Tháng 1/1966, phân tích n-ớc hồ Hoàn Kiếm thời gian nở hoa, nhà tảo học ng-ời Hunggari T Horbaggi đà xác định đ-ợc 24 taxon vi khuÈn lam thuéc 14 chi víi chi có tế bào dị hình 13 chi tế bào dị hình [17 ] Trong báo cáo vi khuẩn lam cố định Nitơ đất trồng lúa miền Bắc Việt Nam D-ơng Đức Tiến (1977) đà có công bố 13 loài vi khuẩn lam thuộc chi với chi có tế bào dị hình với đặc điểm phân loại khả cố định Nitơ chúng Trần Văn Nhị, Trần Hà, Đặng Diễm Hồng, D-ơng Đức Tiến (1984) đà nâng tổng số vi khn lam ë ViƯt Nam lªn tíi 40 taxon, gåm 17 chi ®ã cã 16 chi cã tÕ bào dị hình chi tế bào dị hình[15] Nghiên cứu vi tảo vi khuẩn lam đất ngoại thành Hà Nội vùng lân cận, Nguyễn Thị Minh Lan (2000) đà tiến hành nghiên cứa điều tra thành phần loài vi khuẩn lam ruộng lúa, đà phát đ-ợc 50 loài thuộc 19 chi Ưu thuộc chi Nostoc Anabaena, đồng thời phân lập số chủng vi khuẩn lam nhằm thăm dò khả cố định Nitơ chúng[13] Trên vùng đất chua mặn huyện Thái Thuỵ (Thái Bình), Đoàn Đức Lân (1996) đà phân lập đ-ợc 15 loài vi khuẩn lam cố định đạm nghiên cứu thăm dò khả cố định Nitơ chúng So với kết khảo sát ruộng lúa vùng n-ớc vi khuẩn lam cố định Nitơ vùng đất mặn có phần đa dạng chi Nostoc vÉn chiÕm -u thÕ khu vùc nghiªn cøu[14] khu vực Bắc Trung Bộ, Đỗ Thị Tr-ờng (1998) đà phát đ-ợc 45 loài d-ới loài vi khuÈn lam thuéc 16 chi, hä, bé ë đất trồng lúa Huyện Hòa Vang - Thành Phố Đà Nẵng[19] Nguyễn Công Kình (2001), nghiên cứu mẫu đất từ cánh đồng lúa 19 thành phố Vinh vùng lân cận đà phát đ-ợc 10 loài d-ới loài vi khuẩn lam[9] Nguyễn Đình San (2000) đà phát 29 loài vi khuẩn lam thủy vực n-ớc bị ô nhiễm tỉnh Thanh Hóa Nghệ An Hà Tĩnh[20] Nguyễn Lê Vĩnh, Võ Hành (2001) đà phát đ-ợc 69 loµi Vµ d-íi loµi thc 15 chi, hä nghiên cứu vi khuẩn lam đất chua mặn huyện Thạch Hà - Hà Tĩnh[21] Gần nhiều công trình nghiên cứu của Lê Thị Thuý Hà (2004) đà phát đ-ợc 56 loài vi khuẩn lam sông Cả[3] Hồ Sỹ Hạnh, Võ Hành, D-ơng Đức Tiến (2005-2006) đà công bố taxon bậc loài d-ới loài vi khuẩn lam loại hình đất trồng tỉnh Đắk Lắk, cụ thể: đất trồng lúa gặp 62 loài d-ới loài, đất trồng gặp 46 loài d-ới loài, đất trồng cà phê gặp 23 loài d-ới loài Có thể nói công trình Việt Nam loại hình đất tây nguyên nói chung Đắk Lắk nói riêng[4] Nhìn chung, công trình nghiên cứu chủ yếu đ-ợc thực đến mức độ xác định thành phần loài khu vực nghiên cứu, nghiên cứu theo h-ớng ứng dụng ch-a thu hút đ-ợc quan tâm mức 1.1.3 Nghiªn cøu vi khn lam øng dơng thùc tiƠn sản xuất Trong thập kỷ gần vi khuẩn lam đà lôi đ-ợc ý nhiều nhà khoa học thuộc lĩnh vực khác nhau: Thực vËt häc, Vi sinh vËt häc, Sinh lý häc, Sinh hóa học, Công nghệ sinh học trồng trọt Những năm gần vi khuẩn lam đ-ợc tập trung nghiên cứu sản xuất quy mô lớn để khai thác giá trị dinh d-ỡng, d-ợc liệu, sản xuất mỹ phẩm làm thức ăn chăn nuôi Vi khuẩn lam Spirulina có hàm l-ợng prôtêin cao (chiếm 60 -70% trọng l-ợng khô) giàu Vitamin, khoáng chất chất có hoạt tính sinh học cao nên đ-ợc nuôi trồng nhiều n-ớc giới Những nghiên cứu ứng dụng Spirulina đ-ợc nghiên cứu Việt Nam hai thập kỷ qua[18] Tảo xoắn Spirulina plantensis đ-ợc nuôi trồng nhiều n-ớc Thế Giới Việt Nam theo quy mô công nghiệp Sinh khối chúng đ-ợc ứng dụng y học, chăn nuôi xử lý n-ớc thải Sắc tố tảo Spirulina nh- phicobilin có giá trị nhuộm màu thực phẩm, mỹ phẩm (Wotababe, 1970) điều chế Vitamin B12[18] Một số loài vi khuẩn lam tác động đến trình hình thành phì d-ỡng thủy vùc n-íc ngät HiƯn t-ỵng n-íc në hoa vi khuẩn lam gây thủy vực đà gây ảnh h-ởng tới mùi vị chất l-ợng n-ớc dùng cho sinh hoạt dùng cho công nghiệp Hiện nay, ô nhiễm môi tr-ờng trở thành hiểm họa sống hành tinh vi khuẩn lam đ-ợc sử dụng nh- tác nhân hữu hiệu biện pháp sinh học xử lý nguồn n-ớc thải, chúng góp phần loại trừ chất độc hại làm tăng hàm l-ợng Oxi n-ớc Một số vi khuẩn lam có khả cung cấp nguồn đạm tự nhiên cho trồng, tác dụng cải tạo đất giữ cân sinh thái tự nhiên cho đồng ruộng Vi khuẩn lam trực tiếp gắn với cố định Nitơ phân tử khí (N 2) thành Nitơ hữu (NH4+) số loài vi khuẩn lam sau chúng đ-ợc sử dụng cho trình tổng hợp Axit amin Protein Sau vi khuẩn lam chết khoáng hóa Nitrat hóa bổ xung nguồn đạm cho đất cung cấp cho thực vật bậc cao[12] Chính vi khuÈn lam cã vai trß quan träng nh- vËy nên năm qua nhiều n-ớc giới Việt Nam đà sử dụng vi khuẩn lam làm nguồn phân bón sinh học ấn Độ, nhiều địa ph-ơng ng-ời nông dân có tập quán ngăn chia bờ, giữ n-ớc thời kỳ ruộng bỏ hóa để tạo điều kiện cho vi khuẩn lam phát triển nhằm tăng độ phì đất ruộng tr-ớc gieo trồng[17] Việc lây nhiễm vi khuẩn lam vào ruộng lúa để làm nguồn phân bón Sinh học đà đ-ợc tiến hành nhiều n-ớc giới Thái Lan, ng-ời ta đà nuôi đại trà số loài: Anabaena siamensis, Calothrix sp, Hapalosiphon sp Mỹ, hÃng Cyanotech sản xuất vi khuẩn lam d-ới dạng phân bón từ loài sống mặt đất có khả cố định 100kg Nitơ/ha mùa vụ sinh tr-ởng [8] NhËt cịng nh- c¸c n-íc kh¸c khu vực Đông Nam đà lây nhiễm vi khuẩn lam đ-ờng sản xuất công nghệp vào ruộng lúa đà làm tăng suất điểm nghiên cứu lên 2, 7, 8, 19 28% sau năm Theo tính toán lây nhiễm vi khuẩn lam có khả thay cho 60 kg đạm sunfat/ha Trên đất lóa Ai CËp viƯc sư dơng Tolypothrix tenuis ®iỊu kiện không bón phân đạm, lân, suất lúa tăng 4,2% Còn sử dụng Anabaena (phân lập từ địa ph-ơng) dù bón phân đạm hay không suất lúa tăng 31,6% đồng thời lúa hấp thụ Nitơ tăng đ-ợc 25 - 42,5% (Hamdi, 1986) Trung Quốc, lây nhiễm vi khuẩn lam vào ruộng lúa trung bình tăng từ 10 - 20% Bằng việc lây nhiễm vi khuẩn lam vào ruộng lúa viện lúa quốc tế (IRRI) cho thấy vi khuẩn lam đà cố định Nitơ khoảng từ 40 - 80 kg Nitơ/ ha[17] Trần Đăng Kế (1992), đà tìm hiểu ảnh h-ởng nguồn dinh d-ỡng đạm đến hàm l-ợng số chất hữu có chứa Nitơ tế bào đà nuôi trồng vi khuẩn lam Anbaena cylindraca Dịch nuôi cấy Anabaena cylindraca từ 60 - 150 ngày tuổi có tác dụng kích thích nảy mầm hạt lúa Vi khuẩn lam tiết vào môi tr-ờng chất có hoạt tính sinh học ảnh h-ởng tốt đến sinh tr-ởng trồng[11] Trần Văn Nhị, Trần Hà, Đặng Diễm Hồng, D-ơng Đức Tiến (1984)[15] Đà tiến hành nghiên cứa vi khuẩn tảo n-ớc Anabaena sphaerica Nostoc muscorum Kết cho thấy ruộng đ-ợc nhiễm vi khuẩn lam sinh khèi cđa nã tÝch lịy kh¸ lín 0,5 - kg tảo /m2 nên hàm l-ợng mùn tăng lên rõ rệt Vi khuẩn lam lây nhiễm đà làm tăng hàm l-ợng Nitơ đất Ngoài chúng có khả tổng hợp tiết vào môi tr-ờng sè ho¹t chÊt sinh häc kÝch thÝch sinh tr-ëng lóa, đà làm tăng suất 44% 29% t-ơng ứng bón phân đạm hóa học Trên ruộng lúa n-ớc huyện Hoài Đức (Hà Nội) năm (1988,1989, 1990) đà thí nghiệm lây nhiễm loµi vi khuÈn lam Aphanothes sp, Nostoc muscorum, Anabaena sphaerica, Fischerrella sp, Scytonema sp víi diƯn tÝch 240m2 –1 lây nhiễm vi khuẩn lam vào ruộng lúa đ-ợc tiến hành cấy 10 15 ngày Kết cho thấy vi khuẩn lam cố định Nitơ có tác dụng tốt tới suất lúa tiết kiệm urê, hàm l-ợng mùn Nitơ tổng số đất ruộng tr-ớc sau l©y nhiƠm vi khn lam[17] Trong rng lúa cố định đạm vi khuẩn lam thực loại hình cần thiết nhờ đà trì ổn định suất hệ thống canh tác, sở dấu hiệu đà có thông tin n-ớc thấy việc dïng vi khn lam ®Ĩ bãn cho lóa nh»m thay phần đạm tăng suất trồng, cải tạo đất giảm thiểu ô nhiễm môi tr-ờng dùng phân bón hóa học gây điều kiện Tuy nhiên, nguồn đạm cho sản xuất mà cần sử dụng chúng nh- yếu tố giúp cho trồng tăng suất 1.2 Một vài nét lạc 1.2.1 Nguồn gốc lạc Cây lạc có tên khoa học Arachis hypogaea L trồng cạn, ngắn ngày thuộc họ đậu Fabaceae Trong thời gian dài nhiều tác giả phân vân nguồn gốc lạc kỷ XIX nhiều tác giả cho rằng: Cây lạc có nguồn gốc châu phi Nh-ng dựa vào tài liệu nhà sử học, tự nhiên học, khảo cổ học ngôn ngữ học, ng-ời ta cho rằng: Cây lạc có nguồn gốc từ Nam Mỹ [12] Xuất phát từ Nam Mỹ lạc phân bố sang Châu Âu, châu á, tới quần đảo Thái Binh D-ơng cuối sang Đông Nam [2] Việt Nam lịch sử trồng lạc ch-a đ-ợc xác nhận rõ ràng Sách Vân loại ngữ Lê Qúy Đôn ch-a đề cập đến Nh-ng vào tên gọi mà xét đoán danh từ lạc từ hán Lạc hoa sinh l từ mà ng-ời Trung Quốc gọi cho lạc Vì vậy, lạc đến n-ớc ta từ Trung Quốc vào khoảng kỷ XVII, XVIII[16] Nếu xét mặt địa lý có khả lạc truyền vào Việt Nam từ Philippin, Malayxia, Indonexia theo nhà buôn bán nhà truyền giáo Châu Âu vào kỷ XV [15] 1.2.2 Giá trị lạc cấu kinh tế n-ớc ta, lạc đ-ợc xem trồng có vị trí quan trọng n-ớc, lạc có giá trị kinh tế cao nhiều mặt Lạc nguồn bổ sung đạm, chất béo, vitamin khoáng chất cần thiết cho ng-ời Đặc biệt dầu lạc không chứa Cholesterol chất làm sơ cứng động mạch, không bị ôi nhanh điều kiện bảo quản bình th-ờng[1] Theo phân tích Lê DoÃn Diên (1993) thành phần dinh d-ỡng lạc nh- sau: Thành phần(%) Vỏ Vỏ lụa Lá mầm Glutxit 10,6 - 21,2 48,3 - 53,2 31,2 Protein 4,8 - 7,2 11 - 13,4 43,2 Lipit 1,2 - 2,8 0,5 - 1,9 16,6 Xenlulo 65,7 - 79,3 21,4 - 34,9 - Kho¸ng 1,9 - 4,6 21 6,3 Tinh bột 0,7 - - Ngoài ra, lạc dùng chăn nuôi gia súc, gia cầm, cải tạo đất, luân canh tăng suất đảm bảo nhu cầu sống ng-ời sản suất xuất thu nguồn ngoại tệ cho đất n-ớc 1.2.3 Các thời kỳ sinh tr-ởng lạc Chu kỳ sinh tr-ởng phát triển lạc khoảng 85 - 180 ngày chia làm thời kỳ: 1.2.3.1 Thời kỳ nảy mầm Nảy mầm giai đoạn chuyển biến hạt từ trạng thái nghỉ sang trạng thái hoạt động Thời kỳ này, yêu cầu nhiệt độ tối thích 25 - 300C, độ ẩm 35 - 40%, hàm l-ợng Oxi đủ để hạt hô hấp mầm sinh tr-ởng 1.2.3.2 Thời kỳ Thời kỳ đ-ợc tính từ lạc mọc đến bắt đầu hoa Thời kỳ nµy kÐo dµi 25 - 45 ngµy tuú thuéc vµo giống lạc, nhiệt độ độ ẩm Giai đoạn cần ý mối t-ơng quan sinh tr-ởng thân chính, cành, rễ phân hoá mầm hoa Yêu cầu n-ớc thời kỳ khoảng 17 - 29% so với tổng l-ợng 10 BảNG 26 T-ơng tự nh- vậy, giống lạc Sản Dầu C-ờng độ hô hấp lô (3,4,5) cho giá trị cao so với lô đối chứng (n-ớc máy BG11) Trong lô có ảnh h-ởng tốt nhất, thấp lô thời điểm ( 24h, 48h 72h) C-ờng độ hô hấp tăng thời điểm 24h, 48h giảm thời điểm72h, c-ờng độ hô hấp trao đổi mạnh thời điểm 48h Nh- vậy, với nồng độ dịch vẩn VKL khác c-ờng độ hô hấp khác nhau, nồng độ dịch vẩn VKL lô có tác dụng tốt lên lạc C-ờng độ hô hấp tăng thời điểm 24h, 48h giảm dần thời điểm 72h, c-ờng độ hô hấp trao đổi mạnh thời điểm 48h Trong hai giống lạc giống L20 có tác dụng lớn giống Sản Dầu, hai chủng VKL chủng Nostoc calcicola có tác dụng tốt chủng Calothrix bervissima 3.2.5 ảnh h-ởng dịch vẩn hai chủng VKL đến hoạt độ enzim catalaza hạt mầm lạc Hoạt độ enzim Catalaza đ-ợc xác định dựa vào l-ợng peroxit(H2O2) bị thuỷ phân d-ới tác dụng enzim Catalaza, cách chuẩn độ với dung dịch KMnO4 Kết thu đ-ợc thể bảng SS(%) L20 SảnDầu 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 lo1 lo2 lo3 lo4 lo5 lo3 lo4 lo5 24h 48h 72h 24h 48h 72h Thời gian Biểu đồ 4: Hoạt độ enzim Catalaza hạt mầm giống lạc L20 Sản Dầu 27 Bảng6 28 Từ kết bảng biểu đồ cho thấy lô thí nghiệm đ-ợc xử lý dịch vẩn VKL hoạt độ enzim Catalaza cao so với đối chứng (n-ớc máy BG11) Đối với giống lạc L20, lô (3,4,5) hoạt độ enzim Catalaza cao so với đối chứng (n-ớc máy) Trong cao lô 4, v-ợt đối chứng (n-ớc máy) 45,3% (24h), 58,0% (48h) 83,7% (72h) chủng VKL Nostoc calcicola Còn chủng Calothrix bervissima v-ợt 33,8% (24h), 54,3% (48h) 72,9% (72 h) So với lô lô lô cho giá trị thấp T-ơng tự nh- vậy, giống lạc Sản Dầu lô (3,4,5) hoạt độ enzim Catalaza cho giá trị cao so với đối chứng thời điểm (24h, 48h 72h) Trong lô có ảnh h-ởng tốt thấp lô hai chủng VKL Nh- vậy, dịch vẩn VKL có ảnh h-ởng tốt đến hoạt độ enzim Catalaza Trong hai giống lạc giống L20 có ảnh h-ởng tốt giống lạc Sản Dầu, hai chủng VKL chủng Nostoc calcicola ảnh h-ởng tốt chủng Calothrix bervissima Nhận xét : Qua kết thu đ-ợc cho thấy dịch vẩn VKL Nostoc calcicola Calothrix bervissima có ảnh h-ởng tốt đối tiêu sinh lý nảy mầm hạt lạc Các lô đ-ợc xử lý dịch vẩn VKL cao so với đối chứng (n-ớc máy BG11), lô có ảnh h-ởng tốt nhất, lô có ảnh h-ởng thấp Trong hai giống lạc giống L20 có ảnh h-ởng tốt giống lạc Sản Dầu, hai chủng VKL chủng Nostoc calcicola có ảnh h-ởng tốt chủng Calothrix bervissima 3.3 ảnh h-ởng dịch vẩn hai chủng VKL lên số tiêu sinh lý lạc giai đoạn non Ngoài việc nghiên cứu ảnh h-ởng VKL lên tiêu sinh lý nảy mầm hạt lạc, xem xét ảnh h-ởng lên hàm l-ợng diệp lục, c-ờng độ quang hợp, c-ờng độ hô hấp lạc giai đoạn non 29 3.3.1 ảnh h-ởng dịch vẩn hai chủng VKL đến hàm l-ợng diệp lục lạc giai đoạn non Sau hạt lạc đ-ợc xử lý dịch vẩn VKL nảy mầm đ-ơc ngày gieo vào đất, tiÕp tơc theo dâi mét sè chØ tiªu sinh lý: hàm l-ợng diệp lục, c-ờng độ quang hợp, c-ờng độ hô hấp lạc lạc đ-ợc lá, Các lô đối chứng lô thí nghiệm đà đ-ợc gieo chăm sóc nh- Diệp lục sắc tố quan trọng xanh có khả hấp thụ biến đổi l-ợng ánh sáng mặt trời thành l-ợng hoá học, dự trữ liên kết hoá học l-ợng dùng để cố định CO2, tổng hợp chất hữ- Đây số liên quan đến suất chất l-ợng hạt lạc kết theo dõi đ-ợc thể bảng SS(%) L20 Sản Dầu 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 lo1 lo2 lo3 lo4 lo5 lo3 lo4 lo5 la la la la la la Giai đoạn Biểu đồ 5: Hàm l-ợng diệp lục hai giống lạc L20 sản Dầu 30 Bảng 31 Từ kết bảng biểu đồ cho thấy hàm l-ợng diệp lục lô (3,4,5) có giá trị cao so với đối chứng (n-ớc máy BG11) Đối với giống lạc L20, lô đ-ợc xử lý dịch vẩn VKL lô có ảnh h-ởng tốt v-ợt đối chứng 49,6% (3 lá), 65,2% (5 lá), 76,7% (8 lá) chủng Nostoc calcicola Còn chủng Calothrix bervissima v-ợt 16,4% (3 lá), 61,7% (5 lá), 76,7%(8 lá) So với lô lô lô có ảnh h-ởng thấp T-ơng tự nh- vậy, giống lạc sản Dầu lô (3,4,5) cho giá trị cao so với đối chứng (n-ớc máy BG11) Trong lô có ảnh h-ởng tốt nhất, thấp lô hai chủng VKL Qua cho thấy lô có ảnh h-ởng tốt nhất, lô có nồng độ dịch vẩn VKL cao lô lô có nồn độ dịch vẩn VKL thấp lô có ảnh h-ởng thấp lô nh-ng cao so với đối chứng n-ớc máy BG11) Trong hai giống lạc giống L20 có ảnh h-ởng tốt giống lạc Sản Dầu, hai chủng VKL chủng Nostoc calcicola có ảnh h-ởng tốt chủng Calothrix bervissima 3.3.2 ảnh h-ởng dịch vẩn hai chủng VKL đến c-ờng độ quang hợp lạc giai đoạn non Đây số liên quan đến xuất chất l-ợng lạc, c-ờng độ quang hợp tăng dẫn đến suất tăng giống lạc có khác c-ờng độ quang hợp Ngay giống lạc thời kỳ khác có c-ờng độ quang hợp khác Kết thu đ-ợc thể hiẹn bảng 32 Bảng 33 SS(%) L20 SảnDầu 200 180 160 lo1 140 lo2 120 lo3 100 80 lo4 lo5 60 lo3 40 20 lo4 lo5 la la la la la la Giai đoạn Biểu đồ 6: C-ờng độ quang hợp lạc giai đoạn non Từ kết bảng biểu đồ cho thấy lô (3,4,5) có c-ờng độ quang hợp cao so với đối chứng (n-ớc máy BG11) Đối với giống lạc L20, lô (3,4,5) lô có ảnh h-ởng tốt v-ợt so với đối chứng (n-ớc máy) 7,9% (3 lá), 69,1% (5 lá) 83,2% (8 lá) chủng Nostoc calcicola Còn chủng Calothrix bervissima vựơt 42,7% (3 lá), 60,2% (5 lá), 79,6% (8 lá) So với lô lô lô có ảnh h-ởng thấp T-ơng tự nh- vậy, giống lạc Sản Dầu lô (3,4,5) cho giá trị cao so với đối chứng (n-ớc máy) Trong lô có ảnh h-ởng tốt nhất, thấp lô hai chủng VKL Nh- vậy, lô đ-ợc xử lý dịch vÈn vi khn lam cđa c¶ hai chđng VKL Nostoc calcicola Calothrix bervissima cho c-ờng độ quang hợp tăng theo giai đoạn sinh tr-ởng phát triển Trong c-ờng độ quang hợp tăng 34 mạnh lô thấp lô Sự khác c-ờng độ quang hợp giống lạc lô thí nghiệm khác chúng tỏ khả tiếp nhận ánh sáng giống lạc khác liên quan đến góc phân cành Trong hai giống lạc giống L20 có ảnh h-ởng tốt giống lạc Sản Dầu, hai chủng VKL chủng Nostoc calcicola có ảnh h-ởng tốt chủng Calothrix bervissima 3.3.3.ảnh h-ởng dịch vẩn hai chủng VKL đến c-ờng độ hô hấp lạc giai đoạn non Thông qua trình hô hấp chất hữu đ-ợc tạo thành trình quang hợp đ-ợc phân giải đến tận l-ợng chúng chuyển sang dạng l-ợng hoạt hoá để tham gia vào trình trao đổi chất Dựa vào việc xác định l-ơng CO2 bình kín tr-ớc sau lúc cho gam t-ơi vào ta biết đ-ợc c-ờng độ hô hấp Kết theo dõi thu đ-ợc thể bảng SS(%) L20 Sản Dầu 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 lo lo2 lo3 lo4 lo5 lo3 lo4 lo5 la la la la la la Giai đoạn Biểu đồ 7: C-ờng độ hô hấp củacây lạc giai đoạn non 35 Bảng 36 Từ kết bảng biểu đồ cho thấy c-ờng độ hô hấp lô đ-ợc xử lý dịch vẩn VKL có giá trị cao so với đối chứng (n-ớc máy BG11) Đối với giống lạc L20, lô (3,4,5) lô có ảnh h-ởng tốt v-ợt so với đối chứng (n-ớc máy) 50,3% (3 lá) , 56,7% (5 lá), 71,8% (8 lá) chủng Nostoc calcicola Còn chủng Calothrix bevissima v-ợt 20,7% (3 lá), 56,7% (5 lá) 66,7% (8 lá) So với lô lô lô có ảnh h-ởng thấp T-ơng tự nh- vậy, giống lạc sản Dầu lô (3,4,5) cho giá trị cao so với đối chứng (n-ớc máy BG11) Trong lô có ảnh h-ởng tốt nhất, thấp lô hai chủng VKL Qua cho thấy lô có ảnh h-ởng tốt nhất, lô có nồng độ dịch vẩn VKL cao lô lô có nồng độ dịch vẩn VKL thấp lô có ảnh h-ởng tháp lô nh-ng cao với đối chứng (n-ớc máy BG11) Trong hai giống lạc giống L20 có ảnh h-ởng tốt giống lạc Sản Dầu, hai chủng VKL chủng Nostoc calcicola có ảnh h-ởng tốt chủng Calothrix bervissima Nhận xét : Qua kết thu đ-ợc cho thấy dịch vẩn VKL Nostoc calcicola Calothrix bervissima ảnh h-ởng tốt tới tiêu sinh lý nảy mầm hai giống lạc L20 sản Dầu mà ảnh h-ởng tốt tới tiêu sinh lý giai đoạn Trong lô có ảnh h-ởng tốt nhất, thấp lô3 nh-ng cao so với đối chứng (n-ớc máy BG11) hai giống lạc L20 sản Dầu Trong hai giống lạc giống L20 có ảnh h-ởng tốt giống lạc Sản Dầu, hai chủng VKL chủng Nostoc calcicola có ảnh h-ởng tốt chủng Calothrix bervissima 37 Kết luận kiến nghị A kết luận Dịch vẩn VKL hai chủng Nostoc calcicola Calothrix bervisisima nồng độ thích hợp 1,394g t-ơi/100ml ( chủng Nostoc calcicola) 1,108g t-ơi/100ml (đối với chủng Calothrix bervisisima) có tác dụng tốt lên nảy mầm nh- tiêu sinh lý non hai giống lạc làm thí nghiệm ( L20 Sản Dầu) Đối với tiêu sinh lý nảy mầm: Tỷ lệ nảy mầm tăng 16,4% - 25, %, độ dài rễ mầm tăng 62,7% - 77,4%, độ dài thân mầm tăng 50,5% - 68,8%, c-ờng độ hô hấp tăng 25,3% - 52,1 %, hoạt độ enzin catalaza tăng 60,0% 83,7% (sau 72 h) Đối với tiêu sinh lý non: Hàm l-ợng diệp lục tăng 71,1 80,4%, c-ờng độ quang hợp tăng 79,6 - 83,2%, c-ờng độ hô hấp tăng 61,7 71,8% (lúc đ-ợc lá) Trong hai chủng VKL chủng Nostoc calcicola có tác dụng tốt chủng Calothrix bervissima, hai giống lạc giống L20 có tác dụng tốt giống Sản Dầu b kiến nghị Do thời gian hạn chế nên ch-a theo dõi ảnh h-ởng chủng VKL nói lên suất chất l-ợng lạc Vậy nên nghiên cứu để khẳng định tác dụng hai chủng vi VKL lên suất lạc nghiên cứu để lây nhiễm chúng lên ruộng trồng lạc nh- trồng khác nhằm tăng suất trồng tăng độ phì cho đất 38 Tài liệu tham khảo 1.Nguyễn thị Chinh (1990), Nâng cao suất nhóm chín sớm thích hợp cho số tỉnh phía bắc Việt Nam đ-ờng tạo giống lạc NXB Nông nghiệp 2.Nguyễn Danh Đông(1984), Cây lạc NXB Nông Nghiệp Lê Thuý Hà (2004), Khu hệ thực vật vùng Tây Nam hệ thống Sông Lam Luận án TS Sinh học, Tr-ờng Đại học Vinh Hồ Sỹ Hạnh (2006), Vi khuÈn lam ®Êt trång ë mét sè vùng thuộc tỉnh Đắk Lắk mối quan hệ chóng víi mét sè u tè sinh th¸i Ln ¸n TS Sinh học, Tr-ờng Đại học Vinh Võ Hành (1996), Tảo học Đại Học Vinh Nguyễn Xuân Hiển, Vũ Anh Kha, Hoàng Đình Ngọc, Vũ Hữu Yêm (1975), Đạm sinh học trồng trọt (tài liệu dịch) NXB khoa học Kỹ thuật,Hà Nội Đặng Diễn Hồng, Ngun H÷u Ph-íc (1987), “ HiƯu øng kÝch thÝch cđa dịch tảo lên lúa đ-ơc xử lý lạnh giai đoạn nảy mầm Tạp chí sinh học, (3C), trang 27 - 32 Đặng Đình Kim, Đặng Hùng Ph-ớc Hiền (1992), Công nghệ sinh học vi tảo NXB Nông nghiệp Nguyễn Công Kình (2001), Một số kết ban đầu vi tảo (Mi croalgae) ®Êt trång lóa ë Thµnh Phè Vinh vµ vïng phơ cËn T¹p chÝ sinh häc, 23 (3C) , trang 159 - 161.16 10 Trần ích, Thực hành hoá sinh học NXB Giáo Dục 11 Trần Đăng Kế (1994), ảnh h-ởng nguồn dinh d-ỡng đạm đến hàm l-ợng số hợp chất Nitơ tế bào môi tr-ờng nuôi cấy vi khuẩn lam Anabae Cylindraca Báo cáo hội thảo quốc gia Nuôi trồng sử dụng tế bào tự d-ỡng Hà Nội,11/1992 12.Trần Văn Lài (1993), Kỹ thật gieo trồng lạc, đậu, vừng NXB Nông nghiƯp 39 13 Ngun ThÞ Minh Lan (2000), Vi khn lam cố định Nitơ giải pháp tăng nguồn đạm thức ¨n cho rng Lóa ViƯt Nam NXB N«ng NghiƯp 14 Đoàn Đức Lân (1996), Nghiên cứu số đặc điểm sinh thái sinh lý VKL cố định nitơ đồng lúa đất mặn ven biển huyện Thái Thuỵ - Thái Bình Luận văn th.s sinh học 15 Trần Văn Nhị, Trần Hà, Đặng Diễm Hồng, D-ơng Đức Tiến (1984), B-ớc đầu nghiên cứu vi khuẩn lam (Cyanobacteria) cố định đạm Việt Nam Tạp chí sinh học, (2), trang - 13 16 Đặng Trần Phú cộng năm (1977)., T- liệu lạc NXB kỹ thuật 17 D-ơng Đức Tiến (1994), Vi khuẩn lam cố định ruộng lúa NXB nông nghiệp 18 D-ơng Đức Tiến (1996), Phân loại vi khuẩn lam Việt Nam NXB nông nghiệp 19 Đỗ Thị Tr-ờng (1998), VKL đất trồng lúa Huyện Hoà Vang - Thành Phố Đà Nẵng Luận văn Th.S Sinh học 20 Nguyễn Đình San (2000), Vi tảo số lĩnh vực ô nhiễm tỉnh Thanh Hoá-Nghệ An -Hà Tĩnh vai trò chúng trình làm n-ớc thải Luân án tiến sỹ sinh học, Tr-ờng Đại Học Vinh 21 Nguyễn Lê Vĩnh, Võ Hành (2001), Vi khuẩn lam ( Cyanobacteria) đất trồng lúa huyện Thạch Hà - Hà Tĩnh Tạp chí sinh học 23 (3C), Trang 29 34 40 ... hiểu đề tài: Thăm dò ảnh h-ởng hai chủng vi khuẩn lam cố định Nitơ lên nảy mầm sinh tr-ởng giống lạc L20 Sản Dầu Qua vi? ??c thăm dò ảnh h-ởng vi khuẩn lam cố định đạm lên nảy mầm sinh tr-ởng lạc,... đ-ợc 15 loài vi khuẩn lam cố định đạm nghiên cứu thăm dò khả cố định Nitơ chúng So với kết khảo sát ruộng lúa vùng n-ớc vi khuẩn lam cố định Nitơ vùng đất mặn có phần đa dạng chi Nostoc vÉn chiÕm... tiêu xác định sinh khối đ-ợc theo dõi thời điểm 15, 30 45 ngày tuổi 2.2.2 Xác định sinh khối vi khuẩn lam Để xác định sinh khối vi khuẩn lam tiến hành li tâm dịch chứa vi khuẩn lam tốc độ 700 - 1000