Khóa luận phân tích thành phần hóa học của lá mơ lông việt nam (paederia lanuginosa)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y- DƯỢC ĐÀM VIỆT HÙNG PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN HĨA HỌC CỦA LÁ MƠ LƠNG VIỆT NAM (Paederia lanuginosa) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội – 2019 an d Ph arm ac y, KHOA Y- DƯỢC VN U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI ed ici ne ĐÀM VIỆT HÙNG PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN HĨA HỌC CỦA LÁ MƠ LÔNG VIỆT NAM lo fM (Paederia lanuginosa) Sc ho o KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC KHÓA: QH.2014 Co p yr igh t@ NGƯỜI HƯỚNG DẪN: TS LÊ THỊ THU HƯỜNG TS NGUYỄN HỮU TÙNG Hà Nội – 2019 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực khóa luận tốt nghiệp, em nhận giúp đỡ, tạo điều kiện, đóng góp ý kiến bảo tận tình, tâm huyết thầy cơ, gia đình bạn bè Ph arm ac y, Em xin chân thành cảm ơn TS Lê Thị Thu Hường - giảng viên Bộ môn Dược liệu – Dược học cổ truyền, Khoa Y Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội TS Nguyễn Hữu Tùng – giảng viên Bộ mơn Hóa dược kiểm nghiệm thuốc, Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, người Thầy tận tâm hướng dẫn, hết lòng bảo tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình học tập, nghiên cứu hồn thành khố luận ed ici ne an d Em xin chân thành cảm ơn thầy cô Bộ môn Dược liệu – Dược học Cổ truyền, Bộ môn Hóa dược kiểm nghiệm thuốc Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi, hướng dẫn giúp đỡ em q trình học tập hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn tất quý thầy cô Khoa Y Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội dạy dỗ, trang bị kiến thức cho em suốt năm theo học Khoa Hà Nội, ngày 26 tháng năm 2019 Sinh viên Đàm Việt Hùng Co p yr igh t@ Sc ho o lo fM Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình bạn bè, người theo sát động viên, quan tâm tạo điều kiện giúp hồn thành khóa luận tốt nghiệp PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U arm ac y, DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tên đầy đủ Tên ký hiệu, viết tắt A Độ hấp thụ quang (Absorption) C Nồng độ (Concentration) EtOH Ethanol HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) MeOH Methanol R2 STT TLC UV ed ici ne an d Ph STT Hệ số tương quan Số thứ tự Vùng tử ngoại (Ultra Violete) Co p yr igh t@ Sc ho o lo fM Sắc ký lớp mỏng (Thin Layer Chromatography) PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình vẽ, đồ thị Trang arm ac y, Hình 1.1 Cây mơ lơng Hình 1.2 Các iridoid glucoside có mơ lơng Hình 1.3 Iridoid dạng đime số Hình 1.4 Iridoid dạng đime số Ph Hình 1.5 Iridoid dạng đime số 7 8 Hình 2.1 Mẫu tươi mơ lơng 11 20 Hình 3.2 Sắc ký đồ pha đảo cao tổng với hệ dung môi MeOH-H2O (1:2) 20 Hình 3.3 Sắc ký đồ HPLC mẫu cao mơ 21 Hình 3.4 Phổ UV chất có thời gian lưu 6,099 phút 22 Hình 3.5 Phổ UV chất có thời gian lưu 10,212 phút 22 Hình 3.6 Phổ UV chất có thời gian lưu 11,146 phút 23 Hình 3.7 Phổ UV chất có thời gian lưu 15,039 phút 23 Hình 3.8 Phổ UV chất có thời gian lưu 15,872 phút 24 Hình 3.9 Phổ UV chất có thơi gian lưu 16,532 phút 24 Hình 3.10 Phổ UV chất có thời gian lưu 17,012 phút 25 Hình 3.11 Phổ UV chất có thời gian lưu 18,539 phút 25 Hình 3.12 Đồ thi miêu tả phụ thuộc độ hấp thụ quang vào nồng độ mẫu chuẩn iridoid 26 Co p yr igh t@ Sc ho o fM ed ici ne Hình 3.1 Sắc ký đồ pha đảo mẫu cao mơ với hệ dung môi MeOHH2O tỷ lệ 1:2 (A), 2:1 (B), 1:1 (C) lo an d Hình 1.6 Một số hợp chất anthraquinon có mơ lơng PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Trang 19 Bảng 3.2 Nồng độ giá trị độ hấp thụ quang tương ứng mẫu chuẩn iridoid 26 Bảng 3.3 Hàm lượng iridoid mẫu tươi tính dựa vào độ hấp thụ quang mẫu thử 27 Co p yr igh t@ Sc ho o lo fM ed ici ne an d Ph arm ac y, Bảng 3.1 Kết định tính nhóm chất hữu thường gặp mẫu cao mơ phản ứng hóa học PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT arm ac y, DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ DANH MỤC CÁC BẢNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG – TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan mơ lông (Paederia lanuginosa) Ph 1.1.1 Đặc điểm họ Cà phê (Rubiaceae) 1.1.2 Vị trí, phân loại chi Paederia an d 1.1.3 Đặc điểm thực vật mơ lông 1.1.4 Tác dụng dược lý mơ lông ed ici ne 1.1.5 Thành phần hóa học mơ lông CHƯƠNG – ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Đối tượng nghiên cứu 11 2.2 Phương tiện nghiên cứu 11 fM 2.2.1 Thiết bị dụng cụ 11 2.2.1 Hóa chất, dung mơi 12 lo 2.2 Phương pháp nghiên cứu 12 Sc ho o 2.2.1 Phương pháp xử lý mẫu chiết mẫu 12 2.2.2 Phương pháp định tính mẫu cao mơ phản ứng hóa học 13 2.2.3 Phương pháp định tính sắc ký lớp mỏng 16 2.2.4 Phương pháp định tính kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 17 igh t@ 2.2.5 Phương pháp định lượng iridoid toàn phần 17 CHƯƠNG – KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN 18 3.1 Chiết xuất 18 3.2 Phân tích định tính nhóm chất hữu có cao mơ 18 Co p yr 3.2.1 Kết phân tích định tính nhóm chất hữu phản ứng hóa học 18 3.2.2 Kết phân tích định tính iridoid sắc ký lớp mỏng 20 3.2.3 Kết phân tích định tính sắc ký lỏng hiệu cao HPLC 21 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U 3.3 Định lượng iridoid tồn phần có mẫu cao mơ 25 3.4 Bàn luận 27 3.4.1 Về chiết xuất cao toàn phần từ mẫu mơ 27 3.4.2 Về định tính mẫu cao mơ 27 arm ac y, 3.4.3 Về định lượng iridoid toàn phần 28 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tài liệu tiếng Việt Co p yr igh t@ Sc ho o lo fM ed ici ne an d Ph B Tài liệu tiếng Anh PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U ĐẶT VẤN ĐỀ arm ac y, Thuốc phòng bệnh chữa bệnh điều chế từ nguồn chính: dược liệu hóa chất tổng hợp Riêng thảo dược, thống kê chưa đầy đủ Tổ chức y tế giới cho thấy 21.000 loài cỏ dân tộc giới dùng làm thuốc Không nước Á Đông mà nước phương Tây tiêu thụ lượng lớn dược liệu Do đó, việc sản xuất thuốc từ nguồn gốc thảo dược hướng nghiên cứu nhà nghiên cứu khoa học đặc biệt trọng an d Ph Nước ta nằm vùng khí hậu nhiệt đới ẩm gió mùa, có thảm thực vật vơ phong phú đa dạng với nhiều loại thảo dược quý Trong có thuốc dân gian sử dụng từ hàng ngàn năm mơ, ngải cứu, lốt Tuy nhiên, thảo dược hầu hết sử dụng trực tiếp chế biến thành nguyên liệu thô, chưa phát huy hết công dụng chúng Một số phải kể đến mơ lơng (Paederia lanuginosa họ Cà phê-Rubiaceae) thuộc chi Paederia fM ed ici ne Cây mơ lông (mơ tam thể) Paederia lanuginosa thuộc họ Cà phê (Rubiaceae) loại thân leo, mọc hoang Việt Nam, Trung Quốc, Nhật Bản Các phận sử dụng làm thuốc thuốc lợi tiểu, gây nôn, kháng viêm, diệt khuẩn… Các nghiên cứu trước mơ lông cho thấy có chứa hai thành phần iridoid glucoside anthraquinon Sc ho o lo Nghiên cứu hợp chất hóa học có hoạt tính từ mơ lông hướng nghiên cứu triển vọng nhà khoa học giới quan tâm Tuy nhiên, Việt Nam, nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng dược lý mơ lông chưa nhiều Do vậy, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Phân tích thành phần hóa học mơ lơng Việt Nam (Paederia lanuginosa)” Mục tiêu đề tài: Chiết xuất xác định số thành phần hóa học có mơ lơng Đề tài thực với nội dung sau: igh t@ Chiết xuất xác định nhóm hợp chất hữu thường có mẫu nghiên cứu phản ứng hóa học phương pháp sắc ký lớp mỏng Xác định sơ nhóm hợp chất hữu có mẫu cao mơ lơng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Co p yr Định lượng iridoid tồn phần có mẫu cao mơ lông phương pháp đường chuẩn PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U CHƯƠNG – TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan mơ lông (Paederia lanuginosa) 1.1.1 Đặc điểm họ Cà phê (Rubiaceae) an d Ph arm ac y, Các thuộc họ Cà phê (Rubiaceae) thường loại thân gỗ, bụi nửa bụi, thân thảo hay dây leo Lá mọc đối, ln có kèm với nhiều hình dạng khác Hoa thường tập hợp thành cụm hình xim, đơi hình đầu, mẫu Đài tràng hợp, tràng có tiền khai hoa thường vặn Trong vài trường hợp, số thùy tràng lên tới 10 Số nhị thường với số thùy tràng nằm xen kẽ thùy, dính vào ống tràng họng tràng Bộ nhụy gồm hai nỗn dính vào thành bầu dưới, có hai buồng Một vịi nhụy mảnh, đầu nhụy chia hai Mỗi buồng bầu chứa đến nhiều noãn đảo hay thẳng Quả mọng, hạch hay khô (quả mở phân thành hạch nhỏ) Hạt thường có phơi thẳng có nội nhũ đơi khơng có [8,18] ed ici ne Trên giới, họ Cà phê (Rubiaceae) năm họ có nhiều lồi nhóm thực vật có hoa, với khoảng 13.000 nghìn lồi [18], phân bố 620 chi, 40 tông chia làm phân họ: Cinchonoideae, Ixoroideae, Rubioideae [18] fM Chúng tìm thấy tất lục địa, kể nam cực, với vài loài chi Coprosma, Galium, Sherardia [18] Phần lớn phân bố vùng nhiệt đới cận nhiệt đới Ở Việt Nam, theo tài liệu nghiên cứu công bố họ Cà phê cho thấy, họ có khoảng 93 chi 450 loài, phân bố rộng khắp nước [1,8] lo 1.1.2 Vị trí, phân loại chi Paederia [27]: Sc ho o Vị trí chi Paederia hệ thống phân loại thực vật Takhtajan (1987) Giới thực vật (Planta) Co p yr igh t@ Ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta) Lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida) Phân lớp Hoa Môi (Lamiidae) Bộ Cà Phê (Rubiales) Họ Cà Phê (Rubiaceae) Chi Paederia PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U CHƯƠNG – KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN 3.1 Chiết xuất H= Trong đó: 𝑎∗100∗100 𝑏∗(100−𝑥) an d a: Khối lượng cao arm ac y, Khối lượng dược liệu tươi: 2000 g Khối lượng dược liệu khô: 253,18 g Giá trị hàm ẩm dược liệu khô: 10,81% Khối lượng cao thu được: 29,22 g Hiệu suất chiết: 12,94% Hiệu suất chiết tính theo theo công thức: Ph - b: Khối lượng dược liệu khô ed ici ne x: Giá trị hàm ẩm (10,81%) 3.2 Phân tích định tính nhóm chất hữu có cao mơ 3.2.1 Kết phân tích định tính nhóm chất hữu phản ứng hóa học Co p yr igh t@ Sc ho o lo fM Sử dụng phản ứng thông thường để định tính nhóm chất hữu trình bày tài liệu [2,4], kết trình bày bảng 3.1 18 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark STT Nhóm chất Phản ứng Thuốc thử Trim -Hill Iridoid Kết ++ Flavonoid - Tác dụng với kiềm Saponin Phản ứng tạo bọt Tanin Phản ứng với FeCl3 Steroid Có - Tác dụng với FeCl3 Nhận xét arm ac y, Phản ứng Cyanidin VN U Bảng 3.1 Kết định tính nhóm chất hữu thường gặp mẫu cao mơ phản ứng hóa học Khơng - Khơng + Có Phản ứng Libermann-Burchardt - Khơng Tinh dầu Phản ứng với kiềm + Có Đường khử Phản ứng với thuốc thử Fehling - Không Terpennoid Phản ứng Salkowski ++ Có Alkaloid Phản ứng với thuốc thử Mayer + Có 10 Anthraquinon Phản ứng với NaOH + Có fM ed ici ne an d Ph - lo Ghi chú: (-): phản ứng âm tính, (+): phản ứng dương tính, (++): phản ứng dương tính rõ Co p yr igh t@ Sc ho o Nhận xét: Dựa vào phương pháp định tính phản ứng hóa học, ta sơ kết luận mơ lơng có chứa nhóm chất: Iridoid, tanin, tinh dầu, terpennoid, alkaloid, anthraquinon; không phát có mặt nhóm chất: Flavonoid, saponin, steroid, đường khử 19 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark an d Ph arm ac y, VN U 3.2.2 Kết phân tích định tính iridoid sắc ký lớp mỏng ed ici ne Hình 3.1 Sắc ký đồ pha đảo mẫu cao mơ với hệ dung môi MeOH-H2O tỷ lệ 1:2 (A), 2:1 (B), 1:1 (C) Co p yr igh t@ Sc ho o lo fM Nhận xét: Dựa vào hình ảnh sắc ký đồ trên, ta chọn hệ dung môi MeOH-H2O (1:2) cho kết tách chất tốt Hình 3.2 Sắc ký đồ pha đảo cao tổng với hệ dung môi MeOH-H2O (1:2) 20 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U Nhận xét: Sau phun thuốc thử H2SO4 hơ nóng mỏng, thấy xuất màu xanh dương màu nâu, đặc trưng cho thành phần iridoid [4] 3.2.3 Kết phân tích định tính sắc ký lỏng hiệu cao HPLC fM ed ici ne an d Ph arm ac y, Ta có hình ảnh sắc ký đồ HPLC mẫu cao Hình 3.3 Sắc ký đồ HPLC mẫu cao mơ Sc ho o lo Nhận xét: Hình ảnh sắc ký đồ cho tín hiệu rõ nét, chất có mẫu cao tách riêng rẽ Hình ảnh cho thấy tính đặc hiệu phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Co p yr igh t@ Ta có số hình ảnh phổ UV chất: 21 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U arm ac y, Ph an d Hình 3.4 Phổ UV chất có thời gian lưu 6,099 phút Sc ho o lo fM ed ici ne Chất hấp thụ tia UV cực đại bước sóng khoảng 325 nm, sơ xác định chất thuộc nhóm chất flavonoid [4,13] Hình 3.5 Phổ UV chất có thời gian lưu 10,212 phút Co p yr igh t@ Chất hấp thụ tia tử ngoại cực đại bước sóng khoảng 325 nm, sơ kết luận chất thuộc nhóm chất flavonoid [4,13] 22 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U arm ac y, Ph Hình 3.6 Phổ UV chất có thời gian lưu 11,146 phút lo fM ed ici ne an d Chất hấp thụ tia UV cực đại bước sóng khoảng 325 nm, sơ kết luận chất thuộc nhóm chất flavonoid [4,13] Sc ho o Hình 3.7 Phổ UV chất có thời gian lưu 15,039 phút Co p yr igh t@ Chất hấp thụ tia UV cực đại bước sóng khoảng 235 nm, sơ kết luận chất thuộc nhóm chất iridoid [4,19] 23 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U arm ac y, Ph Hình 3.8 Phổ UV chất có thời gian lưu 15,872 phút lo fM ed ici ne an d Chất hấp thụ tia UV cực đại bước sóng khoảng 260 nm, sơ xác định chất thuộc nhóm chất anthraquinon [4] Sc ho o Hình 3.9 Phổ UV chất có thơi gian lưu 16,532 phút Co p yr igh t@ Chất hấp thụ tia UV cực đại bước sóng khoảng 265 nm, sơ xác định chất thuộc nhóm chất anthraquinon [4] 24 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U arm ac y, Ph Hình 3.10 Phổ UV chất có thời gian lưu 17,012 phút Sc ho o lo fM ed ici ne an d Chất hấp thụ tia UV cực đại bước sóng khoảng 235 nm, sơ xác định chất thuộc nhóm chất iridoid [4,19] Hình 3.11 Phổ UV chất có thời gian lưu 18,539 phút Chất hấp thụ tia UV cực đại bước sóng khoảng 330 nm, sơ xác định chất thuộc nhóm chất flavonoid [4,13] igh t@ Nhận xét: Dựa vào phổ UV chất ứng với thời gian lưu, sơ xác định mẫu cao có chứa chất thuộc nhóm anthraquinon, flavonoid, iridoid 3.3 Định lượng iridoid tồn phần có mẫu cao mơ Co p yr Ta có kết dựng đường chuẩn mẫu iridoid bảng 3.2 hình 3.11: 25 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark 0,5 0,25 0,125 Giá trị A 0,76 0,37 0,196 0,09 Đồ thị đường chuẩn iridoid 0.8 an d 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0.2 0.4 ed ici ne Độ hấp thụ quang 0.6 0,04 Ph y = 0.7631x - 0.0045 R² = 0.9995 0.7 0,0625 arm ac y, Nồng độ (mg/ml) VN U Bảng 3.2 Nồng độ giá trị độ hấp thụ quang tương ứng mẫu chuẩn iridoid 0.6 0.8 1.2 Nồng độ (mg/ml) fM Hình 3.12 Đồ thi miêu tả tương quan tuyến tính độ hấp thụ quang nồng độ mẫu chuẩn iridoid Co p yr igh t@ Sc ho o lo Ta có phương trình hồi quy tuyến tính iridoid tồn phần độ hấp thụ quang bước sóng 609 nm nồng độ dung dịch là: y = 0,7631x – 0,0045 với hệ số R2 = 0,9995 Dựa vào mật độ quang đo mẫu thử liệu đường chuẩn trên, tính nồng độ iridoid mẫu thử hàm lượng iridoid mẫu cao đặc, kết trình bày Bảng 3.3 26 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U Bảng 3.3 Hàm lượng iridoid mẫu cao tính dựa vào độ hấp thụ quang mẫu thử Hàm lượng iridoid mẫu cao (mg/ml) (%) (mg/ml) (Abs) 12,5 0,237 0,316 25 0,473 0,625 40 0,754 0,994 2,52 2,5 2,48 Ph Giá trị A arm ac y, Nồng độ iridoid mẫu thử Nồng độ mẫu thử X= 𝑏 × 100 ed ici ne Trong đó: 𝑎 an d Hàm lượng iridoid mẫu cao tính theo cơng thức: a: Nồng độ iridoid mẫu thử tính dựa vào phương trình đường chuẩn b: Nồng độ dung dịch mẫu thử fM X: Hàm lượng iridoid mẫu cao (%) Sc ho o 3.4 Bàn luận lo Nhận xét: Như hàm lượng iridoid mẫu cao mơ xác định khoảng 2,5% 3.4.1 Về chiết xuất cao toàn phần từ mẫu mơ igh t@ Từ mẫu mơ lông thu mua chợ Bưởi, Hà Nội, tiến hành sấy khô sử dụng phương pháp chiết lạnh để chiết xuất cô lấy cao đặc Mẫu đem chiết lần cồn 80 độ, lần chiết vịng ngày Phương pháp có ưu điểm đơn giản, dễ thực hiện, thiết bị rẻ tiền nhiên hiệu suất chiết chưa cao Kết quả, từ 2000 g mẫu tươi, sấy khô thu 253,18 g mẫu khô, đem chiết xuất thu 29,22 g cao đặc Lượng cao đặc đạt tỉ lệ 11,54% so với lượng mẫu khô hiệu suất chiết đạt 12,94% yr 3.4.2 Về định tính mẫu cao mơ Co p Khóa luận tiến hành định tính mẫu cao mơ dựa theo phương pháp hóa học trình bày tài liệu Dược liệu học Thực tập dược liệu Phương pháp có ưu điểm đơn giản, dễ thực hiện, cho kết nhanh nhiên kết 27 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U phản ứng bị ảnh hưởng chất lượng hóa chất, độ nhạy phản ứng thao tác thực nghiệm Kết phép định tính thống với tài liệu nước mơ tam thể có mặt nhóm chất iridoid, anthraquinon, alkaloid, terpennoid, tinh dầu Nhóm sử dụng kỹ thuật sắc ký lớp mỏng để xác định có mặt nhóm chất iridoid mẫu cao arm ac y, Ngồi ra, nhóm nghiên cứu tiến hành định tính mẫu cao việc sử dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Kết cho thấy, ngồi chất thuộc nhóm iridoid anthraquinon, phát thêm chất thuộc nhóm flavonoid Đây phát quan trọng cần phải có thêm kỹ thuật khác để thẩm định tính xác kết an d Ph So với nghiên cứu trước PGS.TS Lê Ngọc Quang cộng mơ lông, việc sử dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao để định tính mẫu cao điểm đề tài khóa luận Tuy nhiên cần sử dụng thêm chất chuẩn vào phương pháp để định tính định lượng chất cụ thể có mẫu cao ed ici ne 3.4.3 Về định lượng iridoid toàn phần Co p yr igh t@ Sc ho o lo fM Về định lượng, nhóm sử dụng phương pháp đường chuẩn để định lượng iridoid toàn phần mẫu cao mơ Đây điểm đề tài Trước đó, Việt Nam chưa có nghiên cứu vào định lượng thành phần hóa học có mơ lông Phương pháp thực nhanh đơn giản kết bị ảnh hưởng thao tác thực nghiệm tính xác máy đo độ hấp thụ quang Hàm lượng iridoid mẫu cao xác định khoảng 2,5% Để định lượng xác hàm lượng nhóm chất iridoid có mẫu mơ lông, cần phải tách sử dụng chất chuẩn để định lượng hàm lượng chất riêng biệt nhóm chất 28 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark Kết luận VN U KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ arm ac y, Qua thời gian nghiên cứu đề tài, nhóm nghiên cứu thu số kết phù hợp với mục đích nghiên cứu ban đầu sau: ed ici ne an d Ph  Đã thu mẫu mơ lông sử dụng phương pháp chiết lạnh để tiến hành chiết xuất mẫu khô thu lấy cao đặc Kết từ 2000 g mẫu tươi, thu 253,18 g mẫu khô 22,29 g cao đặc Lượng cao đặc chiếm 11,54% so với lượng mẫu khô hiệu suất chiết đạt 12,94%  Đã định tính sơ nhóm chất có mơ lơng việc sử dụng phản ứng hóa học, kỹ thuật sắc ký lớp mỏng Kết phép định tính phù hợp với tài liệu tham khảo nói mơ tam thể có mặt nhóm chất chất iridoid, anthraquinon, alkaloid, terpennoid, tinh dầu Ngồi cịn phát thêm có mặt nhóm chất flavonoid định tính kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao  Đã định lượng hàm lượng iridoid tồn phần có mơ lông phương pháp đường chuẩn Kết quả, hàm lượng iridoid mẫu cao xác định khoảng 2,5% fM Tuy nhiên, điều kiện thời gian thực nghiên cứu ngắn, phương pháp nghiên cứu tương đối đơn giản, thao tác thực nghiệm chưa thật chuẩn xác số yếu tố khách quan khác, kết nghiên cứu số hạn chế định Có thể kể đến như: Sc ho o lo  Do sử dụng phương pháp chiết xuất đơn giản nên hiệu suất chiết chưa cao  Các phép định tính phát nhóm chất chung chưa đưa chất cụ thể  Đã phát định lượng hàm lượng iridoid tồn phần có mẫu cao chưa tách định lượng chất cụ thể nhóm chất igh t@ Kiến nghị Trên kết nghiên cứu nội dung nghiên cứu thành phần hóa học mơ tam thể Ngồi kết có được, nghiên cứu nhiều hạn chế Để khắc phục hạn chế này, đề tài cần tiếp tục: Co p yr  Tiếp tục nghiên cứu tối ưu quy trình chiết sử dụng phương pháp chiết khác nhằm nâng cao hiệu suất chiết 29 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark Co p yr igh t@ Sc ho o lo fM ed ici ne an d Ph arm ac y, VN U  Tiến hành chiết xuất phân đoạn mẫu cao toàn phần có với dung mơi ethyl acetat, butanol, n-hexan để nghiên cứu cụ thể thành phần hóa học mẫu  Sử dụng kỹ thuật sắc ký cột, sắc ký khối phổ để tiến hành phân lập hợp chất tinh khiết  Sử dụng kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) để định lượng số chất cụ thể thuộc nhóm chất iridoid có mẫu mơ  Xây dựng số mơ hình sinh học để đánh giá thêm tác dụng dược lý mơ lông 30 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark VN U TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tài liệu tiếng Việt arm ac y, Nguyễn Tiến Bân chủ biên (2003), Danh mục loài thực vật Việt Nam, Tập II, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, tr 1063-1093 Bộ môn Dược liệu (2010), Thực tập Dược liệu, Trường Đại học Dược Hà Nội Bộ Y Tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất Hà Nội Bộ Y tế (2011), Dược liệu học, tập 2, Nhà xuất Y học, Hà Nội Bộ Y tế, Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương (2007), Đảm bảo chất lượng Ph thuốc số phương pháp kiểm nghiệm thuốc, tr 107 – 113, tr 216-250 Bộ Y tế, Vụ khoa học đào tạo (2005), Kiểm nghiệm dược phẩm, Nhà xuất ed ici ne an d Y học, tr 75-76 Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hoá học thuốc, Nhà xuất Y học, tr 8-99, 162-196, 234-242 Trần Ngọc Ninh (1987), “Góp phần vào việc thống kê lồi thực vật có ích thuộc họ cà phê (Rubiaceae Juss) Việt Nam”, Tạp chí Sinh học, 9(2), 4044 Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Phương pháp cô lập chất hữu cơ, Nhà xuất lo Sắc ký, tr 12 fM ĐHQG TP HCM, tr 151-451 10 Trần Nhật Phương (2008), Học phần kỹ thuật Công Nghệ Sinh Học Proteomic- Sc ho o 11 Trường Đại học Dược Hà Nội, Bộ môn hố phân tích (2006), Hố phân tích II, tr 17, 99-146, tr 173-222 12 Viện Dược liệu (2006), Nghiên cứu thuốc từ thảo dược, Nhà xuất khoa học kỹ thuật, tr 199 – 222; 493 – 685 igh t@ B Tài liệu tiếng Anh Co p yr 13 Ann E Stapleton, Virginia Walbot (2008), “Flavonoids Can Protect Maize DNA from the Induction of Ultraviolet Radiation Damage”, Plant Physiology, 105(3), 881-889 14 Brison Guiide, Ch Erdenechimeg, B Dejidmaa (2017), “Total phenolic, flavonoid, alkaloid and iridoid content and preventive effect of Lider-7-tang on lipopolysaccsaride-induced acute lung injury in rats”, Brazilian Journal of Medical and Biological Research, 50, 591-595 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark 16 Dang Ngoc Quang (2009), “Anthraquinones from the Paederiascandens”, Journal of Chemistry (Vietnam), 47, 95-98 VN U 15 Dang Ngoc Quang and Le Huy Nguyen (2009), “Anthraquinones andcumarin from the roots of Paederia scandens”, Journal of Chemistry(Vietnam), 47, 428 roots of arm ac y, 17 Dang Ngoc Quang, Toshihiro Hashimoto, Masami Tanaka, NguyenXuan Ph Dung, Yoshinori Asakawa (2002), “Iridoid glucosides from roots of Vietnamese Paederia scandens”, Phytochemistry, 60, 505-514 18 Goevarts R, M Ruhsam, L Andersson, E Robbrecht, D Bridson, A Davis, I Schanzer, B Sonke (2006), “World checklist of Rubiaceae”, Royal Botanic Gardens, 25(3), 52-55 19 Jefferson Rocha de Andrade, Ana Claudia Fernandes (2007), “Quantitative an d determination by HPLC of iridoids in the bark and latex of Himatanthus sucuuba”, ACTA AMAZONICA, 37, 119-122 21 Inouye, H., Okigawa, ed ici ne 20 Inouye H., Shimokawa, N and Okigawa, M., (1969), “Studieson monoterpene glucosides”, Chemical Pharmaceutical Bulletin, 17, 1942-1948 M and Shimokawa (1969), “Studies on monoterpeneglucosides - Artefacts formed during extraction of asperuloside fM andpaederoside” Chemical Pharmaceutical Bulletin, 17, 1949-1954 22 Inouye, Saito, S., Taguchi, H and Endo (1969), “Zwei neueiridoidglucoside aus gardenia jasminoides: gardenosid und geniposid” Tetrahedron Letters, 28, Sc ho o lo 2347-2350 23 Kapadia G., Shukla, Y N., Bose, A K., Fujiwara, H and Lloyd, H.A (1979), “Revised structure of paederoside, a novel monoterpene Smethyl thiocarbonate”, Tetrahedron Letters, 22, 1937-1938 24 Rajesh Kumar Soni, Raghuveer Irchhaiya, Vihangesh Dixit (2017), “Paederia foetida linn: phytochemistry, pharmacological and traditional uses”, Co p yr igh t@ Interational journal of pharmaceutical sciences and research, 4, 4525-4530 25 Sasidharan S, Chen Y, Saravanan D, Sundram KM, Latha Y (2011), “Extraction, isolation and characterization of bioactive compounds from plants extracts”, Afr J Tradit Complement Altern Med, 8, 1-10 26 Shukla Y., Lloyd, H A., Morton, J F and Kapadia, G J (1976) “Iridoid glucosides and other constituents of Paederia foetida”, Phytochemistry, 1989 27 Takhtajan A.L (1997), “Diversity and Classification of Flowering Plants, Columbia University Press”, New York, USA PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark ... U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI ed ici ne ĐÀM VIỆT HÙNG PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN HĨA HỌC CỦA LÁ MƠ LÔNG VIỆT NAM lo fM (Paederia lanuginosa) Sc ho o KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC KHÓA: QH.2014... tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Phân tích thành phần hóa học mơ lông Việt Nam (Paederia lanuginosa)? ?? Mục tiêu đề tài: Chiết xuất xác định số thành phần hóa học có mơ lơng Đề tài thực với nội dung... Nghiên cứu hợp chất hóa học có hoạt tính từ mơ lơng hướng nghiên cứu triển vọng nhà khoa học giới quan tâm Tuy nhiên, Việt Nam, nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng dược lý mơ lông chưa nhiều Do