Nghiên cứu đặc điểm sinh thái học, sinh học và nhân giống bằng phương pháp giâm hom loài khôi tía (ardisia silvestris pitard) tại thạch an, cao bằng

1 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Hiện thuốc ngày có vai trị quan trọng đời sống người dân Theo tổ chức Y tế giới (WHO, 2015), khoảng 80% dân số giới sử dụng thuốc thảo dược từ dược liệu Cao Bằng tỉnh có nhiều điều kiện thuận lợi đất đai khí hậu để trồng phát triển loài thuốc Kết điều tra thuốc Cao Bằng cho thấy nguồn thuốc tự nhiên Cao Bằng có nhiều lồi, đa dạng, huyện có, tập trung nhiều huyện: Thơng Nơng, Bảo Lâm, Bảo Lạc, Hà Quảng, Nguyên Bình, Thạch An…Một số loài thuốc quý phân bố huyện Thạc An tỉnh Cao Bằng Khơi tía Khơi tía (Ardisia silvestris Pitard) lồi bụi, cao - 2m, phân cành ít, vỏ màu nâu tía hay nâu xám Theo y học cổ truyền, Khơi tía có chứa thành phần tanin glucosid, có tác dụng chống viêm, làm se vết loét, làm liền sẹo giảm gia tăng axit dày Nhờ chế này, Khơi tía có tác dụng điều trị dày tá tràng, làm giảm bớt ợ chua, nóng rát vùng thượng vị, kích thích lên da non làm lành dày, tá tràng nhanh chóng, giúp người bệnh có cảm giác dễ chịu khoan khối Khơi tía thuốc q, phân bố nhiều nơi số lượng không nhiều tái sinh hạt kém, lại bị khai thác với số lượng lớn nên nguồn hạt Mặt khác, nơi mọc lại bị khai thác phá rừng mạnh, nên khơng cịn mơi trường sống thích hợp Khơi tía liệt kê Sách Đỏ Việt Nam với mức độ đe dọa bậc V - nguy cấp “chỉ khai thác có mức độ giữ lại chưa đến tuổi thu hái Cấm khai thác loài Vườn quốc gia” Do lồi khơi tía cần nghiên cứu nhân giống bảo tồn.Xuất phát từ thực tiễn tiến hành thực đề tài “Nghiên cứu đặc điểm sinh thái học, sinh học nhân giống phương pháp giâm hom lồi Khơi tía (Ardisia silvestris Pitard) Thạch An, Cao bằng” làm sở cho việc bảo tồn Phát triển mở rộng vùng trồng Khơi tía địa bàn tỉnh Cao Bằng Mục tiêu nghiên cứu - Xác định đặc điểm sinh thái, sinh học lồi Khơi tía - Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống Khơi tía phương pháp giâm hom xác định loại hom, thời vụ, chất kích thích rễ, giá thể thích hợp để đem lại hiệu nhân giống tốt Ý nghĩa đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học - Kết nghiên cứu đề tài sở khoa học để nghiên cứu nhân giống phát triển loài Khơi tía - Làm tài liệu cho cơng tác nghiên cứu khoa học, tài liệu tham khảo khác loài Khơi tía 3.2 Ý nghĩa thực tiễn - Kết nghiên cứu đề tài cung cấp thông tin việc nhận dạng lồi Khơi tía, điều kiện sinh thái gây trồng đồng thời nghiên cứu kỹ thuật nhân giống Khơi tía, sở giúp người dân mở rộng mơ hình trồng Khơi tía góp phần tạo việc làm nâng cao đời sống phát triển kinh tế hộ gia đình - Việc nghiên cứu lồi góp phần bổ sung tài liệu, bảo tồn lồi Khơi tía Chương TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 1.1 Một số đặc điểm loài Khơi tía Khơi tía có tên Khoa học: Ardisia silvestris Pitard Tên tiếng Việt: Khơi tía, Cơm nguội rừng, Lá khơi tía, Khơi nhung, Đơn tướng qn Khơi tía thuộc họ Đơn nem (Myrsinaceae), Anh Thảo (Primulalales) Phân bố nơi sống: Cây phân bố Việt Nam Trung Quốc (Hải Nam) Ở Việt Nam, có gặp từ Lào Cai, Lạng Sơn, Hà Giang, Quảng Ninh, Vĩnh Phúc, Hà Tây, Hịa Bình, Ninh Bình, Thanh Hóa, Nghệ An vào tới Quảng Nam Đà Nẵng Cây ưa bóng tán rừng rậm ẩm ướt, phát triển tốt lớp đất nhiều mùn rừng nguyên sinh, độ cao từ 400 - 1200m (Phạm Hoàng Hộ, 2006) Đặc điểm thực vật: Cây nhỏ cao khoảng 50 -200cm, không lơng, thân rỗng xốp, phân nhánh, thân non có sẹo sâu, có vỏ màu xám Lá mọc so le, sít đầu thân, phiến hình giáo ngược trứng ngược dài 20 - 40cm, rộng - 12cm, đầu thon nhọn, gốc thon dài men rộng gốc, màu lục sẫm trên, nhạt màu có màu đỏ tím, mép khía cưa nhỏ; gân bên 28 - 32 đôi, cuống khơng có Cụm hoa bên, thành chùm dài - 10cm, trục mang - trục thứ cấp mang - 10 hoa tập hợp thành tán Hoa mẫu Hoa mọc thành chùm, dài 10-15m, màu trắng pha hồng tím gồm đài cánh hoa Lá đài thuôn, nhọn, mép có lơng mi, có răng, có tuyến Cánh hoa xoan, giáo, tù, có tuyến Nhị có nhị ngắn Bầu hình trứng, vịi mảnh, đầu nhụy hình chấm Quả mọng, chín màu đỏ Hạt hình cầu, dẹp, có hốc nhỏ gốc Mùa hoa tháng - 7, mùa chín tháng 10 - 12 năm sau Tái sinh tự nhiên hạt (Sách đỏ Việt Nam, 2007) Tại Việt Nam loài đánh giá nguy cấp Mức độ đe dọa: Bậc V Tuy phân bố nhiều nơi số lượng không nhiều tái sinh hạt kém, lại bị khai thác với số lượng lớn nên nguồn hạt để tái sinh Mặt khác nơi có mọc lại bị khai thác phá rừng mạnh nên bị tuyệt chủng khơng cịn mơi trường sống thích hợp (Đỗ Tất Lợi, 2004) Thành phần hóa học tác dụng dược lý:Thành phần Tanin có cơng dụng trung hòa, làm giảm độ acid dày, giảm đau, đặc biệt có tác dụng làm se vết loét, kích thích lên da non làm lành vết thương nên dùng để trị viêm loét dày tá tràng Lá Khơi tía sử dụng làm thuốc chữa đau bụng, đau dày; dùng nấu nước tắm sài lở giã đắp nhọt cho trẻ em Rễ dùng uống chữa kiết lỵ máu, đau yết hầu đau nhục (Đỗ Tất Lợi, 2004) Thị trường: Lá Khơi tía thị trường giá bán khoảng 40.000 đồng/ 1kg tươi, 220.000 đồng/kg khơ Hình 1.1 Cây Khơi tía khu vực nghiên cứu 1.2 Những nghiên cứu lồi Khơi tía Việt Nam Nói tác dụng chữa bệnh khơi tía phải kể đến nghiên cứu tác dụng chế phẩm HPmax điều trị loét hành tá tràng có Helicobacter pylori Phạm Bá Tuyến với việc kết hợp Cao khô Chè dây, Dạ cẩm Lá Khơi Kết Hpmax có tác dụng chống lt dày tá tràng, giảm đau, liền sẹo, giảm thể tích dịch rỉ viêm, chống viêm mạn tính, Phạm Bá Tuyến (2014) Về thành phần hóa học lồi chi Aridisia, theo Lưu Tuấn Anh (2013), Nghiên cứu thành phần hóa học lồi Ardisia balansana thuộc họ Đơn nem (Myrsinaceae) Việt Nam, kết thành công việc phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ lá, thân, rễ Ardisia balansana Mới nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học số loài Ardisia thuộc họ Myrsinaceae Việt Nam Trịnh Anh Viên (2017) phân lập xác định cấu trúc 40 hợp chất có hợp chất mới, 12 hợp chất lần phân lập từ chi Ardisia; nghiên cứu cịn thăm dị hoạt tính kháng nấm, kháng khuẩn, kháng virut hoạt tính gây độc tế bào số hợp chất phân lập Một số nghiên cứu nhân giống Khơi tía giâm hom tiến hành sử dụng kích thích rễ NAA với nồng độ 250ppm (Đặng Thị Minh (2013); Nguyễn Đình Ưng Cs (2009) Nghiên cứu nhân giống Khơi tía (Ardisia sylvestris Pitard) kỹ thuật ni cấy in vitro tác giả Nguyễn Văn Việt cộng nghiên cứu năm 2016, kết nghiên cứu cho thấy, cảm ứng tạo đa chồi môi trường khoáng MS bổ sung 0,4mg/l BAP, 0,2 mg/l Kinetin 30g/l Sucroza, cho tỷ lệ mẫu tạo cụm chồi 97,77% với hệ số nhân đạt 3,66 lần/chu kỳ nhân giống sau tuần nuôi cấy Chồi rễ 93,33%, số rễ trung bình 4,14 rễ/cây chiều dài rễ Sucroza sau tuần nuôi cấy Các nghiên cứu nhân giống Khôi Nhung thời gian qua ghi nhận nhiều kết tích cực Trong nghiên cứu nhân giống trồng thử nghiệm Lá khôi Vườn Quốc gia Bái Tử Long kỹ sư Nguyễn Đình Ưng năm 2009 Kết thời gian thực 36 tháng (tháng 10.2009 - 9.2012) đề tài nhân giống 4.000 Lá khôi xây dựng thành cơng mơ hình trồng thử nghiệm Khơi diện tích ha, tỷ lệ sống đạt 92,5%, chiều cao trung bình đạt 99,6 cm, đường kính gốc 2,6 cm Đồng thời nhóm thực đề tài xây dựng hướng dẫn kỹ thuật nhân giống trồng Khôi Kết thu đề tài góp phần bảo tồn nguồn gen loài dược liệu quý Vườn Quốc gia Bái Tử Long 1.3 Những nghiên cứu lồi Khơi tía giới Khơi tía có tên khoa học Ardisia silvestris Pitard, thuộc họ Myrsinaceae (Thomas, 2006) Loài phân bố số tỉnh Hải Nam, Quảng Tây, Quảng Đông Trung quốc Là bụi, cao - 2m, phân cành ít; vỏ màu nâu tía hay nâu xám (Thomas, 2006) Tại Trung quốc, Khơi tía thu mua với giá 25 tệ (tương đương 60.000 đồng Việt Nam) Trung Quốc nước có lịch sử dài sử dụng lồi Khơi tía loại thảo dược q (Bulpitt, 2005) Theo y học cổ truyền, Khơi tía có chứa thành phần tanin glucosid, có tác dụng chống viêm, làm se vết loét, làm liền sẹo giảm gia tăng axit dày Nhờ chế này, Khơi tía có tác dụng điều trị dày tá tràng, làm giảm bớt ợ chua, nóng rát vùng thượng vị, kích thích lên da non làm lành dày, tá tràng nhanh chóng, giúp người bệnh có cảm giác dễ chịu khoan khối (Thomas, 2006) Các loài thực vật thuộc chi Ardisia họ Myrsinaceae nghiên cứu từ sớm giới Ngay từ năm 1968, Ogawa Hideko cộng tìm thấy hợp chất ardisiaquinon A, B, C từ loài Ardisiasieboldi Nhật Bản Trong nghiên cứu hợp chất Triterpene Saponins chiết suất từ Ardisia crispa Jansakul C (1986) phân lập rễ Ardisia crispa có 19 hợp chất tritecpen saponin hợp chất ardisiacrispin A & B cịn tìm thấy từ loài A crispa, A brevicaulis Năm 1987, từ rễ thân loài A cornudentata, lần phân lập hợp chất 1,4benzoquinon nghiên cứu Quinones từ Ardisia cornudentata Tian Z Nghiên cứu phân lập Antitubercular Resorcinol Analogs Benzenoid CGlucoside từ rễ Ardisia cornudentata ChunPo Chang cộng (2010) phân lập gốc rễ Ardisia Cornudentata Mez thành ba hợp chất 3-methoxy-2methyl-5-pentylphenol, 3-methoxy-2-methyl-5-(1′-ketopentyl)phenol cornudoside 26 hợp chất khác biết đến, 13 số hợp chất cho thấy hoạt động chống vi trùng, hợp chất cho kết chống lại tế bào ung thư 1.4 Đánh giá chung tình hình tổng quan nghiên cứu Nhìn chung nghiên cứu Lồi Khơi tía Việt Nam giới tác giả đưa đặc điểm hình thái, đặc điểm phân bố chung chung lồi Khơi tía Tuy nhiên chưa so sánh sai khác đặc điểm hình thái, phân bố Khơi tía vùng khác Các nhà khoa học nghiên cứu công bố thành phần hóa học tác dụng dược lý lồi Khơi tía từ cho thấy tầm quan trọng tác dụng chữa bệnh hiệu loài Các nghiên cứu bảo tồn nhân giống loài Khơi tía giới Việt Nam có số cơng trình cơng bố, nhiên nghiên cứu nhân giống Khơi tía chưa nhiều, áp dụng phương pháp nhân giống hiệu thích hợp cho vùng, địa phương chưa cụ thể Chính để bảo tồn phát triển lồi Khơi tía theo vùng miền địa phương, cần có cơng trình nghiên cứu từ đặc điểm phân bố sinh thái, đặc điểm sinh học, biện pháp nhân giống cho vùng cụ thể để đưa kết tốt áp dụng vào thực tế triển khai mở rộng quy mơ trồng lồi Khơi tía đem lại hiệu kinh tế cao cho người dân 1.5 Tổng quan giâm hom Giâm hom phương pháp nhân giống vơ tính trồng quan sinh dưỡng Nhân giống vơ tính phương pháp giâm hom phương pháp nhân giống đem lại hiệu cao áp dụng phổ biến nước suốt thời gian qua Phương thức dựa sở phân bào nguyên nhiễm kết hợp vật chất di truyền giao hợp giao tử giao tử đực nên tạo mang đầy đủ vật chất di truyền mẹ (Lê Đình Khả CS, 2003) Nhân giống hom phương pháp sử dụng đoạn thân, cành, để tạo mang đặc tính di truyền mẹ Đây phương pháp tương đối dễ thực hiện, hệ số nhân giống cao nên áp dụng phổ biến công tác nhân giống trồng Các loại hom dùng nhân giống: thân non, cành, lá, rễ Hom thân hom cành: hom cắt từ phần thân non, từ chồi vượt cành non Như số loại tre, luồng hom giâm đoạn thân, đoạn thân có gốc, đoạn cành đoạn gốc cành sát thân Hom loài thân gỗ lấy từ thân non cành non Các loại cành giâm thường cành non, cành hóa gỗ yếu, cành nửa hóa gỗ, cành hóa gỗ Hom rễ loại hom cắt từ rễ Một số loại dùng rễ để giâm hom Xoan, Long não, Lê, Hồng Ngoài số lồi thực vật người ta giâm hom từ (thu hải đường, Sống đời, ) từ củ (Khoai lang, Khoai tây, ) Ở số loài nhân giống hom thường có tượng bảo lưu cục tượng mà hom tiếp tục sinh trưởng phát triển hình thái theo đặc trưng cành lấy từ mẹ * Cơ sở tế bào học: Tế bào chứa nhiễm sắc thể mang đầy đủ thơng tin di truyền cho q trình phát triển sinh vật Trong q trình sinh sản vơ tính, tạo có nguồn gốc từ mẹ * Cơ sở di truyền học: Trong trình sinh trưởng phát triển trải qua nhiều lần phân bào liên tiếp với trình phân hóa quan Q trình phân bào giảm nhiễm kết từ tế bào mẹ cho tế bào mang nhiễm sác thể y hệt tế bào mẹ Các loại hom xuất phát từ phận sinh dưỡng mẹ nên tạo mang đủ đặc tính vốn có mẹ * Sự hình thành rễ bất định: Nhân giống hom dựa sở hình thành tái sinh rễ bất định đoạn thân đoạn cành điều kiện thích hợp để tạo thành thể Rễ bất định rễ phận cây, ngồi hệ rễ giâm hom điều quan trọng hình thành rễ bất định Có hai rễ bất định rễ tiềm ẩn rễ sinh Rễ tiềm ẩn rễ có nguồn gốc tự nhiên thân, cành cây, phát triển thân cành tách khỏi thân Rễ sinh hình thành cắt hom * Cơ sở sinh lý: Sự hình thành rễ trình giâm hom chịu ảnh hưởng nhóm nhân tố: Nội sinh ngoại sinh - Đặc điểm di truyền suất xứ, cá thể: + Tuổi mẹ lấy hom: Khả rễ khơng tính di truyền định mà phụ thuộc lớn vào tuổi mẹ lấy cành Thông thường chưa sinh sản hạt dễ nhân giống hom sinh sản hạt, hom lấy từ tuổi non dễ rễ hom lấy từ tuổi già Ví dụ : Hom lấy từ Mỡ tuổi, tuổi, 20 tuổi có khả rễ tương ứng 98%, 47%, 0% (Lê Đình Khả, 2003) Cây non khơng có tỷ lệ rễ lớn mà thời gian rễ ngắn Khả rễ giảm xuống hom giâm nhiều tuổi giải thích tỷ lệ đường tổng số đạm tổng số (tỷ lệ đường/đạm) cao thân cây, nói cách khác hàm lượng đạm thân giảm xuống trường hợp Quercusrobur Song có người cho nhiều tuổi rễ tính mềm dẻo chúng bị giảm + Vị trí cành tuổi cành lấy hom: Hom lấy từ phần khác thân có tỷ lệ rễ khác Thơng thường hom lấy từ cành tầng rễ rễ cành tầng trên, cành cấp dễ rễ cành cấp 2, cấp Cành chồi vượt dễ rễ cành lấy từ tán Tuy nhiên khả rễ cao cành chồi vượt thay đổi theo vị trí lấy hom Tuổi cành ảnh hưởng lớn đến tỷ lệ rễ Thông thường cành nửa hóa gỗ (cành bánh tẻ) loại cành thường cho tỷ lệ rễ cao nhất, cành hóa gỗ yếu hóa gỗ thơng thường cho tỷ lệ rễ - Các chất kích thích rễ: Trong chất điều hịa sinh trưởng Auxin coi chất quan trọng trình rễ hom Song nhiều chất khác tác động Auxin thay đổi hoạt tính Auxin tồn cách tự nhiên mô hom giâm tác động đến trình rễ chúng Trong quan trọng Khizocalin, đồng nhân tố rễ, chất kích thích kìm hãm rễ - Thời vụ giâm hom: Là nhân tố quan trọng ảnh hưởng tới rễ hom giâm Tỷ lệ rễ hom giâm phụ thuộc vào thời vụ lấy cành thời vụ giâm hom Một số lồi giâm hom quanh năm, song nhiều lồi có tính chất thời vụ rõ rệt Hom lấy thời kỳ mẹ hoạt động sinh trưởng mạnh có tỷ lệ rễ cao thời kỳ khác - Chế độ ánh sáng: Ánh sáng đóng vai trị sống cịn rễ hom giâm Khơng có ánh sáng khơng có hom khơng có hoạt động quang hợp, q trình trao đổi chất khó xảy ra, khơng có hoạt động rễ Chất lượng ánh sáng ảnh hưởng đến tỷ lệ rễ hom giâm Ánh sáng tự nhiên cần thiết cho rễ, ánh sáng đỏ ánh sáng xanh làm giảm tỷ lệ rễ hom giâm số loại ưa sáng Tuy nhiên, ảnh hưởng ánh sáng đến khả rễ hom giâm thường mang tính chất tổng hợp theo kiểu phức hệ ánh sáng tác động đến rễ hom với có mặt cây, hom khơng có khơng chịu ảnh hưởng ánh sáng khơng có hoạt động rễ - Nhiệt độ: Nhiệt độ nhân tố định tốc độ rễ hom giâm Ở nhiệt độ thấp hom giâm nằm trạng thái tiềm ẩn khơng rễ, cịn nhiệt độ cao lại tăng cường nhiệt độ bị hỏng, từ làm giảm tỷ lệ rễ Các lồi nhiệt đới cần nhiệt độ khơng khí nhà giâm hom thích hợp cho rễ 28-33 C nhiệt độ giá thể thích hợp 25-30 C (Longman, 1993) Nếu nhiệt độ khơng khí 35 C làm tăng tỷ lệ héo (Nguyễn Ngọc Tân cộng sự, 1984) Nói chung nhiệt độ khơng khí nhà giâm hom nên cao nhiệt độ giá thể o 2-3 C 10 - Độ ẩm: Độ ẩm khơng khí độ ẩm giá thể nhân tố quan trọng trình giâm hom Các hoạt động quang hợp, hơ hấp, phân chia tế bào chuyển hóa vật chất cần nước Thiếu nước hom bị héo, nhiều nước hoạt động men thủy giải tăng lên, trình quang hợp bị ngừng trệ Khi giâm hom loài cần độ ẩm thích hợp, làm độ ẩm hom 15-20% hom hồn tồn khả rễ Đối với nhiều loại độ ẩm giá thể thích hợp cho giâm hom 5070% Yêu cầu độ ẩm khơng thay đổi theo lồi mà cịn theo mức độ hóa gỗ hom giâm Để đảm bảo độ ẩm cho hom bắt buộc phải phun sương vừa làm tăng độ ẩm, vừa làm giảm nhiệt độ không khí, giảm bốc - Giá thể giâm hom: Các giá thể dùng chủ yếu cát tinh, mùn cưa xơ Dừa băm nhỏ đất vườn ươm Khi giâm hom tạo rễ, sau cấy hom vào bầu giá thể thường cát tinh, cịn giâm hom trực tiếp vào bầu để tạo thành hom giá thể thường mùn cưa để mục, xơ Dừa băm nhỏ, đất vườn ươm trộn lẫn chúng với cát tinh Một giá thể giâm hom tốt có độ thống khí tốt trì độ ẩm thời gian dài mà không ứ nước, tạo điều kiện cho rễ phát triển tốt đồng thời phải sạch, khơng bị nhiễm nấm, khơng có nguồn sâu bệnh, độ pH khoảng 6-7 * Ý nghĩa nhân giống hom: - Nhân giống hom phương pháp truyền đạt biến dị di truyền mẹ cho hom - Nhân giống hom phương thức lưu giữ ưu lai cho đời F1 Nhân giống hom làm rút ngắn chu kỳ sinh sản, rút ngắn thời gian thực - Nhân giống hom phương pháp phát triển nhân nhanh loại quý bị khai thác cạn kiệt, phương pháp phát triển bảo tồn nguồn gen rừng - Nhân giống hom phương thức nhân giống bổ sung cho loại khó thu hái bảo quản * Ưu điểm phương pháp giâm hom: - Hệ số nhân cao: Từ mẹ, giống tốt lấy nhiều cành hom để tạo nhiều (Mai Quang Trường cs, 2007) - Giữ nguyên đặc tính mẹ, chất lượng tính chống chịu ổn định 33 Hom non Hom già Hình 3.6 Hom Khơi tía non già sau 30 ngày giâm hom Hình 3.7 Hom Khơi tía bánh tẻ sau 30 ngày giâm hom 3.3.2 Kêt nghiên cứu ảnh hưởng thời vụ đến nhân giống giâm hom Khơi tía Sau lựa chọn loại hom Khơi tía thích hợp để làm vật liệu nhân giống, tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng thời vụ đến nhân giống giâm hom 34 Khơi tía Tiến hành thí nghiệm vào mùa Xn, Hè, Thu, Đơng (Cụ thể vào tháng 2, 5, tháng 11 dương lịch) Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời vụ đến nhân giống giâm hom Khơi tía sau 30 ngày theo dõi thể bảng 3.7 Bảng 3.7 Kết ảnh hưởng thời vụ đến nhân giống giâm hom Khơi tía Cơng thức CT1 CT2 CT3 CT4 Kết xử lý số liệu với LSD 0.05 3,14; 5,32; 0,58 CV 2,4; 4,4; 1,2 với sai số 0,05 % độ tin cậy 95 % cho thấy thời vụ giâm hom khác có ảnh hưởng khác tới kết giâm hom Khơi tía Giâm hom vụ Xuân cho kết tỉ lệ hom sống, tỷ lệ hom rễ cao tương ứng 100% 97,78%, số ngày bật chồi ngắn 19 ngày, chồi mập, xanh Tiếp đến giâm vào vụ thu cho kết tỉ lệ hom sống tỷ lệ rễ tương ứng 75,56% 68,89%, số ngày bật chồi 23 ngày, chồi mập xanh Giâm hom Khơi tía vào vụ hè cho kết tỉ lệ sống tỷ lệ rễ thấp tương ứng 34,44% 30,00%, số ngày bật chồi lâu trung bình 31 ngày, chồi nhỏ vàng Kết giải thích sau: Thân Khơi tía rỗng, xốp giâm hom thời gian đầu hom tươi sống sau hom khơng rễ bị chết Giâm hom vào mùa hè, điều kiện khí hậu nắng nóng hom giâm bị nước nhiều nên hom chưa kịp hình thành rễ, chất dinh dưỡng dự trữ bị cạn kiệt hom bị chết nhiều Khi giâm hom Khơi tía vào vụ đơng gặp điều kiện thời tiết khí hậu lạnh, khơ nên tỷ lệ hom sống thấp so với hai mùa thu xuân Để có kết giâm hom Khơi tía tốt nên tiến hành giâm hom vào mùa Xuân khí hậu ấm áp thuận lợi cho sinh trưởng, phát triển hom 35 Hình 3.8 Giâm hom Khơi tía vụ Xuân 3.3.3 Ảnh hưởng chất kích thích rễ đến nhân giống giâm hom Khơi tía Ở cơng thức thí nghiệm lựa chọn hom bánh tẻ giâm hom vào vụ Xuân cho kết tỉ lệ hom sống hom rễ cao Tiếp tục tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích rễ đến tỷ lệ sống, tỉ lệ rễ chất lượng chồi hom Khơi tía Bố trí thí nghiệm với loại chất kích thích rễ IAA, IBA NAA Tiến hành cắt hom vào buổi sáng trời mát Lựa chọn hom bánh tẻ mập, khỏe, không sâu bệnh Pha chất kích thích rễ với nồng độ khác nhau, sau cắt hom xong tiến hành ngâm vào dung dịch chất kích thích chuẩn bị trước, sau thời gian 10 – 15 phút vớt hom để nước tiến hành giâm vào bầu đất ẩm Sau giâm xong dùng lưới đen che lên đảm bảo độ giâm mát cho hom giâm, hàng ngày kiểm tra bầu giâm tưới ẩm Kết theo dõi đo đếm sau 30 ngày thể bảng 3.8 36 Bảng 3.8 Kết nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích rễ đến tỉ lệ sống hình thành rễ hom Khơi tía Chất kích thích rễ (ppm) 100 IAA 200 300 100 IBA 200 300 100 NAA 200 300 ĐC LSD0.05 CV% Với độ tin cậy 95%, từ kết bảng 3.8 ta thấy chất kích thích rễ khác nồng độ khác có ảnh hưởng đến kết nhân giống giâm hom Khơi tía Trong đó, cơng thức có sử dụng chất kích thích rễ cho kết rễ tốt công thức đối chứng không sử dụng thuốc Với chất kích thích rễ IAA nồng độ 300 ppm nồng độ cho kết giâm hom tốt so với nồng độ IAA khác với tỷ lệ hom sống 67,78%, tỷ lệ hom rễ 62,22%; Số rễ trung bình/hom 2,64 rễ; Chiều dài rễ trung bình 2,96 cm Chỉ số rễ đạt 7,82, chồi mập, xanh Tiếp đến IAA nồng độ 200 ppm với tỷ lệ hom sống 44,44%, tỷ lệ hom rễ 41,11%; Số rễ trung bình/hom 2,01 rễ; Chiều dài rễ trung bình 2,31cm Chỉ số rễ đạt 4,64, chồi mập, xanh Thấp IAA nồng độ 100 ppm với tỷ lệ hom sống 38,89%, tỷ lệ hom rễ 35,56%; Số rễ trung 37 bình/hom 1,88 rễ; Chiều dài rễ trung bình 2,15 cm Chỉ số rễ đạt 4,04, chồi nhỏ, vàng Với chất kích thích rễ IBA nồng độ 300 ppm nồng độ cho kết giâm hom tốt so với nồng độ IBA khác với tỷ lệ hom sống 87,78%, tỷ lệ hom rễ 78,89%; Số rễ trung bình/hom 3,64 rễ; Chiều dài rễ trung bình 3,87 cm Chỉ số rễ đạt 14,06, chồi mập, xanh Tiếp đến IBA nồng độ 200 ppm với tỷ lệ hom sống 82,22%, tỷ lệ hom rễ 72,22%; Số rễ trung bình/hom 3,26 rễ; Chiều dài rễ trung bình 3,48 cm Chỉ số rễ đạt 11,35, chồi mập, xanh Thấp IBA nồng độ 100 ppm với tỷ lệ hom sống 62,22%, tỷ lệ hom rễ 55,56%; Số rễ trung bình/hom 2,38 rễ; Chiều dài rễ dài 2,55 cm Chỉ số rễ đạt 6,06, chồ nhỏ,vàng Với chất kích thích rễ NAA nồng độ 200 ppm nồng độ cho kết giâm hom tốt so với nồng độ NAA khác với tỷ lệ hom sống 98,89%, tỷ lệ hom rễ 97,78%; Số rễ trung bình/hom 4,37 rễ; Chiều dài rễ trung bình 4,45 cm Chỉ số rễ đạt 19,46 chồi mập, xanh Tiếp đến NAA nồng độ 300 ppm với tỷ lệ hom sống 92,22%, tỷ lệ hom rễ 85,56%; Số rễ trung bình/hom 3,92 rễ; Chiều dài rễ dài 4,08 cm Chỉ số rễ đạt 16,02, chồi mập, xanh Thấp NAA nồng độ 100 ppm với tỷ lệ hom sống 77,78%, tỷ lệ hom rễ 68,89%; Số rễ trug bình/hom 2,94 rễ; Chiều dài rễ dài 3,23 cm Chỉ số rễ đạt 9,48, chồi nhỏ, vàng Cơng thức đối chứng khơng sử dụng chất kích thích rễ cho kết giâm hom thấp nhất: tỷ lệ hom sống 32,22%, tỷ lệ hom rễ 27,78%; Số rễ Trung bình/hom 1,76 rễ; Chiều dài rễ trung bình 1,81 cm Chỉ số rễ đạt 3,18, chồi nhỏ, vàng So sánh cơng thức sử dụng chất kích thích rễ khác IAA, IBA NAA, kết cho thấy bổ sung chất kích thích rễ NAA với nồng độ 200 ppm cho hiệu giâm hom Khơi tía tốt nhất, chồi mập xanh 38 Hình 3.9 Giâm hom Khơi tía sử dụng chất kích thích rễ NAA 200 ppm 3.3.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng giá thể đến nhân giống giâm hom Khơi tía Kế thừa kết nghiên cứu công thức lựa chọn loại hom bánh tẻ, thời vụ giâm hom vào mùa xuân chất kích thích rễ tốt NAA nồng độ 200 ppm tiến hành tiếp tục nghiên cứu ảnh hưởng giá thể đến nhân giống giâm hom Khơi tía Kết nghiên cứu thể bảng 3.9 Bảng 3.9 Kết nghiên cứu ảnh hưởng giá thể đến tỉ lệ sống hình thành rễ hom Khơi tía Cơng thức CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 LSD0.05 CV% 39 Với độ tin cậy 95% giâm hom Khơi tía loại giá thể khác cho kết tỉ lệ hom sống, tỷ lệ hom rễ, số rễ trung bình/hom chiều dài rễ trung bình khác Cơng thức với giá thể: 90% Đất tầng A + 5% Cát + 5% Phân chuồng hoai mục cho kết giâm hom tốt với tỉ lệ hom sống đạt 72,22%; tỷ lệ hom rễ đạt 67,78%; Số rễ trung bình/hom 3,97 rễ; Chiều dài rễ trung bình 2,93 cm Chỉ số rễ 11,62, chồi mập, xanh Tiếp đến công thức với giá thể: 85% Đất tầng A + 10% Cát + 5% Phân chuồng hoai mục cho kết giâm hom cao thứ hai với tỉ lệ hom sống đạt 67,78%; tỷ lệ hom rễ đạt 61,11%; Số rễ trung bình/hom 3,49 rễ; Chiều dài rễ trung bình 2,62 cm Chỉ số rễ 9,15, chồi mâp, xanh Công thức với giá thể: 80% Đất tầng A + 15% Cát + 5% Phân chuồng hoai mục cho kết giâm hom với tỉ lệ hom sống đạt 61,11%; tỷ lệ hom rễ đạt 55,56%; Số rễ trung bình/hom 3,18 cái; Chiều dài rễ dài 2,36 cm Chỉ số rễ 7,41, chồi nhỏ, xanh Công thức với giá thể: 95% Đất tầng A + 5% Phân chuồng hoai mục cho kết giâm hom với tỉ lệ hom sống đạt 57,78%; tỷ lệ hom rễ đạt 51,11%; Số rễ trung bình/hom 2,94 cái; Chiều dài rễ dài 2,15 cm Chỉ số rễ 6,41, chồi nhỏ, xanh Công thức với giá thể: 95% Cát + 5% Phân chuồng hoai mục cho kết giâm hom thấp với tỉ lệ hom sống đạt 48,89%; tỷ lệ hom rễ đạt 41,11%; Số rễ trung bình/hom 2,49 cái; Chiều dài rễ dài 2,00 cm Chỉ số rễ 5,17, chồi vàng, nhỏ Như tiến hành giâm hom Khơi tía nên sử dụng giá thể 90% Đất tầng A + 5% Cát + 5% Phân chuồng hoai mục để đạt kết giâm hom tốt 40 CT3 (tốt nhất) CT5 (thấp nhất) Hình 3.10 Thí nghiệm nghiên cứu giá thể giâm hom Khơi tía 41 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận * Đặc điểm sinh thái học Khơi tía: Kết nghiên cứu xã Lê Lai, Đức Long, Đức Thông huyện Thạch An tỉnh Cao Bằng cho thấy Khơi tía lồi ưa ẩm ưa bóng thường mọc rừng nơi ẩm nhiều mùn, ven suối Khu vực phân bố Khơi tía có khí hậu ẩm mát quanh năm, nhiệt độ trung bình khoảng 20-24 C, độ ẩm khơng khí trung bình từ 81-84%, tổng lượng mưa năm dao động từ 1.195,6 mm - 1.648,9 mm, độ che sáng từ 50 – 70% Đất nơi Khơi tía phân bố có màu từ xám nhạt đến xám đen, tầng đất mặt tơi xốp, nhiều mùn, ẩm ướt, thành phần giới đất từ thịt nhẹ, trung bình đến nặng, tỉ lệ lẫn đá ít, khả thấm, nước tốt Khơi tía phân bố độ cao từ 290 – 550 m, chủ yếu trạng thái rừng IIa, loài ưu tổ thành gỗ chủ yếu loài Dẻ gai bắc bộ, Chân chim, Sồi, thành phần bụi đa dạng, gồm số loài như: Đỗ quyên, Cam núi, Lấu, Tam tầng, Găng, Bọ mẩy, Chè, Ngấy, Bùm bụp, Mò, Ba gạc, Màng tang, Đơn nem, Đắng cẩy, Ớt rừng, Bùm bụp, Mò , thành phần thảm tươi khu vực nghiên cứu có cá loài chủ yếu: Dương xỉ, Thảo quả, Cỏ tre, Gừng gió * Đặc điểm sinh học Khơi tía: Cây Khơi tía cao khoảng 50 - 200cm, thân khơng có lơng, rỗng xốp, phân nhánh, thân non có sẹo sâu, có vỏ màu xám Lá Khơi tía mọc so le, sít đầu thân, phiến hình giáo ngược trứng ngược, đầu thon nhọn, gốc thon dài men rộng gốc, màu lục sẫm trên, nhạt màu có màu đỏ tím, mép khía cưa nhỏ; gân bên 28 - 32 đơi, có lơng màu nâu gân, nhiều mặt dưới, gân bên 28-35 đơi, gân cấp hình mạng rõ mặt Hoa Khơi tía mọc thành chùm, dài 10-15m, trục mang - trục thứ cấp mang - 10 hoa tập hợp thành tán Hoa mẫu 5, màu trắng pha hồng tím gồm đài cánh hoa Lá đài thuôn, nhọn, mép có lơng mi, có răng, có tuyến Cánh hoa xoan, giáo, tù, có tuyến Nhị có nhị ngắn Bầu hình trứng, vịi mảnh, đầu nhụy hình chấm Ra hoa tháng – hoa nhỏ, chùm kép nách lá; cọng hoa 10-12mm; đài cao 1,5mm; cánh hoa 3mm, màu trắng pha hồng tím đài cánh 42 hoa Lá đài hình tam giác thn, nhọn, hợp ngắn gốc, có điểm tuyến lơng mi Cánh hoa màu hồng, hình mác, dài 3mm, đầu tù nhọn, có điểm tuyến Nhị ngắn cánh hoa, bao phấn hình mác nhọn, nhị ngắn Bầu hình trứng, vịi mảnh, đầu nhụy hình chấm Khơi tía có mọng, hình cầu, chín màu đỏ, có điểm tuyến, đường kính 78 mm Hạt 1, hình cầu, lõm gốc Tái sinh hạt chồi Có tháng 9-12 * Kết nghiên cứu nhân giống Khơi tía phương pháp giâm hom: Hom bánh tẻ cho tỷ lệ hom sống, tỷ lệ hom rễ cao tướng ứng 98,89% 97,78%, số rễ trung bình/hom chiều dài rễ trung bình/ hom lớn nhất, tương ứng 3,32 rễ 3,37cm, số rễ đạt cao 11,15 số ngày bật chồi ngắn 20 ngày, chồi mập, xanh Thời vụ giâm hom Khôi tía tốt vào vụ Xuân cho kết tỉ lệ hom sống, tỷ lệ hom rễ cao tương ứng 100% 97,78%, số ngày bật chồi ngắn 19 ngày, chồi mập, xanh Chất kích thích rễ NAA nồng độ 200 ppm công thức cho kết giâm hom tốt với tỷ lệ hom sống 98,89%, tỷ lệ hom rễ 97,78%; Số rễ trung bình/hom 4,37 rễ; Chiều dài rễ trung bình 4,45 cm Chỉ số rễ đạt 19,46 chồi mập, xanh Công thức giá thể tốt cho giâm hom Khơi tía là: 90% Đất tầng A + 5% Cát + 5% Phân chuồng hoai mục với tỉ lệ hom sống đạt 72,22%; tỷ lệ hom rễ đạt 67,78%; Số rễ trung bình/hom 3,97 rễ; Chiều dài rễ trung bình 2,93 cm Chỉ số rễ 11,62, chồi mập, xanh Kiến nghị Khơi tía loại dược liệu quý, để phát triển mở rộng diện tích Khơi tía cách hiệu bền vững cần có định hướng quy hoạch vùng trồng cụ thể Gây trồng Khơi tía gắn với bảo vệ phát triển tài nguyên rừng, góp phần phát triển sinh kế bền vững cho người dân xóa đói giảm nghèo 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng việt Lưu Tuấn Anh (2013), “Nghiên cứu thành phần hóa học loài Ardisia balansana thuộc họ Đơn nem (Myrsinaceae) Việt Nam”, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Bộ Khoa Học Công Nghệ (2007) Sách đỏ Việt Nam (phần thực vật), Nxb Khoa học tự nhiên & cơng nghệ, Hà Nội Phạm Hồng Hộ (2006), Cây có vị thuốc Việt Nam, Nxb Trẻ Lê Đình Khả Dương Mộng Hùng (2003), “Giống rừng”, NXB Nông nghiệp, Hà Nội Đỗ Tất Lợi (2004) Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB y học Nguyễn Trọng Lực (2017); “Hồn thiện quy trình nhân giống trồng thử nghiệm dược liệu Hà thủ ô đỏ (Polygonum multiflorum) lan gấm (Anoetochilus) Phú Yên”; Dự án cấp tỉnh,Trung tâm Ứng dụng Chuyển giao công nghệ Phú Yên Đặng Thị Minh (2013), Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống khôi (Ardisia silvestris Pitard) phương pháp giâm hom xã Tiên Kiệu, huyện Bắc Quang, Tỉnh Hà Giang, Trường ĐHNL Thái Ngun Phịng tài ngun mơi trường huyện Thạch An (Báo cáo Điều chỉnh quy hoạch sử dụng đất đến năm 2016- 2020) Đỗ Đình Sâm, Ngơ Đình Quế, Vũ Tấn Phương (2005), Cẩm nang đánh giá đất phục vụ trồng rừng, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 10 Nguyễn Hữu Thiện (2017), Nghiên cứu xây dựng hồn thiện quy trình nhân giống số lồi dược liệu xây dựng mơ hình sản xuất giống để xây dựng vùng trồng dược liệu địa bàn tỉnh Phú Thọ, Dự án cấp tỉnh, Công ty Cổ phần Khoa học Công nghệ Đông Á 11 Mai Quang Trường Lương Thị Anh (2007), Giáo trình trồng rừng, NXB Nơng nghiệp, Hà Nội 12 Phạm Bá Tuyến (2014), “Nghiên cứu tác dụng chế phẩm Hpmax điều trị loét hành tá tràng có Helicobacter pylori”, Đại học Y Hà Nội 44 13 Nguyễn Đình Ưng (2009), “Nghiên cứu nhân giống trồng thử nghiệm Khơi tía” Vườn QG Bái Tử Long, Báo cáo đề tài cấp tỉnh, Quảng Ninh 14 Nguyễn Văn Việt, Nguyễn Thị Hường, Bùi Văn Thắng (2016), Nhângiống Khơi tía (Ardisia silvestris Pitard) kỹ thuật ni cấy in vitro, Tạp chí NN&PTNT, số 12/2016, tr 35-39 15 Trịnh Anh Viên (2017), “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học số loài Ardisia thuộc họ Myrsinaceae Việt Nam”, Nxb.Học viện Khoa học Công nghệ Tiếng anh 16 Bulpitt, C.J (2005), The uses and misuses of orchids in medicine QJM: An Intern, Jounal Medicine, 98, pp 625-631 17 Chun-Po Chang (2010), “Antitubercular Resorcinol Analogs and Benzenoid CGlucoside from the Roots of Ardisia cornudentata”, Đại học Y khoa Kaohsiung 18 FAO (2000): Non-wood News.Rome, 2000 19 FAO (1999): Non-wood forest producs Volume 12 Rome, 1999 20 Ogawa Hideko, H S., S Yoshikihira., K Natori., S (1968), “The structures of ardisiaquinones A, B, and C, bis(benzoquinonyl)-olefine derivatives from Ardisia sieboldi Miquel”, Tetrahedron Letters, 11, p.1387-1392 21 Thomas S.C.Li (2006), Taiwanese Native Medicinal Plants, Taylor & Francis 22 Jansakul C., Samuelsson G., Baumann H., Kenne L (1986), “Utero Contracting Triterpene Saponins from Ardisia crispa”, Planta Med, p.544 23 WHO (2010), Monographs on Medicinal Plants Commonly Used in the Newly Independent States (NIS) ... tía phân bố huyện Thạch An, tỉnh Cao Bằng - Phạm vi nghiên cứu: Nghiên cứu đặc điểm sinh thái học, sinh học nhân giống giâm hom Khơi tía 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu - Địa điểm: Điều tra thu... Kết nghiên cứu nhân giống Khơi tía phương pháp giâm hom 3.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng loại hom đến nhân giống giâm hom Khơi tía Nghiên cứu ảnh hưởng loại hom đến nhân giống giâm hom Khơi tía. .. loài Khơi tía - Nghiên cứu đặc điểm: Thân, lá, hoa, quả, hạt lồi Khơi tía - Đặc điểm sinh học: đặc điểm thời kỳ sinh trưởng, hoa, 2.3.3 Nghiên cứu nhân giống Khơi tía phương pháp giâm hom - Nghiên