Khóa luận xây dựng phương pháp định tính và định lượng alisol a và alisol b 23 acetat trong dược liệu trạch tả (alisma plantago – aquatica) trồng tại việt nam

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC ĐỖ THỊ THU TRANG XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƢỢNG ALISOL A & ALISOL B 23 – ACETAT TRONG DƢỢC LIỆU TRẠCH TẢ (Alisma plantago – aquatica) TRỒNG TẠI VIỆT NAM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Hà Nội 2018 VN U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI Ph a rm ac y, KHOA Y DƢỢC ea nd ĐỖ THỊ THU TRANG lo fM ed ici n XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƢỢNG ALISOL A & ALISOL B 23 – ACETAT TRONG DƢỢC LIỆU TRẠCH TẢ (Alisma plantago – aquatica) TRỒNG TẠI VIỆT NAM Sc h oo KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Khóa: QH.2013.Y Ths Nguyễn Thúc Thu Hƣơng Co py rig ht @ Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Phƣơng Hà Nội 2018 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U LỜI CẢM ƠN rm ac y, Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến T.S Nguyễn Thị Phƣơng (Khoa Hóa phân tích – Tiêu chuẩn, Viện Dược liệu) Ths Nguyễn Thúc Thu Hƣơng (Bộ môn Dược liệu Dược học cổ truyền, Khoa Y Dược, ĐHQGHN) người thầy hướng dẫn, bảo, góp ý đưa ý kiến quý báu để em hồn thiện khóa luận Ph a Em xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Dược liệu PGS.TS Phƣơng Thiện Thƣơng nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành khóa luận ea nd Em xin chân thành cảm ơn cán bộ, nhân viên khoa Hóa phân tích – Tiêu chuẩn, Viện Dược liệu, đặc biệt anh Nguyễn Đình Quân anh Lê Ngọc Duy – người theo sát, hướng dẫn cho em suốt trình thực đề tài ici n Em xin gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô Khoa Y – Dược dạy dỗ, trang bị kiến thức cho em suốt năm theo học trường lo fM ed Sau cùng, em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè bên cạnh, ủng hộ, động viên em suốt trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận Hà Nội, ngày 10 tháng năm 2018 Sinh viên Đỗ Thị Thu Trang Co py rig ht @ Sc h oo Em xin chân thành cảm ơn! PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U MỤC LỤC DANH MỤC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG ac y, DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Co py rig ht @ Sc h oo lo fM ed ici n ea nd Ph a rm ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Trạch tả (Alisma orientale (Sam.) Juzep.) 1.1.1 Tên khoa học 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố 1.1.3 Bộ phận dùng 1.1.4 Thành phần hóa học 1.1.5 Một số tác dụng dược lý 1.2 Tổng quan alisol A alisol B 23 – acetat 1.2.1 Tổng quan alisol A 1.2.2 Tổng quan alisol B 23 – acetat 11 1.3 Một số nghiên cứu định tính, định lượng AA AB23 Trạch tả 13 1.3.1 Các nghiên cứu giới 13 1.3.2 Các nghiên cứu nước 14 1.3.3 Tiêu chuẩn dược liệu Trạch tả số Dược điển 14 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị nghiên cứu 16 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 16 2.1.2 Hóa chất dung môi 17 2.1.3 Thiết bị dùng nghiên cứu 17 2.2 Nội dung nghiên cứu 17 2.2.1 Định tính AA AB23 sắc ký lớp mỏng 17 2.2.2 Định lượng AA HPLC 17 2.2.3 Phân tích mẫu thực 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu 18 2.3.1 Định tính AA AB23 sắc ký lớp mỏng 18 2.3.2 Định lượng AA HPLC 19 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Co py rig ht @ Sc h oo lo fM TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ed ici n ea nd Ph a rm ac y, VN U 2.3.3 Phân tích mẫu thực 22 CHƢƠNG 3: THỰC NGHIỆM KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 23 3.1 Định tính AA AB23 TLC 23 3.1.1 Định tính AB23 23 3.1.2 Định tính AA 24 3.1.3 Định tính AA AB23 số mẫu Trạch tả sắc ký lớp mỏng 25 3.2 Định lượng AA HPLC 27 3.2.1 Lựa chọn pha tĩnh 27 3.2.3 Khảo sát quy trình xử lý mẫu 28 3.2.4 Thẩm định phương pháp định lượng 30 3.3 Ứng dụng phương pháp 35 3.4 Bàn luận 35 3.4.1 Tính cấp thiết việc tiêu chuẩn hóa dược liệu Trạch tả Việt Nam 35 3.4.2 Xây dựng phương pháp định tính 36 3.4.4 Phương pháp định lượng 37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Từ viết tắt AA ACN AB23 Tên tiếng Anh tên khoa học VN U DANH MỤC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Tên tiếng Việt Alisol A Acetonitril Alisol B 23 - acetat AOAC Association of Official Analytical Chemists Hiệp hội phân tích EtOH Ethanol Ethanol HPLC High performance liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao ac y, Alisol A Acetonitrile Alisol B 23 - acetate nhà Hóa ea nd Ph a rm Khối lượng/ khối lượng kl/kl Giới hạn phát Limid of Detection LOQ Limid of Qualification MeOH Methanol MS Mass Spectrometry RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối S/N Signal/Noise Tín hiệu/nhiễu đường ed lo fM oo STT Giới hạn định lượng Methanol Phổ khối Số thứ tự Thin layer chromatography Sắc ký mỏng Ultraviolet Visible Phổ tử ngoại - khả kiến @ Sc h TLC Volume/volume Thể tích/thể tích Co py rig ht UVVIS v/v ici n LOD PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma STT VN U DANH MỤC BẢNG Tên bảng Trang Bảng 1.1 Một số nghiên cứu giới định lượng AA AB23 Trạch tả Bảng 1.2 Chương trình dung mơi theo Dược điển Hồng Kông Bảng 2.1 Mẫu Trạch tả Bảng 3.1 Kết khảo sát dung môi chiết Bảng 3.2 Kết khảo sát tỷ lệ dung môi chiết Bảng 3.3 Kết khảo sát thời gian chiết 29 Bảng 3.4 Kết đánh giá tính thích hợp hệ thống 31 Bảng 3.5 Quan hệ tuyến tính nồng độ diện tích pic AA 32 Bảng 3.6 Kết đánh giá độ lặp lại 33 10 Bảng 3.7 Kết thẩm định độ phương pháp 34 11 Bảng 3.8 Kết định lượng AA số mẫu Trạch tả 35 ac y, rm Ph a ea nd ici n ed 14 16 28 29 Co py rig ht @ Sc h oo lo fM 13 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Hình 1.1 Hình ảnh hoa Trạch tả Hình 1.2 Thân rễ thân rễ thái lát Trạch tả Hình 1.3 Cơng thức số triterpenoid thân rễ Trạch tả 4 Hình 1.4 Cơng thức số diterpenoid thân rễ Trạch tả 5 Hình Cơng thức số sequiterpenoid thân rễ Trạch tả 6 Hình 1.6 Cơng thức cấu tạo AA Hình 1.7 Cơng thức cấu tạo AB23 11 Hình 2.1 Hình ảnh dược liệu Trạch tả lưu trữ Viện Dược liệu 16 Hình 3.1 Khảo sát định tính AB23 23 10 Hình 3.2 Khảo sát định tính AA 24 11 26 12 Hình 3.3 Sắc ký đồ định tính AA số mẫu Trạch tả Hình 3.4 Sắc ký đồ định tính AB23 số mẫu Trạch tả 13 Hình 3.5 Sắc ký đồ khảo sát thành phần pha động 28 @ Sc h oo lo fM ed ea nd Ph a rm 26 Hình 3.6 Sơ đồ quy trình xử lý mẫu lựa chọn 30 Hình 3.7 Sắc ký đồ đánh giá độ đặc hiệu phương pháp HPLC - UV 31 16 Hình 3.8 Sắc ký đồ mẫu thử LOD 32 17 Hình 3.9 Đường chuẩn AA 33 14 rig ht 15 Co py Trang ac y, Tên hình vẽ ici n STT VN U DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U ĐẶT VẤN ĐỀ rm ac y, Trạch tả có tên khoa học Alisma orientale (Sam.) Juzep., tên đồng danh (Alisma plantago – aquatica) Thuộc họ Trạch tả Alismataceae Bộ phận dùng làm thuốc thân rễ khôn cạo vỏ Trạch tả vị thuốc quý sử dụng lâu đời Y học cổ truyền Việt Nam Trung Hoa với tác dụng: lợi tiểu, hạ mỡ máu, tăng cường miễn dịch, kháng viêm, giảm đường huyết… ea nd Ph a Nhóm chất có hoạt tính sinh học Trạch tả hợp chất triterpenoids, có alisol A alisol B 23 - acetat AB23 chứng minh có tác dụng lợi tiểu, chống viêm gan nhiễm mỡ không rượu, giảm ung thư buồng trứng, chống dị ứng… Alisol A hướng tác dụng chủ yếu tế bào viêm gan cịn có tác dụng khác kháng khuẩn, tăng cường miễn dịch… Sc h oo lo fM ed ici n Ở Việt Nam, việc đánh giá chất lượng dược liệu Trạch tả thường sử dụng theo Dược điển Việt Nam IV, nhiên tiêu chuẩn hạn chế, chưa đáp ứng yêu cầu đánh giá nên chất lượng dược liệu Trạch tả thị trường chưa đảm bảo Các nghiên cứu phân tích thành phần hóa học giới hầu hết sử dụng alisol B 23 - acetat làm tiêu chí đánh giá chất lượng dược liệu Trạch tả Tuy nhiên, alisol B 23 - acetat alisol A chiếm hàm lượng lớn, có nhiều tác dụng quý với tiềm nghiên cứu, phát triển để ứng dụng điều trị Vì vậy, alisol A thành phần quan trọng, sử dụng làm ―maker‖ kiểm nghiệm chất lượng dược liệu Trạch tả @ Từ thực tiễn trên, nhằm xây dựng phương pháp đánh giá chất lượng dược liệu Trạch tả, thực đề tài “Xây dựng Co py rig ht phƣơng pháp định tính định lƣợng alisol A alisol B 23 - acetat dƣợc liệu Trạch tả (Alisma plantago – aquatica) trồng Việt Nam” với mục tiêu: - Xây dựng phương pháp định tính định lượng alisol A alisol B 23 – acetat dược liệu Trạch tả trồng Việt Nam - Áp dụng phương pháp phân tích số mẫu Trạch tả PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 1.1 Tổng quan Trạch tả (Alisma orientale (Sam.) Juzep.) VN U CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN ac y, 1.1.1 Tên khoa học Trạch tả có tên khoa học Alisma orientale (Sam.) Juzep., thuộc họ Alismataceae, chi Alisma, có tên khoa học đồng nghĩa khác Alisma plantago – aquatica Ở Việt Nam, Trạch tả gọi thủy đề, mã đề nước [4] Co py rig ht @ Sc h oo lo fM ed ici n ea nd Ph a rm 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố Cây thảo, cao 40-50 cm Thân rễ hình cầu hình quay, nạc, màu trắng, có cuống dài, bẹ to mọc ốp vào nhau, xịe hình hoa thị, phiến hình trái xoan hay hình trứng, mép ngun lượn sóng, gân 5-7 hình cung Cụm hoa mọc cán thẳng dài có đến 1m thành chùy có nhiều vịng hoa xếp thành tầng nhỏ dần phía ngọn, tầng phân nhánh thành chùy nhỏ; hoa lưỡng tính, màu trắng hay hồng, đài có màu lục, tồn đến thành quả; tràng hoa cánh có cựa màu vàng nhạt mỏng rụng sớm; nhị – 9, dẹt, bầu nhiều ô xếp thành vịng, có nỗn, vịi nhụy mảnh dễ rụng Quả bế dẹp, dạng màng, có đài tồn Mùa hoa quả: tháng 10 – 12 Chi Alisma L có khoảng 10 lồi, phân bố rải rác từ vùng nhiệt đới đến vùng cận nhiệt đới ơn đới ẩm Trạch tả có nhiều Trung Quốc, Nhật Bản, Triều Tiên, Việt Nam Hiện biết có hai lồi dùng làm thuốc Trạch tả (A plantago – aquatica L.) loài A canaliculatum Ở Việt Nam, Trạch tả thấy trồng tỉnh Thái Bình, Hà Nam, Hải Dương, Hưng Yên [4] Hình 1.1 Hình ảnh hoa Trạch tả [57,58] PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Sắc ký đồ khảo sát với dung môi chiết methanol 80% Dataf ile Name:MeOH-80-20ul-001.lcd Sample Name:Meoh 80 Sample ID:03 mAU 210nm,4nm ac y, 225 200 150 Ph a 125 rm Alisol A/1781743 175 100 75 ea nd 50 25 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 ici n Sắc ký đồ khảo sát với dung môi chiết methanol 60% Dataf ile Name:MeOH-60-20ul-001.lcd Sample Name:MeOh 60 Sample ID:04 ed mAU 210nm,4nm 200 175 125 Sc h 100 oo 150 Alisol A/1714439 lo fM 225 75 50 @ 25 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 Co py rig ht 0.0 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Sắc ký đồ khảo sát với dung môi chiết methanol 40% Dataf ile Name:MeOH-40-20ul-001.lcd Sample Name:thu Sample ID:01 mAU 210nm,4nm ac y, 200 175 125 Ph a 100 75 25 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Phụ lục 2: Sắc ký đồ khảo sát tỷ lệ dung môi Co py rig ht @ Sc h oo lo fM ed ici n 1.0 ea nd 50 0.0 rm Alisol A/1564098 150 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Sắc ký đồ khảo sát tỷ lệ dung môi chiết với 25ml MeOH 80% Dataf ile Name:25ml-20ul-002.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 mAU 225 210nm,4nm ac y, 200 175 Ph a 125 rm Alisol A/1680383 150 100 75 25 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 ea nd 50 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ici n Sắc ký đồ khảo sát tỷ lệ dung môi chiết với 50 ml MeOH 80% ed Dataf ile Name:50ml-20ul-002.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 mAU 210nm,4nm 100 90 80 oo 70 Alisol A/811828 lo fM 110 60 Sc h 50 40 30 @ 20 10 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Co py rig ht Sắc ký đồ khảo sát tỷ lệ dung môi chiết với 100ml MeOH 80% PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Dataf ile Name:100ml-20ul-002.lcd Sample Name:02 Sample ID:02 mAU 210nm,4nm 55 50 ac y, 45 35 30 rm Alisol A/410738 40 25 Ph a 20 15 10 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Phụ lục 3: Khảo sát thời gian chiết Co py rig ht @ Sc h oo lo fM ed ici n 0.0 ea nd PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 10 phút Datafile Name:T 10-20ul-001.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 mAU 210nm,4nm ac y, 200 175 125 Ph a 100 rm Alisol A/1569966 150 75 25 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 ea nd 50 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ici n Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 30 phút Datafile Name:T 30-20ul-002.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 ed mAU 210nm,4nm 225 175 150 oo 125 Alisol A/1767704 lo fM 200 Sc h 100 75 50 @ 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Co py rig ht 0.0 Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 40 phút PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Datafile Name:T 40-20ul-003.lcd Sample Name:02 Sample ID:02 mAU 210nm,4nm 200 ac y, 175 125 rm Alisol A/1772650 150 100 Ph a 75 50 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 ea nd 25 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 12.0 13.0 14.0 Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 60 phút ici n Datafile Name:T 60-20ul-004.lcd Sample Name:03 Sample ID:03 mAU 210nm,4nm ed 225 200 150 125 oo 100 Alisol A/1827462 lo fM 175 75 Sc h 50 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 Co py rig ht @ 0.0 Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 120 phút PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Datafile Name:T 120-20ul-005.lcd Sample Name:04 Sample ID:04 mAU 225 210nm,4nm 200 Alisol A/1788354 150 ac y, 175 rm 125 100 Ph a 75 50 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Co py rig ht @ Sc h oo lo fM ed ici n 0.0 ea nd Phụ lục 4: Sắc ký đồ dung dịch chuẩn PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 4.168µg/ml Dataf ile Name:alisolA-4.168-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:08 mAU 210nm,4nm 5.5 ac y, 5.0 4.5 3.5 3.0 rm Alisol A/50459 4.0 Ph a 2.5 2.0 1.5 0.5 0.0 -0.5 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 ea nd 1.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ici n Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 10.42 µg/ml Dataf ile Name:alisolA-10.42-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:07 ed mAU 210nm,4nm 13 11 10 oo Alisol A/124308 lo fM 12 Sc h @ 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Co py rig ht 0.0 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 20.84 µg/ml PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Dataf ile Name:alisolA-20.84-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:06 mAU 27.5 210nm,4nm 25.0 ac y, 22.5 20.0 Alisol A/255642 17.5 rm 15.0 12.5 Ph a 10.0 7.5 5.0 0.0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 ea nd 2.5 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 41.68 µg/ml Dataf ile Name:alisolA-41.68-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:05 mAU 210nm,4nm ici n 50 ed 45 lo fM 40 35 30 25 oo 20 Alisol A/520244 55 15 Sc h 10 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 104.2 µg/ml Co py rig ht @ 0.0 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Dataf ile Name:alisolA-104.2-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:04 mAU 210nm,4nm 130 120 ac y, 110 100 80 70 rm Alisol A/1282397 90 60 Ph a 50 40 30 10 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 ea nd 20 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 208.4 µg/ml ici n Dataf ile Name:alisolA-208.4-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:03 mAU 210nm,4nm 275 ed 250 225 175 150 125 oo 100 Alisol A/2604167 lo fM 200 Sc h 75 50 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Co py rig ht @ 0.0 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 416.8 µg/ml PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Dataf ile Name:alisolA-416.8-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:02 mAU 210nm,4nm 550 500 ac y, 450 Alisol A/5215845 400 350 rm 300 250 Ph a 200 150 100 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Co py rig ht @ Sc h oo lo fM ed ici n 0.0 ea nd 50 Phụ lục 5: Sắc ký đồ định lƣợng mẫu thử PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Sắc ký đồ định lượng mẫu M1 Dataf ile Name:T1-20ul-001.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 mAU 210nm,4nm 130 ac y, 120 110 100 80 70 Ph a 60 rm Alisol A/1036639 90 50 40 20 10 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ici n Sắc ký đồ định lượng mẫu M2 ea nd 30 Dataf ile Name:T2-20ul-002.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 mAU 210nm,4nm ed 70 lo fM 65 60 55 50 45 40 oo 35 Alisol a/556182 75 30 Sc h 25 20 15 10 @ 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 Co py rig ht -5 0.0 Sắc ký đồ định lượng mẫu M3 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Dataf ile Name:T3-20ul-003.lcd Sample Name:02 Sample ID:02 mAU 210nm,4nm 200 175 125 100 rm Alisol A/1532730 ac y, 150 Ph a 75 50 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 Sắc ký đồ định lượng mẫu M4 ea nd 25 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ici n Dataf ile Name:T4-20ul-004.lcd Sample Name:03 Sample ID:03 mAU 210nm,4nm ed 200 175 125 100 oo 75 Alisol A/1473971 lo fM 150 Sc h 50 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Co py rig ht @ 0.0 Sắc ký đồ định lượng mẫu M5 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Dataf ile Name:T5-20ul-005.lcd Sample Name:04 Sample ID:04 mAU 210nm,4nm 110 100 ac y, 90 Alisol a/839687 80 70 rm 60 50 Ph a 40 30 20 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 Sắc ký đồ định lượng mẫu M6 ea nd 10 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ici n Dataf ile Name:T6-20ul-006.lcd Sample Name:05 Sample ID:05 mAU 210nm,4nm 150 ed 140 130 120 100 90 80 70 oo 60 Alisol A/1156186 lo fM 110 50 Sc h 40 30 20 10 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Co py rig ht @ 0.0 Sắc ký đồ định lượng mẫu M7 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Dataf ile Name:T7-20ul-007.lcd Sample Name:06 Sample ID:06 mAU 210nm,4nm 225 ac y, 200 150 125 Ph a 100 75 50 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Co py rig ht @ Sc h oo lo fM ed ici n 1.0 ea nd 25 0.0 rm Alisol A/1746494 175 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ... tài ? ?Xây dựng Co py rig ht phƣơng pháp định tính định lƣợng alisol A alisol B 23 - acetat dƣợc liệu Trạch tả (Alisma plantago – aquatica) trồng Việt Nam? ?? với mục tiêu: - Xây dựng phương pháp định. .. GIA HÀ NỘI Ph a rm ac y, KHOA Y DƢỢC ea nd ĐỖ THỊ THU TRANG lo fM ed ici n XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƢỢNG ALISOL A & ALISOL B 23 – ACETAT TRONG DƢỢC LIỆU TRẠCH TẢ (Alisma plantago. .. định tính định lượng alisol A alisol B 23 – acetat dược liệu Trạch tả trồng Việt Nam - Áp dụng phương pháp phân tích số mẫu Trạch tả PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com